[摘要] 目的：探讨乙肝两对半检测的临床意义和影响因素。 方法：回顾性分析2015年1月--2016年12月在我院进行乙肝两对半检测的600例体检者为研究对象，本次研究对象中男300例，女300例，年龄最小19岁，最大79岁，平均年龄为（39.8±2.4）岁。分析其检测结果及影响结果准确性的因素。 结果：该组体检者中具有传染性的大三阳、小三阳、双阳占比情况，影响检测结果准确性的因素有样本的采集及处理，试剂的影响，操作因素的影响。结论：乙肝两对半检测对乙肝病毒的检出有重要作用，应尽量排除影响因素的干扰进行鉴别。
[关键词]乙肝两对半；临床意义；影响因素
0 引言
乙型病毒性肝炎（下称乙肝）是由乙型肝炎病毒（HBV）引起的一种世界性传染性疾病，严重危害人们的身体健康。这些肝炎的共同点是可测出HBV的血清学标志，这些标志包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBeAb，也就是俗称的乙肝两对半，乙肝的预防、诊断与疗效等方面很大程度都依赖乙肝两对半的检测。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测乙肝免疫学标志物的主要方法，具有简便、灵敏、特异性高等优点，成为基层医院对乙肝诊断分型疗效观察的主要手段。但ELISA测定中影响因素较多，有时可见到一些假阳性或假阴性。因此，排除各种影响因素的干扰，有利于提高检测结果的准确性。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选取2015年1月--2016年12月在我院进行乙肝两对半检测的600例体检者为研究对象，本次研究对象中男300例，女300例，年龄最小19岁，最大79岁，平均年龄为（39.8±2.4）岁。
１．２方法
所有体检人员要求在进行体检前10ｈ应要求禁食，次日清晨应抽取3ｍl空腹肘正中静脉血作为检测标本，在抗凝管中进行混勻1ｈ内分离血浆，离心速度为3000ｒ／min，离心10min。利用酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测表面抗体（HBsAb）、表面抗原（HBsAg）、ｅ抗体（HBeAb）、ｅ抗原（HBsAg）、核心抗体（HBeAb）等相关的乙肝免疫学标志物水平。
1.3 常见的检测结果
1.3.1三项阳性。①乙肝小三阳。主要是指HBeAb、HBcAb、HB-SAG等检测结果显示阳性，其余指标检测均呈现阴性。这种检测结果提示患者的传染性并不强，可能是慢性抗原携带者或者正处于感染恢复时期。②乙肝大三阳。主要是指HBeAg、HBeAb、HBsAg检测阳性，而其
余指标检测结果均显示阴性。这种检测结果患者常常是处在慢性或者急性感染期，这种时期下ＨＢＶ会大量复制，具有较强的传染性。③乙肝恢复期。这种检测结果显示HBcAb、HBeAb、HBsAb等检测呈现阳性，其他指标检测均为阴性。
1.3.2 两项阳性。①早期急性乙肝。检测结果显示HBeAg及HB-SAG指标为阳性，其他指标检测属于阴性。②急性、慢性乙肝。检测结果显示HBeAb、HBsAg指标属于阳性，其他指标检测结果显示阴性。③存在乙肝病史或处于乙肝恢复期检测结果显示：HBeAb、HBeAb属于阳性，而其他为显示阴性。④存在乙肝抵抗力。这种检测结果显示HBeAb、HBsAb属于阳性，其他指标属于阴性，大多数表示乙肝病毒感染后已经恢复，或者已经接种过乙肝疫苗。
1.3.3 单项阳性。①隐形乙肝病毒携带者、感染窗口期或者受到乙肝病毒感染。只有检测出HBeAb阳性，其余指标均为阴性。②乙肝潜伏期。只有HBsAg检测阳性，其他指标检测均属于阴性。
２ 结果
2.1 本组乙肝两对半检测结果分析本次研究的体检者中，传染性小三阳者68例、传染性大三阳者18例、双阳者9例。具体见表１所示。
表１ 本组乙肝两对半检测结果分析（ｎ，％）
2.2 影响乙肝两对半检测的相关因素
在临床进行乙肝两对半检测的过程中，常常会受到很多因素的影响，主要包括以几个方面：①采集、处理样本。在样本采集、处理环节中，样本出现溶血现象，又或者在标本尚未完全凝固的情况下强行进行离心分离，导致血中残留部分纤维蛋白原，进而附着于酶标板的孔壁内部，不利于清洗酶标志物，很容易增加检测假阳性或者假阴性率。②试剂。如果采用的检测试剂是劣质产品，势必会使检测结果出现假阴性或者假阳性，这主要是因为生产厂家的差异，生产出来的试剂在灵敏度、特异性方面存在较大区别。而且检测方法不同，采用的检测试剂也有所差异，这样也会影响检测结果。③操作影响。加样吸量出现误差或者加样吸嘴出现污染的情况下，对于检测结果会有直接的影响。洗涤是ELISA检测操作中非常重要的一个环节，在操作过程中应尽量采用水浴，这样可有效避免污物进入，也可有效防止受热不均。其次，如果显色时间不足的情况下也会导致出现假阴性。
3 乙肝两对半检测结果的影响因素
3.1 样本采集与处理的影响
这主要是采集的样本产生了溶血，或采血试管反复使用造成交叉污染、洗涤不彻底，或标本凝固不全强行离心分离血清，致使部分纤维蛋白原残留于血中，这些纤维蛋白原易附着在酶标板孔壁内，影响酶标志物的清洗，从而造成检测结果的假阳（阴）性。
3.2 试剂的影响
高质量的试剂是保证结果准确的关键因素，使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。一方面厂家不同，其试剂的特异性和灵敏度就会有差别，有的厂家酶标板孔间A值差>15%，这必然会导致检测结果的差异。另一方面，不同方法学的检测试剂的检测结果也有一定的差别，电化学发光检测HBsAg结果为阳性，而ELISA法检测为阴性。
3.3 操作因素的影响
加样吸嘴的污染和吸量的误差都会直接影响检测结果。“HOOK”效应、边缘效应是ELISA法自身决定的，均可导致HBV实际检测工作中的假阴性，要尽可能使用水浴，以防止受热不均和污物入侵。ELISA操作的重要环节之一是洗涤，在操作洗板机时要保持针孔内的洗液的通畅性，保证未结合标志酶彻底的洗脱，否则会造成检测结果的假阳（阴）性。此外，显色时间不充分也容易产生假阴性的结果。
4 讨论
乙肝在我国有着较高的发病率，其起病缓慢，多无症状，病毒携带者较多，且传播途径较广，可引起急性、慢性、迁延性、活动性肝炎，有些病情凶险，死亡率高。本研究结果表明，该组体检者中具有传染性的大三阳、小三阳、双阳人数也不算少，充分提示乙肝两对半对乙肝病毒的检出有重要的临床意义。乙肝的预防、诊断与疗效等方面很大程度都依赖乙肝两对半的检测，但影响乙肝两对半检测结果的因素较多，在临床实际操作中，应排除影响因素的干扰进行鉴别，为预防乙肝，部分HBsAg阴性人群在接种乙肝疫苗后的1～2周内，血清中可检出HBsAg成分，形成一过性HBsAg阳性，因此建议接种乙肝疫苗后1个月内不应作HBsAg检测。此外，乙肝两对半的检验工作者要本着严谨负责的态度，注意到样本采集、试剂及操作因素的影响，加强临床与实验室之间的沟通或转至有条件医院进行确诊，提高检测的准确性。
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论文作者:刘世玉
论文发表刊物:《医师在线》2017年2月下第4期
论文发表时间:2017/4/13
标签：乙肝论文; 阴性论文; 阳性论文; 两对半论文; 因素论文; 试剂论文; 指标论文; 《医师在线》2017年2月下第4期论文;