哈尔滨市传染病院 黑龙江哈尔滨 150036
摘要：目的：建立HCV基因分型方法，研究HCV基因型与肝病程度的关系，为丙肝诊断和治疗提供理论依据。方法：HCV基因组NS5区PCR扩增产物酶切分型。结果：酶切分型证实，53例为HCVⅡ型（1b），37例为HCVⅢ型（2a）。未发现Ⅰ型（1a）、Ⅳ型（2b）以及其他基因型。根据诊断标准，确诊为慢性丙肝46例，丙肝后肝硬化44例，未发现急性肝炎。HCV基因型与不同肝病程度的，按预定治疗方案对所确定的病例进行治疗，疗程期满，其治疗效果为：CR34例，PR24例，NR32例。结论：HCV基因型同肝病严重程度关系密切，并对抗病毒治疗影响重大。HCV基因分型对于患者的诊断及治疗具有重要指导意义。
关键词：HCV基因分型；丙肝；干扰素；聚合酶链反应
Application of HCV genotyping in hepatitis C diagnosis and medical examination
Abstract：Objective：To establish a method of HCV genotyping to study the relationship between HCV genotypes and the degree of liver disease，and to provide a theoretical basis for the diagnosis and treatment of hepatitis C. Methods：PCR amplification products of NS5 region of HCV genome were digested by restriction enzyme digestion. Results：Enzyme digestion confirmed that 53 cases were HCV type II（1b）and 37 cases were HCV type III（2a）. No type I（1a），type IV（2b）and other genotypes were found. According to the diagnostic criteria，46 cases were diagnosed as chronic hepatitis C and 44 cases were hepatitis C cirrhosis. No acute hepatitis was found. HCV genotype and degree of different liver disease，according to the scheduled treatment of the treatment of the identified cases，the course of treatment，the treatment effect is：CR34 cases，PR24 cases，NR32 cases. Conclusion：The genotype of HCV is closely related to the severity of liver disease and has a significant impact on anti-virus treatment. HCV genotyping has important guiding significance for the diagnosis and treatment of patients.
Key words：HCV genotyping；Hepatitis C；Interferon；Polymerase chain reaction
前言
丙型肝炎病毒（HCV）是引起慢性肝炎和肝硬化的主要病原体之一，感染率一般在0.5%～2.0%之间，我国为3.2%。感染者的肝病程度和治疗效果存在较大差异，究其原因，人们发现HCV的基因型是导致这些差异的主要因素之一。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆HCV为单股正链RNA病毒，其全基因序列已基本被阐明。由于HCV复制时所依赖的多聚酶缺乏校对功能，加上其本身为适应环境和逃避宿主的免疫监视作用而易发生突变，因此在长期的演化过程中逐渐形成了众多突变株，即基因型。HCV感染者的肝病严重程度与治疗效果存在较大差异，HCV的基因型是造成此类差异的重要因素。为探讨HCV基因型同肝病严重程度的关系，研究HCV基因型同干扰素抗病毒疗效的关联，现报告如下。
1资料与方法
1.1试剂
抗-HCV检测试剂盒，用于筛选病例。
逆转录酶、限制性内切酶（A luⅠ，BalⅠ，Cf r10Ⅰ，ApaⅠ，M boⅠ）。
CR相关试剂、聚丙烯酰胺凝胶。
1.2资料
选取我院2015年1月-2017年6月期间收治的90例抗－HCV阳性患者作为研究对象，男36例，女54例，年龄（21-75）岁，平均年龄（40.75±12.52）岁。所选取患者的诊断均符合我国2001年《中华传染病杂志》的病毒性肝炎诊断标准。
1.3方法
应用抗-HCV检测试剂检测血清丙肝抗体，筛选病例。同时去除乙肝病毒等其他病毒合并感染者。用HCV基因组NS5区PCR检测方法确定研究病例。PCR阳性者为本文研究病例，并依据1995年5月北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的《病毒性肝炎诊断标准》对病例进行临床诊断，分为急性肝炎、慢性肝炎和丙肝后肝硬化。
依据血清ALT的变化判断疗效，分为三种治疗效果：
a.完全应答（CR）用药期间ALT水平在4周内降至正常（<40U/L），并持续16周无反复者。
b.部分应答（PR）：用药期间ALT水平低于正常上限的1.5倍（≤60U/L），但异常时间超过16周者。
c.无应答（NR）：用药期间ALT水平持续高于正常上限的1.5倍（>60U/L）者。
1.4疗效判定标准
疗效评定标准参考2015年新版《丙型肝炎防治指南》。无应答（Null responseNＲ）：治疗第12周HCV ＲNA较治疗前下降＜2log。部分应答（Partial response PＲ）：治疗第12周HCV ＲNA较治疗前下降≥2log，且第12周和第24周HCV、ＲNA可测。快速病毒学应答（Ｒapidvirological response ＲVＲ）：治疗第4周HCV ＲNA不可测。
1.5统计学方法
应用SPSS13.0统计软件，计数资料采取X2检验或Fisher确切概率法，P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
经筛选，确定90例患者为本文研究病例。酶切分型证实，53例为HCVⅡ型（1b），37例为HCVⅢ型（2a）。未发现Ⅰ型（1a）、Ⅳ型（2b）以及其他基因型。根据诊断标准，确诊为慢性丙肝46例，丙肝后肝硬化44例，未发现急性肝炎。HCV基因型与不同肝病程度的，按预定治疗方案对所确定的病例进行治疗，疗程期满，其治疗效果为：CR34例，PR24例，NR32例。
3讨论
HCV感染后，大多易转变为慢性肝炎，若不进行合理治疗，很容易发展成肝硬化甚至原发性肝癌。近年来，HCV基因分型越来越得到大家关注，并成为研究热点。一些研究发现，丙型肝炎病毒基因型在分布上存在较为显著的地域差异，我国以1b型与2a型为主，南北方城市差别并不是很大，但南方的1b型多于东北城市，在少数民族地区型别的分布差异较大。应用IFN-α2b进行抗病毒治疗时Ⅲ型HCV感染者的疗效好于Ⅱ型HCV感染者，在治疗上要考虑基因型的影响。
综上所述，HCV基因型与肝病严重程度有着密切关系，并且对抗病毒治疗产生很大影响。因此，HCV基因分型检测可为HCV感染者的诊断和治疗提供重要的科学依据。
参考文献：
[1]高丽，杨绍敏.HCV基因分型进展及临床意义.[J]传染病信息，2013，2：122-125．
[2]黄超群，王福祥．丙型肝炎病毒基因分型的研究进展.[J]世界华人消化杂志，2012，35：3529-3535．
论文作者:王晓莹
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第23期
论文发表时间:2018/1/11
标签：丙肝论文; 基因型论文; 病例论文; 基因论文; 肝病论文; 肝炎论文; 肝硬化论文; 《中国误诊学杂志》2017年第23期论文;