（广州血液中心 广东 广州 510095）
【摘要】目的：探讨如何提高全自动血液分离机（G4）制备的洗涤红细胞（MAP）的质量，确保输血安全。方法：用G4制备洗涤红细胞（MAP），并从原料血的制备与选择、接驳点的位置、上机的操作方法、洗涤次数、乳糜血的制备等几个方面就如何提高洗涤红细胞（MAP）的质量进行探讨。结果：保持冷链制备优质的原料血，选用保存期﹤14d的库存血，选择合适的接驳点，正确掌握上机操作手法，选择合适的洗涤次数，提高乳糜血液的洗涤质量，洗涤红细胞（MAP）质量得到提高。结论：以上方法是提高G4制备洗涤红细胞（MAP）的关键控制环节。
【关键词】全自动血液分离机G4；洗涤红细胞（MAP）；制备
【中图分类号】R197.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）05-0128-02
Fully automatic blood separator preparation of washed red blood cells (MAP) (G4) key control links Huang Xiaoqin,Luo Jiezhen. Blood center of Guangzhou, in Guangdong Province, Guangzhou 510095, China
【Abstract】Objective To explore how to improve the automatic blood separator (G4) preparation of the quality of washed red blood cells (MAP), guarantee the safety of blood transfusion. Methods Preparation with G4 washed red blood cells (MAP), and blood from the raw material preparation and selection, the location of the interchange station, computer operation, a number of washing, the preparation of chyle blood from several aspects such as how to improve the quality of washed red blood cells (MAP) are discussed. Results Keep cold chain blood preparation of high quality raw material, choose the banked blood storage life ﹤ 14 d, choose the appropriate connection points, correctly master the computer operation skill, choosing the appropriate number of washing, improve the quality of chyle blood washing, washing quality of red blood cells (MAP) was improved. Conclusions The above method is to improve the preparation of washed red blood cells (MAP) G4 key control links.
【Key words】Fully automatic blood separator G4; Wash red blood cells; The preparation of
洗涤红细胞去除了几乎所有的血浆蛋白及大部分的白细胞，主要用于减少或避免血浆蛋白所致的过敏反应，也适应于自身免疫性溶血性贫血和阵发性睡眠性血红蛋白尿需输血的患者及对血浆蛋白、白细胞和血小板产生抗体的患者[1]。新版全血及成分血质量要求(GBl8469—2012)和《血站技术操作规程》(2012版)中均规定：如果是在闭合无菌环境中制备且最后以红细胞保存液混悬，洗涤红细胞保存期与洗涤前的红细胞悬液相同[2]，为红细胞保存液(MAP)混悬洗涤红细胞的制备提供了法律依据。笔者所在血液中心从2013年开始制备洗涤红细胞（MAP），并且使用全自动血液分离机(G4)进行洗涤制备，现将洗涤红细胞（MAP）制备的关键控制环节总结如下。
1.资料与设备
1.1 一般资料
洗涤红细胞（MAP）原料血来源：本中心采集制备，且各项检测合格的保存期内的2U红细胞悬液（本文着重讨论制备2U的洗涤红细胞（MAP））。
1.2 仪器设备
五联洗涤套袋（含三联袋250ml氯化钠注射液，一个转移袋，100ml红细胞保存液——广州费森尤斯公司），索福12BP离心机，Compomat G4全自动血液分离机（德国费森尤斯卡比公司），费森尤斯COMPODOCK无菌接管机，低温操作台，4℃血冰箱，热合机，分浆架，止血夹。
2.方法
2.1 将红细胞悬液与洗涤红细胞套袋主管道的远端无菌接驳。用止血夹将转移空袋夹住，打开接驳合口，往红细胞袋内注入100ml/U氯化钠注射液。
2.2 将原料血离心（4±2℃，2516g，8min）后，使用G4去除原料血液上清和白膜层。设定参数为（细胞）分界线下5mm，将上清和白膜层挤压至转移空袋，再向原袋中注入100ml/U氯化钠注射液。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆再次离心(4±2℃，4036g，8min)后，将上清挤压至转移空袋，设定参数为红细胞探头检测到红细胞立即停止，第2、3次去上清时向母袋中注入100ml/U 氯化钠注射液；第4次去上清后向母袋中注入50ml/U 红细胞保存液[3]。
2.3 洗涤红细胞（MAP）质量标准：血红蛋白含量（≥36g/400ml）、储存期末溶血率（＜0.8%）、上清蛋白含量（＜1.0g/400ml）[4]。
3.讨论
我中心制备洗涤红细胞（MAP）一年多以来，制备工艺已趋成熟，现将制备的关键控制环节总结如下：
3.1 保持冷链制备优质的原料血
①保持良好的冷链系统。街头采集的血液应储存在2℃～6℃冰箱中，血液从采血点到待检库的运输必须装入已降温的血液专用隔热冷藏箱中，接血司机应按规定及时将血液接回中心待检库。②尽快低温分离成分血。血液从全血到分离成红细胞和血浆的操作过程，要尽量缩短暴露于室温下的时间。本中心采用G4血液分离机分离全血，避免了人工分离造成的血液量的偏差。并且血液离心前、分离后、制备后入库前，均放置于低温操作台上。尽快并保持低温分离是保证血液质量的关键。③洗涤前，洗涤红细胞套袋应放入4℃冰箱保存。
3.2 原料血的选择
据文献报道，隔日血比当日血制备的洗涤红细胞合格率提高46％，这是由于在血液保存过程中，各成分比重不同而形成自然沉降，上层为淡黄色血浆，下层为红细胞，中间层白色物质为白细胞和血小板。全血保存1～2天后，白细胞、血小板的功能丧失，细胞裂解，聚集成团，离心后，界线更明显，洗涤过程中易将其洗去。而当日全血，其各种成分的功能尚未丧失，血小板、白细胞就不易消除，因此库存血比新鲜血洗涤效果更好[5]。随着保存时间的延长，红细胞的脆性增大，在制备过程中，由于机械碰撞破坏红细胞，易造成溶血[6]。有实验[7]结果表明，保存期＜14d的悬浮红细胞制备洗涤红细胞，上清液蛋白质含量和溶血率均符合国家标准。所以，保存期＜14d的库存血制备洗涤红细胞效果更佳。
3.3 接驳点的选择
原料血液与洗涤套袋的接驳方式有两种，①是与原料血袋中间的主管道接驳，分浆管位于中间。优点是原始配血标本与血袋没有分离，减少误差；缺点就是主管道中间有阻塞件，挤白细胞时流速受阻，白细胞易成团聚集于管口处堵塞管道[8]，由于我中心采用的是G4血液分离机操作，成团白膜的堵塞造成程序停滞，实践证明，需反复拧动阻塞件，白膜便可顺利挤出。如果去白膜操作后血液界面上还有比较多的白膜层时，需要再执行一次去白膜程序，但红细胞的损失会相应增大[9]。②是与原料血袋留样管近端接驳，分浆管在一侧。优点是不存在白细胞堵塞管道的情况，缺点是造成原始配血标本与血袋的分离，存在输血安全隐患，这就要求操作者要有高度的责任心，需要在最后的贴签和包装过程中仔细核对条码，确保成品条码与配血标本上的条码一致后方可封袋。实际操作中，也可在洗涤最后一步注入红细胞保存液后，混匀血袋，直接利用洗涤套袋的主管道留取配备标本。由于每袋原料血的情况各不相同，实际操作中需根据情况选择接驳的位置，掌握好各自需注意的要点即可。
3.4 正确掌握操作方法
上机过程中需注意，血袋从离心桶中取出动作需轻柔，避免动作粗鲁而造成血液分界不清而影响分离效果；同时检查血液外观是否符合制备要求，有无破损、渗漏、溶血等；装机时采血标签面应背向血液分离机，检查各热合卡位内的管道放置无误且无折叠后，方可按“start”键开始。每次注入氯化钠时，注意边加边旋转缓慢摇匀。笔者经验，右手拿着红细胞袋沿逆时针方向缓慢摇匀效果较佳，使血液中血浆蛋白和聚集贴壁的白膜与生理盐水充分混匀，这样，一方面易清除红细胞间的粘附因子等各类抗体；另一方面以防止“年老”的红细胞沉积血袋底部和周边。
3.5 洗涤次数的选择
胡文娟等认为，在经过两次洗涤后，绝大多数白细胞和血浆已被清除，再多洗一次也只能去除约1％左右的白细胞，对整个白细胞及血浆蛋白清除率没有影响，而多增加一次红细胞丢失机会，并且洗涤红细胞的红细胞回收率，洗涤2次高于洗涤3次，其差异极其显著，同时在急症用血时还可以为抢救病人赢得时间[10]。所以笔者认为在紧急用血时，两次洗涤方法是可行的，但非紧急时和乳糜血液建议还是用三次洗涤法。
3.6 乳糜血的洗涤
据文献[11]报道，乳糜血经生理盐水洗涤后，能达到国家标准，且与正常血制备的洗涤红细胞无显著性差异，所以，为了减少血液的浪费，我们将中、轻度乳糜血制备成洗涤红细胞（MAP）。乳糜血洗涤时需注意：①洗涤时生理盐水用量越多，则乳糜去除越彻底。每次可将五联洗涤套袋里的氯化钠250ml全部加完。②每次加生理盐水时要轻轻摇动血袋，以充分混匀，使乳糜颗粒随盐水彻底清除。③洗涤后重新留一条配血标本[12]。
4.结论
综上所述，保持冷链制备优质的原料血，选用保存期﹤14d的库存血，选择合适的接驳位置，熟练掌握正确的上机操作方法，选择合适的洗涤次数，是提高洗涤红细胞（MAP）质量的关键控制环节。同时，为减少血液的浪费，也应正确掌握乳糜血的洗涤。实际工作中，我们还应有高度的责任心和质量意识，确保提供优质安全的血液，保证临床输血用血安全。
【参考文献】
[1] 江朝富,崔徐江,汪传喜．现代成分输血与临床[M]．天津: 天津科学技术出版社，2003:88-90．
[2] 中华人民共和国卫生部．血站技术操作规程[z]．2012．
[3] [9] 曾四海,黄可君,胡文娟等. 洗涤红细胞制备保存工艺的确认[J]. 中国输血杂志, 2012, 25(10): 976-977.
[4] GB 18469-2012, 全血及成分血质量要求[S]. 北京:中国标准出版社,2012:8.
[5] [10] [12] 胡文娟,曾四海,苏红等. 提高联袋封闭式洗涤红细胞制品质量的体会[J]. 当代医学, 2012, 18(5): 146-147.
[6] 王爱梅,梁文华,王群等. 不同保存期全血制备洗涤红细胞的超微结构变化[J].临床输血与检验,2004, 6(3):173-176.
[7] 陈峰,王丽,孙韵等，不同保存期悬浮红细胞制备洗涤红细胞后质量指标的差异[J]. 浙江医学, 2013,35(2): 143-144.
[8] 张万明,符丽芝,黄旭颖. MAP袋制备洗涤红细胞的质量探讨[J]. 临床输血与检验, 2004,6(1):55.
[11] 张香兰,雷登平,吴德慧.高海拔地区中重度乳糜全血制备洗涤红细胞效果分析[J].青海医学院学报,2007,28(1):34-36.
论文作者:黄小琴,骆洁贞
论文发表刊物:《医药前沿》2015年第5期供稿
论文发表时间:2015/7/6
标签：红细胞论文; 血液论文; 乳糜论文; 白细胞论文; 保存期论文; 血浆论文; 原料论文; 《医药前沿》2015年第5期供稿论文;