（1广西壮族自治区龙潭医院检验科 广西 柳州 545005）
（2广西壮族自治区龙潭医院中心实验室 广西 柳州 545005）
【摘要】 目的：探讨Xpert法和L-J法检测痰液抗酸杆菌在肺结核诊断中的应用价值。方法：指导肺结核患者同时留取晨痰两份分别用Xpert法和L-J法进行抗酸杆菌检测。结果：Xpert法与L-J法培养结果符合率为80.9%，二者对利福平的耐药性检测符合率达98.4%。结论：Xpert法检测结核杆菌及其利福耐药性对肺结核的快速诊断有着重要的意义，二者相结合更能提高肺结核的诊断率。
【关键词】Xpert法；L-J法；利福平；符合率
【中图分类号】R446.61 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）36-0216-02
传统的L-J法检测抗酸杆菌对结核病的诊断和治疗有着非常重要的价值，但阳性率不高，并且利福平的耐药检测时间太长。近年来，在Gene Xpert多重平台上开发了结核病扩增检测技术（Xpert MTB/RIF系统），同时检测结核杆菌对利福平的耐药，现将广西壮族自治区龙潭医院最近的Xpert MTB/RIF法和L-J法检测痰液结核分枝杆菌的检测结果报道如下。
1.材料与方法
1.1 病例来源
121例标本均来自2015年12月-2016年3月到广西壮族自治区龙潭医院就诊并且临床已诊断为肺结核患者的痰液，其中男74例，女47例，年龄为14～78岁。
1.2 仪器与试剂
美国Cepheid公司的Gene Xpert检测系统及试剂；罗氏培养基和药敏培养基由珠海贝索公司提供，pH 6.8的磷酸盐缓冲液和6%的NaOH消化液等相关试剂均为本室按《结核病诊断细菌学检验规程》配制[1]。
1.3 方法
1.3.1 L-J法和药敏试验 先用消化液将患者痰液进行消化15min后加缓冲液中和,3000r/min离心取沉淀0.2ml接种于罗氏培养基,斜放24小时后置于37℃的孵育箱进行培养，阳性用含药罗氏培养基管进行药敏试验，56d后无菌生长发阴性报告。药敏采用间接比例法，28d看结果，含药培养基上生长的菌落数与对照管生长的菌落数之比大于1%判定为耐药，质控菌株为H37RV。
1.3.2 Xpert MTB/RIF法 先将1-2mL痰标本加到有螺旋盖的前处理管中后加入相当于痰标本2倍体积的SR痰标本处理液。将前处理管放在涡旋振荡器上震荡20秒左右，直至无可见块状痰标本存在。打开Cartridge反应盒，使用试剂盒内提供的专用无菌吸管，将取2ml处理后样品由加样孔缓慢加入Cartridge反应盒内。然后将Cartridge反应盒放入Gene Xpert检测系统进行检测，2小时后系统会自动显示MTB和RIF检测结果。
1.4 统计学处理
用Excel2010进行数据统计，用spss13.0统计软件进行率和χ2检验。
2.结果
2.1 Xpert法与L-J法培养结果符合率
121份痰液两种方法检测结核杆菌共有86例阳性，阳性率为71.1%，其中L-J法阳性76例，阳性率为62.8%，Xpert法阳性73例，阳性率为60.3%，两种方法均阳性63例，有13例Xpert法阴性涂片法阳性, 有10例L-J法阴性Xpert MTB/RIF法阳性。二者比较,无显著性差异（χ2=1.77，P＞0.05），有26例两种方法均阴性，有9例L-J法NTM阳性而Xpert法阴性，Xpert法与L-J法培养结果符合率为80.9%，见表1。
2.2 Xpert法与比例法对利福平的耐药性检测符合率
两种方法均阳性63例中，利福平均耐药17例，利福平均敏感45例，有1例为比例法敏感而Xpert法耐药，二者对利福平的耐药性检测符合率达98.4%，二者比较,无显著性差异（χ2=1.83，P＞0.05），见表2。
3.讨论
肺结核是由于患者肺部感染结核菌后所导致的疾病，大多数结核菌存在于肺部病灶坏死组织，可通过痰把结核杆菌排出体外，所以，我们可以把痰液是否检出结核菌来诊断患者是否患有结核病。传统的检测方法主要以痰涂片和L-J法为主，但是这两种检测方法检出率过低，L-J法所需时间为1～3个月，而Xpert MTB/RIF法仅用2小时就能得出诊断和利福平的耐药性结果。一般情况下痰L-J法培养阳性率为25%左右[2-3]，而本文报道的痰L-J法培养高达62.8%，这是由于本文所选病例均为临床已诊断为肺结核的病例。本文结果显示两种方法均阳性63例，有26例两种方法均阴性，根据Xpert法的检测原理，Xpert法检测系统无法检测NTM，Helb等[4]最先对Xpert MTB/RIF系统特异度检验，共检测了20份不同的非结核分枝杆菌20份均正确排除，特异度100％；将高浓度的非结核分枝杆菌和低浓度的结核杆菌混合，系统对结核杆菌的检测出率亦达到100%[4]，说明Xpert法检测抗酸杆菌不受非结核分枝杆菌菌体存在的影响。
利福平耐药被作为耐多药的一个重要指标。Xpert MTB/RIF系统对利福平耐药菌株rpoB区的23个不同变异类型均能检测到。以表型药敏检测为金标准，Boehme发现Xpert MTB/RIF对利福平耐药株、敏感菌株检测的敏感性分别达到97.6％和98.1％[4]，本文报道Xpert MTB/RIF对利福平耐药株、敏感菌株检测的敏感性分别达到100％和97.8％，对利福平的耐药性检测符合率达98.4%，Blakemoer等检测42份利福平敏感菌株和37份耐药菌株，检测利福平耐药的敏感度和特异度均为100％。Xpert MTB/RIF系统无论在特异性和敏感性方面均有较好的检测效果，与L-J法相比，二者在MTB和利福平耐药检测结果上基本相近，但Xpert MTB/RIF法不能检测NTM，也不能明确感染控制干预措施的实施，如果将Xpert MTB/RIF法和L-J法相结合，更能提高肺结核的诊断率，对防治耐药肺结核方面有更大的意义。
【参考文献】
[1]中国防痨协会.结核病诊断细菌学检验规程[M].1996,18(1): 28-31.
[2]陈海强,唐柳生.341例AIDS合并肺结核患者痰液两种方法培养及其药敏分析[J].中国实用医药,2014,9(12):167-168.
[3]杜彦懿,王平,张文莉等.涂片镜检法与培养法检测结核分枝杆菌的结果比较[J].内蒙古中医药,2011,30(24):83-84.
[4] Helb D,Jane M,Story E,et a 1.Rapid detection of mycobacterium tuberculosis and rifampin resistance by use of on-demand,near-patient technology[J].Clin Microbiol,2010, 48(1):229-237.
论文作者:罗兰波1,唐柳生（通迅作者）2
论文发表刊物:《医药前沿》2016年12月第36期
论文发表时间:2017/2/7
标签：利福平论文; 阳性论文; 肺结核论文; 杆菌论文; 两种论文; 菌株论文; 耐药性论文; 《医药前沿》2016年12月第36期论文;