（昆明市第三人民医院结核科 云南 昆明 650041）
【摘要】目的 探讨脑脊液GenXpert M TB ／RIF 检测在诊结核性脑膜炎中的临床应用价值。 方法 选取本院 2016年1月至2018年8月收治的64 例脑膜炎患者，其中32例为结核性脑膜炎，32例为非结核性脑膜炎患者。对有患者的脑脊液标本分别进行涂片查抗酸杆菌、BACTEC MGIT 960 液体法以及 Xpert M TB／RIF检测 ，比较检测结果 。 结果 以临床诊断为金标准 ，GenXpert M TB／RIF 检测结核性脑膜炎的灵敏度为 34.37％ ，特异度为 100.00％ ；BACTEC MGIT 960 液体法培养法检测 TBM 的灵敏度为9.38％ ，特异度为 100.00％ ；涂片抗酸染色法检测的灵敏度为3.13％ ，特异度为100.00％ 。Xpert MTB／RIF 诊断结脑的灵敏度明显优于抗酸染色法及BACTEC MGIT 960 液体法（ p<0.05）。 结论 Xpert M TB／RIF 是一种检测 M TB 及患者是否对利福平耐药的诊断新技术 ，具有快速 、直接 、可靠 、特异度高的优点 。
【关键词】Xpert M TB／RIF ； 结核性脑膜炎 ； 诊断 ； 利福平 ； 耐药
【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2018）12-0218-02
结核性脑膜炎是神经系统结核病最常见的类型，是结核杆菌侵入蛛网膜下隙引起的软脑膜、蛛网膜进而累及脑血管部分可累及脑实质病变的疾病 。结核性脑膜炎在我国仍为常见病，由于病变所在部位及病理变化，致使结脑死亡率高、致残率高，是一严重的结核病[1]。严重者可导致患者死亡 。 早期诊断及合理治疗该病是改善患者预后的关键措施[2] 。目前临床上诊断结核性脑膜炎的方法是综合判断患者的临床症状 、体征 ，以及影像学检查 、脑脊液常规检验和生化检测结果等 ，但由于脑脊液涂片常规抗酸染色阳性率较低 ，导致诊断结核性脑膜炎比较困难，延误了治疗[2] 。往往对临床诊断结核性脑膜炎患者进行诊断性抗结核治疗，而对抗结核治疗不佳，无法甄别为耐药结核性脑膜炎或其他中枢神经系统感染。因此寻找一种快速 、准确 、有效的诊断方法十分必要 。Gen Xpert MTB / RIF是一种新型的 MTB 感染及利福平耐药性分析的分子诊断技术，可以检测出结核分枝杆菌复合群[3] 。 本文探讨了脑在脊液 Xpert M TB／RIF 在早期诊断结核性脑膜炎并进一步检查出是否有利福平耐药结核性脑膜炎价值。
1 资料与方法
1 ．1 一般资料 选取本院 选取本院 2016年1月至2018年8月收治的64 例脑膜炎患者，其中32例为结核性脑膜炎 组 ：男 21例 ，女 11 例 ，年龄 15 ～ 64 岁 ，平均（38.24 ± 4.25）岁 。 非结核性脑膜炎 组 ：男 18 例 ，女 14 例 ，年龄13 ～ 67岁 ，平均（35.14 ± 10.23）岁 ， 两组患者的性别 、年龄以及发病至就诊时间等方面比较 ，差异均无统计学意义 （P>0.05） ，具有可比性 。
1 ．2 诊断结核性脑膜炎的诊断标准参考 Ahuja 等[4]
提出的相关标准 ：（1）患者有其他部位结核病史，特别是肺结核为血型播散型肺结核。患者具有发热 、头痛 、呕吐等临床表现 ，脑膜刺激征阳性或伴有局灶性神经损害 ，伴或不伴有结核分枝杆菌感染的全身症状 ；（2）脑脊液常规检验结果显示细胞数明显增加（10.-500个／微升） ，淋巴细胞比例在 50％ 以上 ，蛋白 ＞ 1 g ／L ，葡萄糖 ＜ 血糖的 50％ （低于 2.2 mmol／L） ，阿利新兰染色未见隐球菌 ，细菌培养阴性 ；（3）头颅 CT 或 MRI检查结果显示存在脑基底池渗出 、梗死灶 、脑积水或结核瘤等表现 ；（5）患者有其他部位结核病史，特别是肺结核为血型播散型肺结核；（5）排除其他的神经系统疾病 。 满足以上（1）（5）和（2）（3）（4）中任意两项即可诊断 。 非 结核性脑膜炎的诊断标准参考人民卫生出版社《神经病学》（第 5 版）[5]中制定的相关标准 ，其中包括脑膜白血病 、化脓性脑膜炎及脑膜癌 。
1 ．3 检测方法 所有患者在排除腰椎穿刺禁忌证后 ，采集脑脊液 4 mL 进行检测 。 所有标本均严格按照说明书分别进行脑脊液标本分别进行涂片查抗酸杆菌、BACTEC MGIT 960 液体法以及 Xpert M TB／RIF检测 ， 以美国 Cepheid 公司 Xpert M TB／RIF 试剂盒说明书进行 XpertM TB／RIF 检测 ，并进行质量控制措施 。2 h 后 ，系统自动判读检测结果与利福平耐药分析结果 。
1 ．4 统计学处理 所得数据应用统计学软件 SPSS19.0 进行研究数据的统计学分析 ，计量资料以 表示 ，组间比较采用 t 检验 ；计数资料以率（％ ）表示 ，组间比较采用 R × C χ２ 检验 ，然后进一步两两比较 ；以临床诊断为金标准分析各检验方法对结脑的诊断效能 ；以 P＜0.05 为差异有统计学意义 。
2 结 果
2 ．1 3种方法结脑 检测结果 32例结脑患者 GenXpert MTB／RIF 检测阳性11 例 ，非结脑患者检测阳性0例 BACTEC MGIT 960 液体法3例 ，非结脑患者检测阳性0 例 ；抗酸染色法检测阳性1例 ，非结脑患者检测阳性0例 。
见表 1 。
表 1 3种方法检测结果[n（％ ）]
2 ．3 结核分枝杆菌对利福平耐药情况分析 32例 结脑患者脑脊液标本中 ，BACTEC MGIT 960 液体法检测3例结核分枝杆菌，发现耐药菌 1 株，耐药检出率3.12% ， GenXpert MTB／RIF 检出11例结核分枝杆菌检查出利福平耐药3株，耐药检出率9.38%。脑积液GenXpert MTB／RIF 耐药检测率明显高于BACTEC MGIT 960 液体法。
3 讨 论
结脑是死亡率高、致残率高的疾病，曾有报道结脑发病后5天开始抗结核治疗，死亡率6.2%，第10天开始抗结核治疗，死亡率为29.3%，第15天开始治疗，死亡率52.7%，而第20天开始抗结核治疗，全部死亡[1] 。 早期诊断及治疗对提高治愈率尤为重要。 目前 ，诊断 结核性脑膜炎依赖于临床表现 、脑脊液常规检验和生化检测结果及影像学检查，缺乏细菌学依据 。 抗酸染色法在脑膜炎检查中灵敏度较低 。BACTEC MGIT960培养法灵敏度较抗酸染色法高 ，但是 ，报告结果需要较长时间 ，一般需要 3-4 周 ，报告阴性结果则需要的时间更长 ，一般在6-8周 。2010年12月 ，世界卫生组织批准了 Xpert MTB／RIF 在临床的推广使用 。 Xpert M TB／RIF 是一种以半巢式实时定量PCR 为技术基础 ，利用美国 Cepheid 公司生产的基因 XpertM TB／RIF 平台系统 ，可以同时检测 结核分枝杆菌复合群和利福平耐药 。本研究结果显示 ，Xpert M TB／RIF 检测 结脑的灵敏度为 34.37％ ，特异度为 100.00％ ；其灵敏度明显优于抗酸染色的 3.31％ （ p<0.05） ，和 BACTEC MGIT 960 液体法9.38%（ p<0.05）。虽然该检测技术在脑脊液的敏感度未能达到临床要求 ，但是，该检测技术检测阳性率及灵敏度远高于传统的细菌学检测，且操作较抗酸染色 、BACTEC MGIT 960 液体法培养简单 ，出具结果的时间较短，2小时出报告，利于做结脑的早期诊断。Xpert M TB／RIF 最突出的优势在于 ：它可以同时检测利福平的耐药情况 。 研究表明 ，在结核高负荷国家 ，绝大多数利福平耐药株也对异烟肼耐药 ，因此 ，Xpert M TB／RIF 对利福平耐药的检测可以为耐多药结核的筛查提供一种快速 、灵敏的方法[6] 。 本研究中脑积液GenXpertM TB／RIF 利福平耐药株检测率耐药检出率9.38% ， BACTEC MGIT 960 液体法耐药检出率3.12%，高于传统培养方法，但因样本量较少，未做进一步统计学检验，仍需要更大样本量来研究利福平的耐药率 。综上所述 ，Xpert M TB／RIF 是一种检测 结脑患者是否对利福平耐药的诊断新技术 ，具有快速 、直接 、可靠 、特异度高的优点，早期应用于结核性脑膜炎的检测，可以提高早期对结脑的诊断，改变患者的预后。
参考文献
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[2]陈效友 ．成人结核性脑膜炎诊疗进展[J] ．中国实用内科杂志 ，2015 ，35（8） ：661-667 ．
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[5] 王维治 ．神经病学 [M ] ．5 版 ．北京 ：人民卫生出版社 ，2009 ：175-179 ．
[6] 伊惠霞 ，侯新月 ，王泉 ，等 ．Xpert M TB／RIF 系统快速检测结核分枝杆菌及利福平耐药性研究[J] ．新疆医科大学学报 ，2014 ，37（12） ：1643-1647 ．
论文作者:刘永莉,金永梅通讯作者
论文发表刊物:《中国医学人文》2018年第12期
论文发表时间:2019/3/12
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