湖南省郴州市第一人民医院 423000
【摘 要】目的：对乳腺癌分子病理诊断中检测ERCC2基因多态性的应用价值进行分析。方法：以50例乳腺癌患者以及50例无乳腺疾病健康对照组作为研究对象，对ERCC2基因多态性分布与乳腺癌易感性、以及ERCC2基因多态性分布与乳腺癌临床病理特征进行分析。结果：rs238416位点下，两组患者在GA基因型、GA＋AA基因型、以及A基因型的分布上具有显著差异（P＜0.05）。在rs238416位点下，p53蛋白阳性乳腺癌患者GA基因型携带频率显著低于阴性患者（P＜0.05）。结论：rs238416位点基因多态性分布与乳腺癌p53蛋白表达有相关性关系，可通过对ERCC2基因多态性进行检测的方式实现对乳腺癌的早期诊断。
【关键词】乳腺癌；ERCC2；基因多态性；病理诊断
abstract：objective：to detect ERCC2 gene polymorphism in the molecular pathological diagnosis of breast cancer application value are analyzed.Methods：50 cases of patients with breast cancer and 50 cases of mammary gland disease healthy control group as the research object，the ERCC2 gene polymorphism and breast cancer susceptibility distribution，distribution and ERCC2 gene polymorphism and breast cancer clinical pathological features were analyzed.Results：rs238416 loci，the two groups of patients in the GA genotype，GA + AA genotype，and A genotype distribution had significant difference（P < 0.05）.Under rs238416 loci，GA genotype frequency to carry the p53 protein positive breast cancer patients was significantly lower than the negative patients（P < 0.05）.Conclusion：rs238416 loci gene polymorphism distribution have correlation relationship with p53 protein expression of breast cancer，can detect the ERCC2 gene polymorphism by the way of early diagnosis of breast cancer.
key words：breast cancer；ERCC2；Genetic polymorphism；Pathological diagnosis
乳腺癌是我国发病率较高的恶性肿瘤之一，病死率较高，已严重威胁妇女生命安全。几年来，有大量报道[1-2]中均证实ERCC2基因在参与受损DNA核苷酸切除修复中的重要意义，并提示多个位点与乳腺癌易感性有密切关联性。为对乳腺癌分子病理诊断中检测ERCC2基因多态性的应用价值进行分析，本研究中以50例乳腺癌患者以及50例无乳腺疾病健康对照组作为研究对象，将ERCC2基因多态性检测结果对照报告如下：
1 资料与方法
1.1 一般资料
以我院住院部2015年3月~2015年12月期间收治50例乳腺癌患者以及50例无乳腺疾病健康对照组作为研究对象，分别设置为观察组、对照组。观察组患者均为女性，年龄范围28~60周岁，平均（46.3±2.8）岁；对照组均为女性，年龄范围25~60周岁，平均（45.1±2.1）岁。对比两组受检对象基本资料，未见显著差异（P＞0.05），有可比性。
1.2 方法
抽取两组受检对象3.0ml抗凝血样本，根据试剂盒说明书提取外周血样基因组DNA，在-80℃条件下保存备用。筛选HapMap数据库中ERCC2基因型数据，以rs3916840、rs1799793、以及rs238416为分析位点。PCR扩增反应总体积大小为30.0ul，扩增条件为：在95℃条件下预变性反应5.0min，变性反应维持30.0s。rs3916840以及rs1799793在58℃条件下退火处理30.0s，rs238416在50℃条件下退火处理30.0s。然后在72℃条件下延伸20.0s，扩增至32个循环。维持72℃的反应条件延伸10.0min。相应产物应用内切酶进行酶切处理，产物用浓度2.0％琼脂糖凝胶电泳法进行鉴定。rs3916840基因经PCR扩增反应后基因型包括CC基因型、CT基因型、TT基因型、CT＋TT基因型、C基因型、以及T基因型；rs1799793经PCR扩增反应后基因型包括GG基因型、GA基因型、AA基因型、GA＋AA基因型、G基因型、以及A基因型；rs238416经PCR扩增反应后基因型包括GG基因型、GA基因型、AA基因型、GA＋AA基因型、G基因型、以及A基因型。
1.3 观察指标
对ERCC2基因多态性分布与乳腺癌易感性、以及ERCC2基因多态性分布与乳腺癌临床病理特征进行分析。其中，ER、PR、以及p53均根据病理切片样本应用免疫组化法进行分析。阳性判断标准分别为：ER、PR根据Allred评分≥3且核阳性细胞数＞10％为判断标准；p53根据核阳性细胞数＞25％为判断标准。
1.4 统计学分析
研究数据经Excel表格处理，录入SPSS统计学软件（版本号19.0）中进行分析，计数资料检验方法为x²，计量资料检验方法为t，当P值＜0.05时判定对比有统计学意义。
2 结果
2.1 ERCC2基因多态性分布与乳腺癌易感性分析
结合表1，两组受检对象在rs3916840以及rs1799793的基因多态性分布方面对比无显著差异（P＞0.05），不具有统计学意义；rs238416位点下，两组患者在GA基因型、GA＋AA基因型、以及A基因型的分布上具有显著差异（P＜0.05），具有统计学意义。
3 讨论
本次研究结果显示：rs238416位点下，两组患者在GA基因型、GA＋AA基因型、以及A基因型的分布上具有显著差异（P＜0.05），具有统计学意义。提示该位点的多态性分布与乳腺癌的发生风险密切相关。当缺失杂合突变基因型GA和等位基因A时，乳腺癌患病风险显著升高，且GA作为杂合基因型，缺失该基因会导致rs238416位点内含子增强子的功能降低，影响mRNA转录水平[3]，导致DNA修复功能下降，乳腺癌患病风险增大。除此以外，从病理关系上来看，在rs238416位点下，以GG基因为参照，p53蛋白阳性乳腺癌患者GA基因型携带频率显著低于阴性患者（P＜0.05），具有统计学意义。提示：对于乳腺癌患者而言，在缺失ERCC2 rs238416位点GA基因型时，p53蛋白阳性率升高，患者体内DNA损伤情况严重，缺乏主动修复能力，会导致病情的进一步发展与恶化，应引起重视。
综上分析：rs238416位点基因多态性分布与乳腺癌p53蛋白表达有相关性关系，可通过对ERCC2基因多态性进行检测的方式实现对乳腺癌的早期诊断。
参考文献：
[1] 霍慧霞，柳晓义，姜丹丹等.乳腺癌与载脂蛋白B基因多态性关系[J].中华实验外科杂志，2012，29（5）：812-814.
[2] 张萍，马飞，徐兵河等.微小RNA基因多态与乳腺癌易感性的关系[J].中华肿瘤杂志，2015，（7）：501-507.
[3] 陈江华，赵建华，唐金海等.环磷酰胺代谢酶基因多态性与乳腺癌化疗反应相关性的探讨[J].中华肿瘤防治杂志，2012，19（10）：726-730.
[4] 王涛，张永东，郭欢等.检测ERCC2基因多态性在乳腺癌分子病理诊断中的应用[J].临床与实验病理学杂志，2015，（3）：277-281.
[5] 杨文涛.个体化诊治时代的乳腺癌病理诊断[J].中国癌症杂志，2012，22（7）：556-560.
论文作者:吴海燕,何雄斌,胡玉林,陈志军
论文发表刊物:《航空军医》2016年第15期
论文发表时间:2016/9/6
标签：乳腺癌论文; 多态性论文; 基因型论文; 基因论文; 病理论文; 患者论文; 位点论文; 《航空军医》2016年第15期论文;