山东省淄博市职业病防治院 山东淄博 255000；2.北大医疗鲁中医院 山东临淄 255400
摘要：目的：研究复方伊曲康唑滴耳剂的制备方法、质量控制。方法：采用仪器HPLC法测定伊曲康唑含量。结果：所得制剂为无色透明液体，鉴别、检查结果均符合中国药典2010年版中的相关规定，本制剂设计合理，工艺可行，性质稳定，质量可控。结论：制备工艺合理，质量可控，值得临床推广。
关键词：伊曲康唑；滴耳剂；研制；质量控制
耳真菌病是外耳道真菌感染性[1，2]疾病，以外耳道瘙痒感耳间胀不适或耳溢液为其主要临床表现，近年来，随着广谱抗生素及激素的广泛应用或滥用，以及肿瘤患者的化疗治疗与放射治疗，免疫抑制剂的广泛应用，给条件致病真菌的感染创造了条件。临床上经常误诊或漏诊，经文献检索目前在其治疗上尚未有专用的抗真菌滴耳剂，大都是采用其他抗真菌药如氟康唑注射液、达克宁霜，外用治疗或口服抗真菌药。我们采用抗真菌谱最广的伊曲康唑，通过合理组方配制成滴耳剂，通过动物实验及临床应用，预期成果应用方便，疗效好，质量控制稳定，不良反应少，减少患者病痛，同时方便患者，降低治疗费。
1 材料
LC-20A型高效液相色谱仪，STD-20A型紫外检测器，C-RTA型色谱数据处理器（日本岛津公司）、UV-2550紫外分光光度计（日本岛津公司）；AND HR120电子分析天平（日本AND公司）。伊曲康唑（济南邦达药业有限公司，批号100230，含量99%），尼泊金乙酯（上海昊化化工有限公司），伊曲康唑对照品（南京海光应用化学研究所产品，批号100321，含量99.9%），乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为注射用水。
2 处方和制法
2.1 处方：
伊曲康唑 0.5g，氢化可的松0.5g，羟丙基－β－环糊精16g聚乙二醇 30ml，薄荷脑 0.3g，氯化钠0.8克，尼泊金乙酯0.03g 甘油40g，乙醇20ml，纯化水加至100ml。
2.2 制备方法：
低温条件下，先将羟丙基－β－环糊精16g、伊曲康唑0.5g，加入纯化水20ml，边搅拌边加入1 mol?L－1盐酸适量使其溶解。加入乙醇20ml，依次加入氢化可的松0.5g，薄荷脑0.3g，氯化钠0.8 g，加聚乙二醇搅拌均匀，超声振荡5min，再加入甘油，超声振荡至分散均匀，无气泡，加水至100ml刻度，摇匀，调PH至6.0，分装成10ml/支，即得。
3 质量控制
3.1 性状：本品为无色澄明液体。
3.2 鉴别
3.2.1 取“3.4.1” 项下液体进行紫外扫描测定，样品在256nm波长处有最大吸收。
3.2.2 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与伊曲康唑对照品溶液主峰时间保留一致。
3.2.3 本品显有机氟化物的鉴别反应[3]。
3.3 检查pH值应为5.5~7.0。
其它 应符合滴耳剂项下有关的各项规定（《中国药典》2010年版二部附录IR）。
3.4 含量测定
3.4.1 色谱条件
参考药典[4]，对流动相进行微调，采用0.04mol/L磷酸二氢铵溶液（用氨水调节pH 值至6.0）-乙腈（50∶50）为流动相，流速为1.0 mL/min；色谱柱为ShimPack CLC2ODS C18，进样量为20μL；取伊曲康唑对照品，用流动相溶解并稀释成约20mg/L溶液，用紫外分光光度计在190～450nm范围内扫描，结果显示本品在255.4nm处有明显的特征吸收，因此检测波长确定为256nm。
3.4.2 标准曲线的测定
精密称取伊曲康唑对照品适量，用流动相稀释成0.1000，0.1600，
0.4000，0.5000，0.6000，0.9000mg?mL-1的溶液，分别量取20μL注入高效液相色谱仪，记录色谱。以浓度（C）为横坐标，峰面积（X）为纵坐标进行回归，回归方程为X＝1.3185×107C+2356617（r=0.9999）。结果表明，伊曲康唑在0.1000~0.9000mg?mL-1内浓度与峰面积成良好线性关系。
3.4.3 精密度试验 取对照品溶液20μL，在1d内连续进样5次，结果日内RSD＝0.76%；取室温条件下的对照品溶液，连续5d进样检测，结果日间RSD=0.78%。
3.4.4 回收率试验 按处方比例精密称取不同浓度的伊曲康唑和辅料，置于100ml量瓶中，加流动相至刻度摇匀，配制成高、中、低3种浓度的溶液。每种浓度取样20μL，按“3.4.1”项下色谱条件测定峰面积，计算回收率，结果见表1。
3.5 样品稳定性考察
3.5．1 急性试验 取3批样品，置于温度为40℃、相对湿度为75%的环境中放置6个月，根据产述考察项目和方法，分别于第1，3，5，6月取样检测，各项考察指标与放置前比较均无明显变化。
3.5.2 长期试验 取3批样品，置于室温、相对湿度为60%的环境中放置12个月，根据前述考察项目和方法，分别于1，3，5，9，12月取样检测，各项考察指标与放置前比较均无明显变化。
3.6 刺激性试验
取健康双耳正常的成年白兔6只，体重2.2~3.5kg，每只右耳滴入本品，左耳滴入生理盐水做对照，3次d-1，1滴?次－1，连续10d。每次用药后观察记录，结果白兔无躁动，耳部无充血、红肿等异常现象。表明本制剂无刺激性，耳用安全。
4 讨论与小结
以往认为外耳道真菌感染少见，但近年来本病的发病率有增无减[2]伊曲康唑是广普抗真菌药，有良好的抗真菌作用，但本品水溶性较低，为1×10-3mol?L-1，要发挥其抗菌活性必须提高其在水中的溶解度，羟丙基－β－环糊精具有水溶性强，稳定性高，“外亲水，内疏水”的特性，是一种安全有效地药物增溶剂和吸收促进剂，易与药物形成包合物，从而提高药物的溶解度和生物利用度。在酸性条件下将伊曲康唑制成羟丙基－β－环糊精包合物，提高了伊曲康唑的水中溶解度和制剂的稳定性，同时增加了药物在耳膜的渗透性，有利于药物的吸收和发挥疗效[5]。组方中加入氢化可的松局部使用有抗炎、止痒、抗过敏及抑制角质异常的作用，对感染性和非感染性炎症均能抑制。同时加入薄荷脑可驱风，能使皮肤和粘膜产生清凉感，减轻不适和疼痛，加入一定量甘油，能对耳粘膜起保护作用，并使制剂保有一定张力与粘性。
由于其它药物的相互干扰，使伊曲康唑主药在含量测定时使用一般方法无法控制，本试验采用HPLC通过调整流动相的配比使伊曲康唑与其它干扰成分有效分离，与其最大吸收波长256nm测定吸收度，计算含量比较稳定、可靠、准确。本品的成功研制可填补广谱抗真菌药物伊曲康唑无滴耳剂剂型新突破，开辟抗真菌药局部应用，减少不良反应，提高疗效，提高患者治疗的依从性，方便患者应用，减少刺激，降低患者经济负担，减少患者病痛，具有较高的研究价值和较好的临床应用前景。
参考文献：
[1] LEWIS R E，WIEDERHOLD N P，KLESPER M E In vitro pharmacodynamics of amphotericin B，itraconazole，and voriconazole against aspergillus，fusarium，and scedosporium spp[J].Antimicrob Aagents and Chemother，2005，49（3）：945-951
[2] LILY A J，FRANK J P，ALEKSANDR G L，et al.Voriconazole[J].Clin Ther，2003，25（5）；1321-1381.
[3] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典（2010版二部）[Z].北京：化学工业出版社，2001
[4] Stammberger H.Endoscopic surgery for mycotic and chronic recurring sinusitis.Ann Otol Rhinol Laryngol，1985，94（Suppl 119）：1-11.
[5] CHENG M.Role of hydrixypropylβ-cyclodextrin in increasing he solubility if riconazole[J].Anhui Med PharmaJ2007.11（3）：207-208.
论文作者:宋晋1,郭作兵2
论文发表刊物:《健康世界》2016年第20期
论文发表时间:2016/11/15
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