（大理州人民医院检验科 云南 大理 671000）
【摘要】 目的：探讨我院住院的艾滋病患者机会性感染与真菌、病毒及原虫的感染情况，为临床治疗提供参考依据。方法：收集2015年5月—2017年5月期间我院住院的50例艾滋病机会性感染患者相关标本。采用Vitek2细菌鉴定药敏分析仪对真菌进行鉴定或药敏试验，ELISA法测定病毒及原虫的血清抗体IgG及IgM。结果：50例艾滋病机会性感染患者，真菌感染共25株，以新生隐球菌居多，共15株（占65%）。新生隐球菌、白假丝酵母菌对常用抗真菌药物敏感率为100%。HIV患者感染单纯疱疹病毒2型IgG阳性率为40%、感染巨细胞病毒IgG阳性率为100%、感染弓形虫IgG阳性率为20%。结论：（1）艾滋病机会性感染患者真菌感染率较高，其中主要病原为新生隐球菌、马尔尼菲青霉菌、白假丝酵母。（2）HIV患者感染单纯疱疹病毒2型、巨细胞病毒及弓形虫的几率比普通人群高。（3）真菌对抗真菌药物敏感，提示艾滋病机会性感染患者可以进行常规抗真菌药物治疗。
【关键词】 艾滋病；机会性感染；真菌；药敏试验
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2019）23-0032-02
The research and analysis of pathogenic bacteria monitoring in AIDS patients with opportunistic infection
Ma Zhiqiang, Ma Shungao(Communications author), Sang Weihong
Department of Laboratory, People’s Hospital in Dali Bai autonomous Prefecture, Dali,Yunnan 671000, China
【Abstract】Objective Explore the infection of fungi, viruses and protozoa in AIDS patients with opportunistic infection, so as to provide evidence for clinical diagnosis and treatments. Methods 50 cases AIDS patients with opportunistic infection samples had been collected at hospital of dali between May 2015 and May 2017 .VITEK2 automated microbial identified and susceptibility system was used to identify bacteria and analyse drug susceptibility. The levels of IgG and IgM of viruses and protozoa were determined by ELISA. Results A total of 50 cases in AIDS patients with opportunistic infection were collected ,the main isolated pathogenic were fungi, Cryptococcus neoformans(15%) .Most isolated cryptococcus neoformans and Candida albicans were susceptible to commonly used antifungal drugs(100%) . Conclusions (1)Most pathogens of AIDS patients with opportunistic infection were fungi, especially Cryptococcus neoformans, Penicillium marneffei,candida albicans.(2)The infection rate of Herpes simples virusⅡ,Cytomegalovirus(CMV) ,Toxoplasma encephalitis in AIDS patients with opportunistic infection were higer than that of in common people. (3) In AIDS patients with opportunistic infection , the fungi was sensitive to antifungal agents, so we can treated them by antifungal drugs.
【Key words】Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS); Opportunistic Infection; Fungi; Neo-Sensitabs tablet assay
1.资料与方法
1.1 一般资料
2015年5月—2017年5月期间，我院住院的艾滋病机会性感染患者共50例，男性患者39例，女性患者11例，男女比例为3.5:1。HIV／AIDS病人的诊断标准参照美国疾病控制与预防中心（CDC）修订的、于1993年１月１日起实行的HIV／AIDS病人分类标准，所有病例均经蛋白印迹试验确证。分离真菌共25株。标本类型包括个血液，脑脊液，骨髓，痰液，尿液，腹水，胸水。
1.2 方法
1.2.1主要仪器设备 Vitek2－Compact细菌鉴定及药敏分析仪，BACT／ALERT3D血培养仪法国梅里埃公司生产生产，ST-36W洗板机、reader HT-2酶标仪。
1.2.2主要试剂 细菌鉴定卡、药敏卡法国梅里埃公司生产生产，血平板、巧克力平板为郑州安图公司产品。质控菌株购自卫生部临床检验中心提供。单纯疱疹病毒2型IgG、IgM诊断试剂盒、巨细胞病毒IgG、IgM诊断试剂盒、弓形虫抗体IgG、IgM诊断试剂盒。
1.2.3真菌的培养、鉴定和药敏试验
1.2.3.1标本采集：按医院标本采集手册要求采集，并于2小时内接种相关培养基。
1.2.3.2标本的接种：血液和骨髓按无菌方法采集后分别注入厌氧培养中和各抗生素培养瓶各5毫升，置全自动血培养仪培养，报阳后转种血平板和巧克力平板，同时作细菌涂片检查。痰和咽拭子标本采用五区划线接种血平板、巧克力平板、麦康凯平板，同时作细菌涂片检查；尿标本采用定量接种环（10ul）分别接种血平板和中国兰平板。粪便标本采用五区划线接种SS平板和中国兰平板。脑脊液标本分别接种血平板、巧克力平板，同时作涂片检查和墨汁负染色隐球菌检查。
1.2.3.3初步鉴定和药敏试验：按照《全国临床检验操作规程》第三版[1]的要求进行真菌的分离培养和鉴定。严格按照仪器操作规程操作，真菌药敏试验结果按照CLSIM100-S24的标准[2]判读。
1.3 统计学分析
采用WHONET5.6统计软件。
2.结果
2.1 致病真菌分布：真菌菌株共25株见表1。
表1 艾滋病患者细菌分布构成比
3.讨论
艾滋病机会性感染患者的真菌感染率高，其中主要病原为新生隐球菌、马尔尼菲青霉菌、白假丝酵母菌。药敏显示新生隐球菌、白假丝酵母菌对常用抗真菌药物敏感性为100%，提示可以根据常规抗真菌药物进行抗真菌治疗。表3显示，单纯疱疹病毒2型、巨细胞病毒及弓形虫的血清抗体IgM（包括HIV阳性组和HIV阴性组）检测阳性率均为0例，但 HIV阳性组单纯疱疹病毒2型IgG（P＜0.01）、巨细胞病毒IgG（P=0.02）、弓形虫IgG（P=0.012）阳性率均明显高于同期HIV阴性组。说明AIDS患者继往感染率明显高于普通人群。
云南是我国艾滋病流行最早和疫情最重的地区，累计报告病例数约占全国的1/5，在我省艾滋病死亡病例中约1/3患者直接死于深部真菌感染，在艾滋病相关机会性感染中，以深部真菌感染发生率最高，不同地区菌谱亦存在差异[3]。艾滋病患者由于处于不同的免疫缺陷，包括黏膜免疫力缺陷、细胞免疫、体液免疫、补体系统缺陷等，容易并发各种病原体（细菌、真菌、病毒、原虫等）感染。且多数患者在社区或基层医疗机构使用过广谱抗生素，极少用抗真菌类药物，增加了真菌感染的机会。本文中，艾滋病机会性感染患者病原菌分布主要也是以真菌为主。包括：白假丝酵母、新生隐球菌、马尔尼菲青霉菌等。资料[4]显示，深部真菌中以白假丝酵母最为常见，而本次主要是以新生隐球菌居多，提示不同区域由于生长环境的不同，存在一定的差异性。
常用的抗真菌药物有多稀类抗真菌药物：两性霉素B等；咪唑类抗真菌药：氟胞嘧啶等；三唑类抗真菌药物：氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑等；棘白菌素类抗真菌药物：卡泊芬净、阿尼芬净、米卡芬净等。其耐药机制如下：（1）唑类耐药机制主要是通过以下三种方式，药物的靶酶发生改变；耐药菌细胞膜上外排泵基因过度表达导致胞内药物浓度降低[5]；生物被膜的形成[6]。（2）氟胞嘧啶的耐药机制主要通过真菌细胞的酶系统进入细胞内，转换为氟脲嘧啶，替代尿嘧啶进入真菌的脱氧核糖核酸中，阻断核酸的合成。（3）多稀类主要与真菌细胞壁有关。在细胞壁合成的过程中，聚合体反复合成、修饰和重排，真菌细胞壁要经历频繁的改变。真菌细胞壁在受到药物的刺激后会发生适应性的改变而产生耐药[7]。（4）棘白菌素类主要通过抑制真菌细胞壁的1.3-β-D葡聚糖的合成，破坏真菌细胞壁结构的完整性，从而打破细胞渗透压的平衡使真菌细胞溶解死亡。而在本文中，几种常用的抗真菌药物的药敏试验均为敏感率100%，提示艾滋病机会性感染患者可以进行常规抗真菌药物治疗。
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论文作者:马稚强,马顺高（通讯作者）,桑卫洪
论文发表刊物:《医药前沿》2019年23期
论文发表时间:2019/9/24
标签：真菌论文; 艾滋病论文; 平板论文; 患者论文; 球菌论文; 药物论文; 病毒论文; 《医药前沿》2019年23期论文;