摘要:目的:研究血液分析仪与显微镜法检测呼吸道感染血液中白细胞及白细胞介素21(IL-21)转录激活因子3(p-STAT3)表达水平。方法:选择30例呼吸道感染患者随机分为研究组和对照组,研究组血液分析仪检测白细胞、IL-21以及p-STAT3的表达水平。研究组患者静脉注射2.5mlOVA混合试剂,观察患者出现的症状,对照组则显微镜法检测,静脉注射2.5ml无菌氯化钠注射液,检测白细胞数量。结果:研究组患者的炎性细胞总数为8.80±0.22×105/L,嗜酸粒细胞总数所占比例为11.59%,单核细胞所占比例为6.36%,与对照组比较,有统计学意义(p<0.05)。结论:血液分析仪对白细胞检测效果更为显著,呼吸道感染患者肺组织IL-21以及p-STAT3表达水平明显增加。
关键词:呼吸道感染;白细胞计数;血液分析仪
[Abstract] Objective:To study the expression of interleukin 21(IL-21)transcription activator 3(p-STAT3)in blood of respiratory tract infection by hematology analyzer and microscope.Methods:30 mice were randomly divided into experimental group and control group.The expression levels of WBC,IL-21 and p-STAT3 were detected by blood analyzer in the experimental group.Mice of the experimental group were in 1,14 day subcutaneous injection 0.15mlOVA mixed reagent,in the 20 days the mice placed in the experimental box,ova mixed reagent is sprayed to the box with the method of atomizing,twice a day,every 20 minutes,observation symptoms in mice,the control group microscopic examination method,in 1.14 days with a subcutaneous injection of 0.15 ml of sterile sodium chloride injection,the rest of the disposal with the experimental mice.Results:total number of inflammatory cells of mice in the experimental group for 8.80 + 0.22 x 105/L and eosinophil eosinophil cell counts the proportion of 11.59% and monocyte proportion was 6.36%,compared with the control group,and have statistical significance(P < 0.05).Conclusion:The effect of blood analyzer on WBC detection is more significant.The expression level of IL-21 and p-STAT3 in lung tissue of mice with respiratory tract infection was significantly increased.
[Key words] Respiratory infection;white blood cell count;Hematology Analyzer
近年来,大量的研究发现白细胞及细胞因子的表达水平与呼吸道感染发病以及严重程度密切相关[1]。本次研究对呼吸道感染患者的IL-21以及p-STAT3表达水平进行进一步的探究,运用血液分析仪及显微镜检测,现将研究结果报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
2015年1月至2016年5月期间,我院诊治的30例呼吸道感染患者,根据随机数字法,将其分为对照组和研究组。15例对照组患者中,男孩10例、女孩5例,年龄5.0~12.0岁,平均年龄(8.0±4.0)岁,病程2.0~6.0年,平均病程(3.0±1.5)年;15例观察组患者中,男孩8例、女孩7例,年龄6.0~12.0岁,平均年龄(8.5±4.0)岁,病程2.0~5.0年,平均病程(2.5±1.5)年。两组性别、年龄、病程比较,差异没有统计学意义,P>0.05,具有可比性。。
1.2方法
研究组患者在静脉注射2.5mlOVA混合剂,对照组则静脉注射1.5ml无菌氯化钠注射液,连续治疗5天后,分别取患者血液进行病理学检查,观察组血液分析仪检测静脉血,常规采外周静脉血,经肝素抗凝处理,在室温48 h内进行处理。溶血剂、改变细胞膜食物渗透性试剂盒和全部的单克隆抗体购与法国的库尔公司,淋巴细胞的分离液产自市血研所,血液分析仪的型号:迈瑞 BC-5800.激发光:488nm的氩离子,FⅡ℃的滤光片:525nm,PE的滤光片:575m。应用全血直接免疫荧光法标记细胞表面抗原,细胞胞浆MP0标记应用直接免疫的荧光法标记。淋巴细胞群作为流式细胞仪检测的对象,每份样本获取的细胞数量为设门内细胞>5,000个。
显微镜检测标本采集方式相同,行血清分离,用吸管吸取白细胞稀释液0.38ml于小试管中。用微量吸管吸取新鲜全血或末梢血20ul,擦去管尖外部余血。将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部,轻轻放出血液,并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2-3次。将试管中血液与稀释液混匀,待细胞悬液完全变为棕褐色,再次将小试管中的细胞悬液混匀。用滴棒蘸取细胞悬液1滴,充入改良Neubauer计数板的计数池中,室温静置2-3min,待白细胞完全下沉。在低倍镜下计数四角4个大方格内的白细胞总数。应用酶联免疫吸附试验测定患者的IL-21水平,使用免疫化学染色分析p-STAT3的表达水平[2]。
1.3统计学处理
应用SPSS27.0软件对结果进行统计学分析,计量资料用( ±s)表示,对数据进行卡方检验,差异有统计学意义(p<0.05)。
2 结果
2.1炎性细胞水平
研究组患者的炎性细胞总数为8.80±0.22×105/L,嗜酸粒细胞总数所占比例为11.59%,单核细胞所占比例为6.36%,与对照组比较,有统计学意义(p<0.05)。见表1。
表1 两组患者的血液中炎性细胞的数量及百分比
注:*与对照组相比,p<0.05。
3 讨论
呼吸道感染是由多种细胞以及细胞因子介导并参与的感染性疾病,呼吸道感染的发病有明显的家族聚集倾向[3]。近年来大量的文献报道,呼吸道感染的相关基因可能在第5、6、11、12、13、14、21号染色体上,具体的机制以及表达关系尚未研究清楚,推测的原因可能是多基因共同表达的结果。同时呼吸道感染的发病也受环境因素的影响,主要是由变应原介导的免疫反应,主要的变应原有尘螨、真菌、花粉以及禾本植物等,其中尘螨是最常见的变应原,常见的有四种,即屋尘螨,粉尘螨,宇尘螨和多毛螨。感染等外界因素也可引起呼吸道感染的发生。
白细胞俗称白血球,是人体血液中非常重要的一类血细胞。白细胞在人体中担负许多重任,吞下异物,产生抗体,身体损伤损伤愈合能力,抵抗病原体的入侵的能力,对疾病的免疫力抵抗等等。人体不及时,经常通过白细胞数量的显著变化和显示。因此到医院看到许多情况下需要验血,现在医院血液测试仪器,经常超过20个指标在许多医生通常是第一个问题是白细胞(WBC)是否改变。白细胞是一种非常特殊且重要的细胞,因此了解其相关的知识非常重要。白细胞病理性增高非常重要,应该根据患者的具体病情进行分析判断。急性细菌性感染白细胞会迅速升高,而且和感染程度呈正比。例如患者常因感冒、发热、咳嗽、疼痛等症状到医院看病,医生多通过白细胞数量的变化初步判断是否因细菌性感染而造成以上的临床症状。白细胞的增加往往意味着症状由于细菌感染引起的人体器官和组织的急性或慢性感染,炎症、组织损伤,因为白细胞细胞吞噬功能可以作为机体防御系统的一个重要的防线,感染时,白细胞计数最沉溺于嗜中性粒细胞和嗜酸性粒细胞嗜伊红的迅速崛起和吞噬作用的细菌入侵身体,寄生虫和其他病原体。细菌感染的程度往往是成正比的增加白细胞的数量。而白细胞往往被视为由于感染病毒的入侵,白细胞增加在一个小,缓慢的状态。除了各种组织损伤、创伤、手术、急性失血、中毒、恶性肿瘤、急性中毒的白细胞会显著增加,但会根据患者和其他的检查和分析来确定。
正常人白细胞总数在(4.0~10.0)×10^9/L。其实在这个数值上下0.5×10^9/L,也可考虑大致正常,因为这和人们的个体差异有一定关系。成年男女一般都在这个范围内,且性别之间没有太大不同,但是儿童和婴幼儿则完全不同。新生儿出生时白细胞数量可达到(15~20)×10^9/L,在随后的一周中可降至15×10^9/L左右,在2岁以内可达到(10~12)×10^9/L,在5岁以下儿童也往往高于成人水平,平均值在8×10^9/L左右,以后随着年龄的长大,逐渐接近成人水平。近年来发现,白细胞介素21以及转录激活因子3的表达水平直接影响T细胞介导免疫的过程,IL -21是γc家族中主要的细胞因子之一,联合共用γ链行驶重要的作用,可以通过JAK -STAT途径传递信号。IL -21与IL -21受体结合,偶联γc链,激活JAK3,活化的JAK激酶,p-STAT3是JAK -STAT途径中信号传导以及激活细胞因子的主要成分,入胞经过磷酸化后调控靶基因的转录、翻译。本次研究针对呼吸道感染中IL-21以及p-STAT3表达水平进行检测,研究组血液分析仪检测患者的炎性细胞总数为8.80±0.22×105/L,嗜酸粒细胞总数所占比例为11.59%,单核细胞所占比例为6.36%,与对照组比较,有统计学意义。研究组患者的IL-21表达水平为65.45±5.56 ng/L,IL-2表达水平为55.48±12.11 ng/L,p-STAT3表达水平为76.86±9.46 ng/L,与对照组比较,差异有统计学意义。两种细胞因子的表达水平明显高于对照组,表明IL-21以及p-STAT3可以促进气道的炎症反应发生。
综上所述,呼吸道感染患者的气道IL-21以及p-STAT3表达水平增高,容易介导细胞免疫的发生,导致病变部位的炎性细胞成分明显增多,使呼吸道感染患者的控制水平降低,从而引发呼吸道感染的发生。
参考文献:
[1]张曼,周新,唐亮,等.不同剂量虫草活力素对大鼠支气管呼吸道感染模型慢性气道炎症的作用机制研究[J].中华呼吸道感染杂志(电子版),2010,4(3):151-155.
[2]雄英吴,志伟曹.AMCase,eotaxin-3及IL-13在支气管呼吸道感染发病机制中的作用[J].临床与病理杂志,2014,33(6):533-538.
[3]杨娟,周向东.白介素13诱导支气管呼吸道感染气道黏液高泌的分子机制[J].中华呼吸道感染杂志(电子版),2009,3(5):363-366.
论文作者:范俊峰
论文发表刊物:《健康世界》2017年第2期
论文发表时间:2017/3/16
标签:白细胞论文; 细胞论文; 患者论文; 呼吸道感染论文; 水平论文; 血液论文; 统计学论文; 《健康世界》2017年第2期论文;