湖南省长沙泰和医院检验科 410000
摘要：目的：探讨阴道细菌检验中运用革兰氏染色法、PCR检验法以及细菌培养法的临床效果。方法：选择我院2015年9月-2016年9月期间收治的患者77例为研究对象，分别运用革兰染色法、PCR检验法以及细菌培养法对患者进行阴道细菌检验，并且对比分析三种方法的检验结果。结果：与革兰氏染色法相比，细菌培养法和PCR检验法的检出率均较高，对比差异明显（P<0.05）；但是PCR检验法和细菌培养法的检出率比较无差异（P>0.05）；同时，三种方法的细菌检出情况对比有统计学意义（P<0.05）。结论：临床上运用PCR检验法进行阴道细菌检验，其敏感性和特异性较高，有助于疾病的诊断和治疗。
关键词：阴道细菌；革兰氏染色法；细菌培养法；PCR检验法
阴道炎是妇科的一种常见病、多发病，其发生与患者阴道感染细菌有关，通常情况下，女性的阴道具有一定的自净能力，但是如果在细菌感染严重或机体抵抗力明显下降的情况下，也会降低这种自净能力，从而诱发炎症。一般来说，阴道炎患者发病后，如果不及时治疗，不仅影响患者的正常生活，还容易诱发急慢性盆腔炎或异位妊娠，具有较大的危害性。当前在诊断阴道炎时，细菌检验是比较重要的一个项目，常见方法有很多，包括PCR检验法、细菌培养法以及革兰氏染色法等，其准确率也存在着一定的区别。因此，本文对革兰氏染色法、PCR检验法以及细菌培养法运用在阴道细菌检验中的临床价值进行了探讨，如下报道。
1.资料和方法
1.1一般资料
选择2015年9月-2016年9月期间我院收治的77例患者为研究对象，年龄20—52岁，平均（35.6±15.8）岁，其中50例已婚、27例未婚，所有患者均出现了不同程度的白带异常、外阴瘙痒等症状。
1.2方法
1.2.1标本采集
取膀胱截石位，在无菌阴道镜的直视下，充分暴露宫颈，运用无菌棉签在患者的阴道后穹窿处对患者的阴道分泌物进行收集，放入试管中，待检。
1.2.2细菌培养法
首先取出试管中的阴道分泌物，在无菌的环境下，在细菌分离专用培养基（生产厂家：上海生物科技公司）上接种，完成接种后，在35°C环境下的CO2培养箱内孵育和培养48h，完成孵育后，观察培养物，选择呈现出灰色且水滴状、半透明的菌落，运用奥林巴斯CX41型显微镜进行生化检验。
1.2.3PCR检验法
在500ml生理盐水中放入阴道分泌物，在离心机上以12000r/min转速进行10min的离心处理后，去除上清液，将碱性裂解液掺入，完成上述操作后，在98°C环境中进行10min加热，然后以12000r/min转速进行5min的离心，完成后，对上清液进行分离，对DNA模板进行设计。在制作DNA模板时，运用PCR试剂，选择添加DNA模板为阳性组，而未添加DNA则为阴性组，对比分析两组结果。同时，在进行PCR扩增和PCR产物检查时，将25μl无菌离子水取出，在其表面均匀覆盖无菌液状石蜡，然后进行PCR循环，共32环，严格按照操作要求进行。
1.2.4革兰氏染色法
选择完整的载波片，运用纱布进行轻轻擦拭，完成擦拭后，放入95%乙醇中浸泡，取出且晾干，然后在载玻片上均匀涂抹阴道分泌物，运用盖玻片进行固定，然后进行革兰染色，并且在显微镜下对切片中的病菌种类和数量进行观察。
1.3观察指标
分别观察三种检测方法的细菌检出情况，包括棒状球菌、肠球菌以及加特纳菌等。
1.4统计学分析
本次研究数据采用SPSS19.0软件分析，运用X2对组间计数资料比较进行检验，以P<0.05表示有差异。
2.结果
2.1三种方法的阳性检出情况比较
相比较革兰氏染色法而言，PCR检验法和细菌培养法的阳性率均较高，比较有明显差异（P<0.05），见表1。
3.讨论
阴道炎是发病率较高的一种妇科疾病，通常可以分为多种类型，包括细菌性阴道炎、念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎以及老年性阴道炎等，其中细菌性阴道炎比较常见，其发病与阴道内环境稳态失衡，损伤阴道上皮细胞，增加阴道内病菌有关[1]。临床上在诊断阴道炎时，通常将患者的阴道细菌检测情况作为基本依据，来明确判断患者病情，其中革兰氏染色法因为具有操作简单、价格便宜等优点，被广泛运用在临床上[2]。但是有研究发现，与细菌培养法和PCR检验法相比，革兰氏染色法的准确率较低，其原因可能为具有较多的影响因素，包括染色时间过短、过长等，均容易出现无法着色或霉菌染色过度情况，再加上观察时受到主观因素的影响，从而降低了阳性检出率[3]。与革兰氏染色法相比，细菌培养法具有较高的阳性率，但是细菌培养法也具有一定的缺点，其操作复杂，培养时间长，如果受到培养箱温度或CO2浓度不达标、实验室洁净度低等因素影响，容易出现检验误差，影响诊断准确率[4]。PCR检验法作为新型的一种阴道细菌检验技术，不仅具有操作简单、检测时间快、可重复性好等诸多有点，还具有较高的检出率，其敏感性和灵敏度均较高，能够减少漏诊或误诊情况，有助于提高临床检出率[5]。本次研究结果显示，与革兰氏染色法相比，细菌培养法和PCR检验法的病菌检出率和阳性率均较高，这一结果与陈立良[6]等研究报道一致，说明PCR检验法和细菌培养法具有较高的检测价值。
综上所述，在阴道炎患者的临床诊断中，运用PCR检验法，一方面能够缩短检测时间，简化操作流程，另一方面还能使检出率提高，为制定针对性治疗方案提供有效依据，具有一定的推广价值。
参考文献：
[1]黄乐安，邱丽阳.PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌分析中的临床应用[J].医疗装备，2018，31（07）：40-41.
[2]黄燕文，张意钗.细菌培养法、PCR检验法及革兰氏染色法进行阴道细菌检验的临床效果对比[J].现代诊断与治疗，2017，28（09）：1722-1724.
[3]李颖嫦，罗小娟，黄少珍.PCR检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的应用研究[J].现代诊断与治疗，2017，28（07）：1300-1301.
[4]邱可清，沈学群，高丽华，何冬财.分析阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床应用价值[J].中国现代药物应用，2015，9（12）：74-75.
[5]赵建萍.对比分析PCR检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果[J].中国实用医药，2015，10（15）：85-86.
[6]陈立良，林定忠.比较聚合酶链反应检验法和细菌培养法用于阴道细菌检验的效果[J].实用医技杂志，2015，22（05）：518-519.
论文作者:张莉鑫,连平,李晓阳,沈湘云
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年第16期
论文发表时间:2018/8/7
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