（1浙江大学医学院附属邵逸夫医院消化内科 浙江 杭州 310058）
（2浙江省天台县人民医院消化内科 浙江 台州 317200）
（3浙江省宁波市医疗中心李惠利医院消化内科 浙江 宁波 315040）
【摘要】 目的:探究炎症性肠病（IBD）相关血清学自身抗体的临床应用价值。方法: 选取2017年2月—8月我院克罗恩病病人（CD）184人为CD组，溃疡性结肠炎（UC）病人61人为UC组；另纳入其他肠道疾病人（排除CD和UC)31人为其他肠道疾病组，健康体检人群30人为健康体检组进行研究；检测抗酿酒酵母抗体（ASCA），核周型抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA），抗小肠杯状细胞抗体（GAB），抗胰腺腺泡细胞抗体（PAB），抗DNA结合乳铁蛋白抗体（LFS），5种血清学自身抗体在4组人群中的血清浓度。结果: UC组的pANCA、GAB-IgA、LFS检测的阳性率显著高于其他组（P＜0.05），CD组的ASCA、PAB、GAB-IgG检测的阳性率显著高于其他组（P＜0.05）；五类抗体联合检测IBD的敏感性显著高于单独检测的结果（P＜0.05）。结论:在我们的研究中发现，pANCA，LFS针对UC有诊断意义，ASCA与PAB针对CD有诊断意义。采用联合检测的方式可以有效的提高敏感性，使诊断更加准确，值得在临床中进一步推广。
【关键词】 克罗恩病；溃疡性结肠炎；抗酿酒酵母抗体ASCA；核周型抗中性粒细胞胞浆抗体pANCA；抗小肠杯状细胞抗体GAB；抗胰腺腺泡细胞抗体PAB；抗DNA结合乳铁蛋白抗体LFS
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）05-0070-03
炎症性肠病(IBD)主要是指慢性、非特异性肠道炎症，主要包括溃疡性结肠炎、克罗恩病两类疾病。目前人们主要研究的抗体分别为抗酿酒酵母抗体（ASCA），核周型抗中性粒细胞胞浆抗体(pANCA)、抗小肠杯状细胞抗体(GAB)、抗胰外分泌腺抗体(PAB)，抗DNA结合乳铁蛋白抗体（LFS），为提高IBD的诊断的敏感性，可采用联合检测的方式进行。我院选取克罗恩病（CD）病人、溃疡性结肠炎（UC）病人为实验组、其他肠道疾病（排除CD和UC)病人、健康人群为对照组，分析不同抗体在不同类型炎症性肠病患者的血清浓度，探究检测炎症性肠病相关抗体的临床价值。
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取2017年2月—2017年8月在浙江大学附属邵逸夫医院诊治，并行ASCA、pANCA、GAB、PAB、LFS检查的IBD患者245例，其中克罗恩病组184例，男128例，女56例，年龄位于13～67岁之间，平均年龄（30.3±10.1）岁；溃疡性结肠炎组61例，男35例，女26例，年龄位于19～69岁之间，平均年龄为（43.1±12.2）岁；CD和UC的诊断标准参照2012年的炎症性肠病诊断与治疗的共识意见[1]。其他肠道疾病组（排除CD和UC）31例，男18例，女13例，年龄位于24～82岁之间，平均年龄（57.9±13.8）岁；健康体检人群组30例，男14例，女16例，年龄位于15～51岁之间，平均年龄（32.6±9.8）岁；所有患者均知情同意，通过医院伦理委员会批准。
1.2 方法
血清学抗体的检测：患者空腹取静脉血，对标本随机编盲。采用间接免疫荧光法和酶联免疫法，试剂盒采用德国欧蒙公司，慢性炎症性肠病抗体检测试剂盒。按照试剂盒操作说明进行检测，分别判定 ASCA、pANCA、GAB、PAB、LFS的检测结果，滴度1:10阳性即为某抗体阳性。
1.3 观察标准
调查统计不同组患者ASCA-IgA、ASCA-IgG、pANCA-IgA、pANCA-IgG、GAB-IgA、GAB-IgG、PAB-IgA、PAB-IgG、LFS-IgA、LFS-IgG检测的阳性率，以及ASCA+/PAB+/GAB+/pANCA—/LFS—，诊断CD的敏感性和特异性，与ASCA—/PAB—/GAB—/pANCA+/LFS+，诊断UC的敏感性和特异性。
1.4 统计学方法
统计学处理：采用SPSS22.0统计软件进行统计学处理，计量资料以-x±s表示，行t检验，计数资料采用卡方检测，P＜0.05为差异有统计学意义。
2.结果
2.1 不同人群的5种血清学抗体阳性率的对比
溃疡性结肠炎组患者的pANCA-IgA、pANCA-IgG、GAB-IgA、LFS-IgA、LFS-IgG检测的阳性率显著高于其他组患者（P＜0.05），克罗恩病组患者的ASCA-IgA、ASCA-IgG、GAB-IgG、PAB-IgA、PAB-IgG检测的阳性率显著高于其他组患者（P＜0.05）。见表。
表 不同组人群的5种血清学抗体阳性率对比 [%（n/n）]
2.2 不同组人群联合检测ASCA+/PAB+/GAB+/pANCA-/LFS—诊断CD的敏感性的特异性和敏感性对比：五种抗体联合检测与单独抗体检测，特异性有所降低（P＞0.05），但无统计学意义；特异性分别如下：ASCA-IgA：(115/122)94.3%；ASCA-IgG：(113/122)92.6%；PAB-IgA：(118/122)96.7%；PAB-IgG：(121/122)99.2%；GAB-IgA：(117/122)96.0%；GAB-IgG：(106/122)86.9%；联合抗体-IgA：(104/122)85.2%；联合抗体-IgG：（91/122）74.6%。而五种抗体联合检测的敏感性显著高于单独抗体检测，两者检测的结果比较，P＜0.001，提示五种抗体联合检测的诊断CD的敏感性与各抗体单独检测，有显著性差异。敏感性分别如下：ASCA-IgA：(49/184)26.6%；ASCA-IgG：(51/184)27.7%；PAB-IgA：(40/184)21.7%；PAB-IgG：(70/184)38%；GAB-IgA：(1/184)0.5%；GAB-IgG：(45/184)24.5%；联合抗体-IgA：（76/184）41.3%；联合抗体-IgG：（118/184）64.1%。
2.3 联合检测ASCA-/PAB-/GAB-/pANCA+/LFS+诊断UC的敏感性和特异性的阳性率对比：联合检测的特异性有所降低，但与各抗体单独检测的特异性比较，P＞0.05，无统计学意义；特异性比较如下：pANCA-IgA：(242/245)98.8%；pANCA-IgG：(210/245)85.7%；LFS-IgA：(226/245)92.2%；LFS-IgG：(220/245)89.8%；联合抗体-IgA：(220/245)89.8%；联合抗体-IgG：(194/245)79.2%。而五种抗体联合检测的敏感性显著高于单独抗体检测，两者检测的结果比较，P＜0.05，提示五种抗体联合检测的诊断CD的敏感性与各抗体单独检测，有显著性差异。敏感性比较如下：pANCA-IgA：(19/61)31.1%；pANCA-IgG：(38/61)62.3%；LFS-IgA：(19/61)31.1%；LFS-IgG：(32/61)52.5%；联合抗体-IgA：(30/61)49.2%；联合抗体-IgG：(46/61)75.4%。
3.讨论
炎症性肠病IBD是一组发病机制不明的慢性肠道非特异性炎症性疾病，主要包括CD和UC。普遍研究认为，IBD是由于肠道菌群触发易感宿主导致的异常免疫反应。因此，自身抗体的检测可作为IBD诊断的实验室血清学指标之一[2]。ASCA，pANCA，GAB，PAB，LFS；是比较有代表性的相关自身抗体[3-5]。国内外研究表明，ASCA，PAB主要存在于CD患者，pANCA，LFS主要存在于UC患者。联合检测有利于CD和UC鉴别诊断[6-8]。
抗酿酒酵母抗体（ASCA）是酵母细胞壁磷酸肽甘聚糖的抗体，是一种与CD有关的血清学标志物，国外文献报道，ASCA在CD患者中的阳性率60～70%，在UC患者中的阳性率为10～15%[8]，国内报道阳性率高低不一，我们的研究，ASCA-IgA在CD组，UC组，其他肠道疾病组及健康体检组分别是26.6%，4.9%，6.5%，6.7%，ASCA-IgG四组中阳性率分别是27.7%，6.5%，9.7%，6.7%，这可能与研究的种族及选择的人群不同有关，CD组与其他组有统计学差异，可以作为CD与其他疾病的鉴别诊断，但ASCA阳性率偏低，不适合作为IBD的筛查指标。抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）是指与中性粒细胞、单核细胞胞浆成分发生反应的抗体，可将ANCA分为胞浆型、核周型、不典型三个方面[9]。核周型抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）被认为是一种通过与肠道细菌抗原交叉反应所诱导的自身抗体，主要存在于UC患者中。据国外文献报道，pANCA在UC，CD，其他肠道疾病患者及健康体检中阳性率分别是41～73%；6～38%，8%，0～8%[10]，与我们的研究基本一致，可认为pANCA可作为UC与CD及其他肠道疾病的鉴别诊断。抗小肠杯状细胞抗体（GAB）也是一种IBD相关的自身抗体，有研究表明，当患者出现溃疡性结肠炎等情况时，常出现高滴度的抗小肠杯状细胞抗体，其阳性率达15%～46.6%。我们的研究是GAB-IgA在CD组，UC组，其他肠道疾病组及健康体检组阳性率分别是0.5%，8.2%，0%，0%；GAB-IgG在CD组，UC组，其他肠道疾病组及健康体检组阳性率分别是24.5%，11.5%，16.1%， 13.3%；GAB-IgA，UC组与其他组有统计学差异，而GAB-IgG在CD组与其他组有统计学差异。国内外多数文献报道GAB检测的阳性率，未具体指出是IgA还是IgG，其结果与我们研究的GAB-IgA阳性率不同，与GAB-IgG阳性率基本一致。本研究中还发现其他肠道疾病组，健康体检组中，GAB-IgG也有一定的阳性率，提示GAB可能并非IBD特异性的血清学标志物。故GAB检测无法作为UC和CD的鉴别指标，GAB的检测意义有待进一步研究。抗胰腺腺泡抗体（PAB）出现在30-40%的CD患者血清中[5]，针对UC、CD的诊断和鉴别可以起到一定的作用，我们的研究结果是PAB-IgA在CD组，UC组，其他肠道疾病组及健康体检组分别是21.7%，6.5%，0%，0%；PAB-IgG在CD组，UC组，其他肠道疾病组及健康体检组分别是38%，1.6%，0%，0%。PAB在其他肠道疾病组及健康体检组中均未检出，在UC组中敏感度较低，在CD组中对比其他三组其敏感性较高。并且我们还发现，PAB在CD组中有较高的特异性，PAB-IgA96.7%，PAB-IgG99.2%，因此PAB可作为CD患者的一种筛查指标，并可作为CD与UC，其他肠道疾病的鉴别指标。抗DNA结合乳铁蛋白抗体（LFS）[2，11]，也是炎症性肠病患者的一种血清学标志物，目前LFS在炎症性肠病中检测的阳性率情况，国内外报道不多。乳铁蛋白（LF）—DNA复合物是不典型抗中性粒细胞胞浆抗体（aANCA）的主要靶抗原之一，两者结合形成ANCA的胞浆型抗体—抗DNA结合乳铁蛋白抗体(LFS)，可用间接免疫荧光法和酶联免疫吸附法检测。LFS是溃疡性结肠炎，自身免疫性肝炎的标志性抗体。我们的研究结果是LFS-IgA在CD组，UC组，其他肠道疾病组及健康体检组阳性率分别是10.3%，31.1%，0%，0%；LFS-IgG在CD组，UC组，其他肠道疾病组及健康体检组阳性率分别是11.9%，52.5%，3.2%，6.7%。故可认为LFS可作为UC与CD及其他肠道疾病的鉴别诊断。
本研究中，我们同时发现ASCA-/PAB-/GAB-/pANCA+/LFS+，五种抗体联合检测在溃疡性结肠炎诊断中的敏感度显著高于pANCA，LFS单独检测（P＜0.05）。ASCA+/PAB+/GAB+/pANCA-/LFS-，五种抗体联合检测在克罗恩病诊断中的敏感度显著高于ASCA，PAB，GAB的单独检测（P＜0.001）。
综上所述，对炎症性肠病患者采用相关抗体检测，其特异性较高，但缺陷为敏感性较低。pANCA与LFS的检测对于溃疡性结肠炎的诊断较为有效，ASCA，PAB的检测对于克罗恩病的诊断较为有效。由于ASCA，pANCA，GAB血清抗体阳性率偏低，不适于作为IBD的筛查指标，PAB可作为CD患者的一种筛查指标。采用联合检测的方式可以有效的提高敏感性，这些抗体联合检测在CD与UC，其他肠道疾病的诊断、鉴别诊断的判定有一定作用。抗体联合检测有利于炎症性肠病的诊断更加准确，值得在临床中进一步推广。
【参考文献】
[1]中华医学会消化病学分会炎症性肠病学组.炎症性肠病诊断与治疗的共识意见[J].中华消化杂志，2012，32（12）：796-813.
[2] Bossuyt X:Serologic markers in inflammatory bowel disease[J].Clin Chem，2006，52:171-181.
[3] Kuna AT.:Serological markers of inflammatory bowel disease [J].Biochemia Medica,2013,23(1):28-42.
[4] Nguyen DL,Nguyen ET,Bechtold ML.:pANCA positivity predicts lower clinical response to infliximab therapy among patients with IBD[J].South Med J,2015,108(3):139-143.
[5] Homsak E,Micetic-Turk D,Bozic B.:GAB and PAB in inflammatory bowel disease:prevalence,characteristics and diagnostic value[J].Wien Klin Wochenschr,2010,122(Suppl 2):19-25.
[6]李骥，吕红，钱家鸣，张茹等，抗酿酒酵母抗体和抗中性粒细胞胞浆抗体对炎症性肠病的诊断价值，中华消化杂志 2008，28（4）:666-668.
[7]高翔，胡品津，郑瑶等，炎症性肠病患者血清中自身抗体检测的临床意义[J].中华内科杂志，2005，44（9）:428-430.
[8]Keiichi Mitsuyama,Mikio Niwa, Hidetoshi Takedatsu, et.al: Antibody markers in the diagnosis of inflammatory bowel disease[J].World Journal of gastroenterology 2016; 22(3):1304-1310.
[9]杨辉，金玉，李玫，等.儿童炎症性肠病生物学标志物检测及其临床意义[J].临床儿科杂志，2016，34(10):721-725.
[10] Zhou G.·Song Y.·Yang W.et.al.:ASCA,ANCA,ALCA and Many More:Are They Useful in the Diagnosis of Inflammatory Bowel Disease?[J].Dig Dis 2016;(34):90-97.
[11] Eggena M,Cohavy O,Parseghian MH,et al.Identification of histone H1 as a cognate antigen of the ulcerative colitis-associated marker antibody pANCA[J].Autoimmunity 2000;14(1):83-97.
论文作者:徐康凤,莫雪莹,蔡颖,蔡晓静,秦心强
论文发表刊物:《医药前沿》2019年5期
论文发表时间:2019/4/17
标签：抗体论文; 肠道论文; 敏感性论文; 患者论文; 特异性论文; 阳性率论文; 血清学论文; 《医药前沿》2019年5期论文;