李印, 周清华, 孙芝琳, 孙泽芳, 王艳萍[1]2006年在《nm23-H_1基因转染逆转人高转移大细胞肺癌恶性表型分子机制的实验研究》文中指出背景与目的nm23-H1是公认的肿瘤转移抑制基因。我们的前期研究结果发现nm23-H1基因可明显抑制人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2的活性。本研究旨在探讨肿瘤转移抑制基因nm23-H1及外源性ERK1/2通路抑制剂U0126对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中ERK1/2及其细胞恶性生物学行为的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法将稳定转染nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1、原代细胞株L9981(nm23-H1基因杂合性缺失)和转染空载体细胞株L9981-PLXSN培养传代,应用蛋白印迹法(Western blot)和免疫沉淀法,检测应用U0126(40μmol/L,处理细胞20min)处理后叁个肺癌细胞株中总ERK1/2和双磷酸化ERK1/2表达水平的变化;应用MTT法及改良Boyden小室法分别检测叁个肺癌细胞株应用U0126处理后细胞体外增殖活性及侵袭能力的变化。结果L9981-nm23-H1细胞株磷酸化ERK1/2表达水平、ERK1/2相对活性经U0126处理后均显着低于L9981和L9981-PLXSN细胞株(P<0.01),而L9981和L9981-PLXSN细胞株间磷酸化ERK1/2表达水平、ERK1/2相对活性比较均无显着性差异(P>0.05);叁个肺癌细胞株总ERK1/2水平处理后比较均无明显变化,差异均无显着性(P>0.05);L9981-nm23-H1细胞株体外增殖能力及侵袭力均显着低于L9981细胞株和L9981-PLXSN细胞株(P<0.01);U0126能显着下调L9981细胞株体外增殖活性及侵袭能力(P<0.01)。结论阻断L9981细胞株中ERK1/2的激活后可发生与转染nm23-H1基因相似的细胞生物学行为的变化,即细胞的体外增殖能力及侵袭力均显着降低,提示nm23-H1基因转染逆转人高转移大细胞肺癌恶性表型的分子机制可能与其下调ERK1/2信号转导通路中关键激酶ERK1/2的活性有关。
郑海霞[2]2004年在《nm23-H1基因逆转人高转移大细胞肺癌恶性表型的实验研究》文中指出肺癌的侵袭和转移是肺癌的恶性表型,也是肺癌致死的主要原因。因此,研究和阐明肺癌侵袭与转移的分子机制必将为肺癌的靶向性基因治疗提供新的靶点和途径。肿瘤侵袭转移是一个多步骤、多基因的复杂过程,涉及到肿瘤转移基因激活与肿瘤转移抑制基因失活。nm23-H1基因是肿瘤转移抑制基因,与许多恶性肿瘤的侵袭转移密切相关。研究表明nm23-H1基因的低表达和杂和性缺失与肺癌的高转移性和预后不良有密切关系,而且nm23-H1基因异常的肺癌常伴有肺癌转移相关基因的表达异常,因此,周清华等在国内外首次提出“肺癌转移抑制级联”的新概念,推测nm23-H1基因可能是“肺癌转移抑制级联”相关基因的上游调节基因,通过调控下游基因来逆转肺癌的恶性表型。为了探讨nm23-H1基因在“肺癌转移抑制级联”中的作用和地位以及调控“肺癌转移抑制级联”相关基因的分子机制,本研究应用RT-PCR和Western blotting方法,鉴定了人高、低转移大细胞肺癌细胞株L9981和NL9980中nm23-H1
参考文献：
[1]. nm23-H_1基因转染逆转人高转移大细胞肺癌恶性表型分子机制的实验研究[J]. 李印, 周清华, 孙芝琳, 孙泽芳, 王艳萍. 中国肺癌杂志. 2006
[2]. nm23-H1基因逆转人高转移大细胞肺癌恶性表型的实验研究[D]. 郑海霞. 四川大学. 2004