（浙江大学医学院附属第二医院病理科 浙江 杭州 310009）
【摘要】 目的：探讨消化道超声内镜引导下细针穿刺（EUS-FNA）细胞学检查方法在诊断胃肠道间质瘤(Gastrointestinal Stromal tumor,GIST)中的应用。方法：收集2015-2016年本科室行EUS-FNA进行细胞学检查的病例，分析被诊断为GIST的病例所采用的细胞学制片及检测方法。结果：209例EUS-FNA病例中，GIST阳性4例，其应用了普通细胞涂片、液基细胞涂片及细胞块（Cell Block）免疫组化结果，来明确诊断。而普通涂片和液基细胞涂片中见梭形细胞巢团，提示可能为间质瘤的有5例，结合细胞块免疫组化结果的提示间质瘤4例，细胞块免疫组化结果分析非GIST的1例。结论：应用普通涂片、液基细胞涂片形态学特点，同时结合细胞块免疫组化特异性标记的结果分析，可明确诊断EUS-FNA的GIST病例。
【关键词】 EUS-FNA；胃肠道间质瘤；普通涂片；液基细胞涂片；细胞块免疫组化
【中图分类号】R361+.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）27-0087-02
目前，EUS-FNA技术已被越来越多的应用于消化道占位性疾病的诊断，如胰腺占位性病变。研究表明，EUS-FNA对这些病变具有较高的诊断价值，在某些难以获取组织标本诊断的情况下应用该检查更适用且无可替代[1]。而随着细胞学制片技术的不断成熟和发展，对EUS-FNA穿刺后标本的病理诊断也在不断的提高。
1.对象与方法
1.1 对象
EUS-FNA细胞学检查被诊断为GIST的病例。
1.2 方法
收集2015-2016年本科室消化道EUS-FNA进行细胞学检查的病例，找出诊断为GIST的病例。对这些病例进行回顾性分析，诊断所采用的细胞学制片方法，以及相应的病理诊断结果。分析哪些细胞学检查方法对GIST病理诊断具有应用价值。
2.结果
经统计，发现EUS-FNA细胞学检查病例209例，有16例细胞学检查应用了普通涂片、液基细胞涂片，以及细胞块技术。明确诊断为肿瘤性质的14例，未见恶性证据的2例。明确诊断为GIST 的病例有4例，其中3例为胃体部间质瘤，1例为直肠间质瘤。
GIST阳性病例中，普通涂片见短梭形细胞巢团，液基细胞涂片见梭形细胞巢团，1例为短梭形细胞上皮样细胞巢团。细胞块的免疫组化结果：①CD117+，DOG-1+，S-100-，SMA-，CK（AE1/AE3）-，Ki-67 30%。该例涂片见短梭形细胞上皮样细胞巢团。②CD117 +，DOG-1+，S-100-，SMA+，Ki67 5%，Vimentin +，CK（AE1/AE3）-。③CD117 +，DOG-1+，S-100-，SMA +，Ki-67 30%，CK（AE1/AE3）-。④CD117 +，DOG-1+，S-100 -，SMA +，Ki-67 +，P53 +，CK（AE1/AE3）-，CD34 +。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆前3例为胃体EUS-FNA，最后1例为直肠，通过这4例的免疫组化结果综合考虑均提示为间质瘤。
此外，我们发现1例EUS-FNA 行细胞诊断的病例，其普通涂片和液基细胞涂片镜下见梭形细胞巢团，细胞块免疫组化结果分析：CD117-，DOG-1-，SMA+，Desmin+，提示为平滑肌来源，具体诊断还需与临床相结合。由此可见，应用普通涂片和液基细胞涂片观察镜下形态学特点，再结合细胞块免疫组化特异性标记结果分析，可排除其它肿瘤性疾病，明确诊断GIST。
3.讨论
GIST是胃肠道最常见的间叶源性肿瘤，其发生可能与c-kit基因和PDGFRα基因突变有关。GIST胃镜黏膜活检的检出率低，应用超声内镜可发现小于2cm的胃壁肿瘤。GIST的生物学行为可表现为良性，潜在恶性和恶性。诊断指标为肿瘤的体积，核分裂象，有无出现坏死，细胞异型性，细胞生长活跃，排列密集。GIST曾被认为平滑肌（肉）瘤，其形态学上与平滑肌瘤和神经鞘瘤很难鉴别，而免疫组化标记物如CD117、CD34等有助于明确诊断。研究表明，免疫组化标记DOG-1在诊断GIST时，与CD117一样是敏感而特异的指标，尤其是对CD117阴性的GIST的诊断中，可起补充作用[2]。SMA在小肠GIST中表达率明显高于胃GIST的表达，Ki-67可作为一个判定GIST预后的指标[3]。
EUS-FNA被认为是一种安全、有效，特异度较高的诊断手段[4]，目前多被应用于胰腺占位性病变的诊断中。在GIST诊断中，EUS-FNA标本应用适当的细胞学诊断方法，也可明确诊断。我们收集的EUS-FNA病例中，采用了普通涂片、液基细胞涂片两种细胞制片方法同时处理穿刺标本。普通涂片采用巴氏染色，液基细胞涂片采用HE染色，而在离心沉降制作细胞涂片时，我们将剩余的组织制作成细胞块，经固定脱水等处理后，用石蜡包埋成蜡块，再切片做免疫组化检测。由于穿刺时要综合考虑肿块的部位，可能出血的情况，所选穿刺俄的粗细会有所不同。而EUS-FNA穿刺针的型号不同，穿刺出的组织量也会不同。所以，并不是所有的EUS-FNA标本都可以制作成细胞块的。
GIST病理形态学上可表现为梭形细胞型、上皮细胞型、混合型。所有EUS-FNA进行细胞诊断病例中，镜下所见呈现间质瘤病理特征的病例，免疫组化结果分析，大部分为GIST。正如前面所述，形态学上鉴别GIST与其它肿瘤比较困难，而有了细胞块制作技术后，我们可对细针穿刺的少量组织，进行免疫组织化学分析。GIST诊断阳性的病例中，镜下见梭形细胞上皮样细胞巢团的病例中，免疫组化结果：CD117+，DOG-1+，SMA-；仅见短梭形细胞巢团，免疫组化结果：CD117+，DOG-1-，SMA+；可见不同的细胞成分，其免疫表型也有所差异。CD34虽然在GIST中的表达率高，但其它一些肿瘤中也有表达。4例GIST中，在直肠EUS-FNA的细胞块免疫组化中应用了CD34。
此外，Desmin、S-100可作为鉴别梭形细胞肿瘤的免疫组化标记物，用于鉴别GIST和平滑肌瘤、神经鞘瘤。如其中1例EUS-FNA，镜下见梭形细胞巢团，细胞块免疫组化结果：CD117，DOG-1均为阴性，而SMA，Desmin为阳性。因此，我们可排除GIST，考虑平滑肌来源的肿瘤。故在细胞块免疫组化检测时，可联合应用CD117、DOG-1、S-100、SMA及Desmin来进行鉴别诊断。
由此可见，EUS-FNA标本进行细胞学诊断时，应用普通涂片、液基细胞涂片镜下观察病理特征，再结合细胞块技术，选择恰当的免疫组化标记物检测结果，可明确诊断GIST。
【参考文献】
[1]程文静，等．EUS-FNA细胞学检查在上消化道旁占位病变诊断中的应用价值[J].医学临床研究，2016，7：1435-1437．
[2]艾力﹒赛丁，等．DOG1在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义[J].现代肿瘤医学，2016，24（21）：3418-3421．
[3]杜鹃，等．胃肠道间质瘤免疫表型的表达及临床意义[J].现代肿瘤医学，2015，23（10）：1389-1392．
[4]彭海霞，等．超声内镜引导下细针穿刺抽吸术在诊断上消化道及其周围占位性病变中的价值[J].2015，7：680-683．
论文作者:陈倩
论文发表刊物:《医药前沿》2017年9月第27期
论文发表时间:2017/9/21
标签：细胞论文; 涂片论文; 细胞学论文; 免疫论文; 病例论文; 肿瘤论文; 间质论文; 《医药前沿》2017年9月第27期论文;