【关键词】 粪便 免疫 检验
【中图分类号】R446.13 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）33-0201-02
当上消化道有少量出血时，因消化液的作用导致红细胞溶解破坏，肉眼或显微镜检查不能发现，采用化学法或免疫法等方法方能证实出血的试验，称为隐血试验(occult blood test，OBT)。
1 粪便隐血试验
1.1化学法
化学法隐血试验是目前主要采用的方法。供选用的方法有邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法、愈创木酯法等。据众多文献报道，邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法最灵敏，可检出0.2～1mg／L的血红蛋白，只要消化道有1～5ml出血就可检出。还原酚酞法由于试剂极不稳定，放置可自发氧化变红而被摒弃。邻联甲苯胺法常容易出现假阳性。中度灵敏的试验包括联苯胺法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法，可检出1～5mg／L的血红蛋白，消化道有5～10ml出血即为阳性。联苯胺法由于有致癌性而被淘汰，无色孔雀绿法在未加入异喹啉时灵敏度差(20mg／L血红蛋白)，试剂的配制和来源均不如匹拉米洞法方便。愈创木酯法灵敏度差，需6～10mg／L血红蛋白才能检出，此时消化道出血可达20ml，假阳性少，如此法为阳性基本可确定消化道出血。
1.2干化学试纸法
①外源性动物性食品中含有血红蛋白、肌红蛋白，可使隐血试验呈假阳性反应。②某些生食蔬菜类(如萝卜、甘蓝等)，因含有高浓度过氧化物酶，可引起假阳性反应。③某些药物(如铁剂、铋剂)亦能产生假阳性反应。④血液在肠道停留过久，血红蛋白被细菌降解，血红素消失会出现假阴性。⑤大剂量服用Vit C及其它还原性物质，可抑制其化学显色反应。⑥H2O2及其它试剂也可因放置过久而分解，在试验时亦须加以注意。
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1.3免疫学方法 为了提高粪便隐血试验的特异性、准确性，防止上述诸多因素对试验的影响，目前临床逐渐开展了免疫学方法。如胶体金法、酶联免疫吸附法、免疫斑点法及胶乳凝聚法、所使用的抗体有抗人血红蛋白抗体和抗人红细胞基质抗体。免疫学方法具有较高的灵敏度，一般血红蛋白为0.2mg／L或0.03mg／g粪便就可获得阳性结果。各种动物血红蛋白在500mg／L，辣根过氧化物酶在2 000mg／L时，对本试验无干扰，故不用限制正常饮食。由于免疫学方法具有快速、方便、特异等优点，多用于大肠癌的普查。
尽管免疫学方法有其优点，但在临床使用中有时也可出现假阳性或假阴性。①红细胞在肠道停留时间过久，如上消化道出血时，血红蛋白被消化酶及细菌充分分解后不再具有原来的免疫原性，可出现假阴性，故免疫学方法多用于下消化道出血的检查。②出血过多，血红蛋白(抗原)浓度过高造成的所谓前带现象，亦可出现假阴性结果。③病人血红蛋白的抗原与单克隆抗体不匹配等。若遇肉眼观察粪便外观呈柏油样便，而免疫法隐血试验阴性或弱阳性，可将粪便稀释50～100倍后重复试验，或用化学法进行对比分析。
1.4卟啉荧光法血红蛋白定量试验 该试验用热草酸溶液使血红素转变为原卟啉进行荧光检测。除可测定粪便中血红蛋白外，还可测定血红蛋白衍生物卟啉，从而克服了血红蛋白受消化液消化和细菌分解的影响，对上、下消化道出血同样敏感。但外源性动物血红蛋白、肌红蛋白和卟啉类物质具有干扰性。另外，该法操作复杂，不便推广使用。
1.5临床意义
对消化道出血的诊断及鉴别诊断有重要价值 消化性溃疡、药物致胃粘膜损伤(如服用阿司匹林、吲哚美辛、糖皮质激素等)、肠结核、克罗恩(crohn)病、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病及胃癌等消化道肿瘤时，隐血试验常呈阳性反应。在胃肠道溃疡时，阳性率可达40％～70％，呈间断性阳性。消化道溃疡经治疗，粪便颜色正常后，隐血试验阳性可持续5～7天，此后如出血完全停止，隐血试验即可转阴。消化道癌症时，阳性率可达95％，呈持续阳性[2]。
2 粪胆色素定性检查
2.1粪胆红素定性检查 粪胆红素被三氯化铁(Fouchet试剂)试剂氧化成胆青素和胆绿素。正常人阴性。婴儿因肠道正常菌群尚未建立，粪便可呈金黄色，胆红素定性试验常为阳性。成年人可因肠道炎症、腹泻等肠蠕动过快，胆红素来不及转变为粪胆原而排出时，胆红素定性试验亦可呈阳性反应[3]。
2.2粪胆原定性试验 粪胆素在碱性环境中，被硫酸亚铁还原为粪胆原，与对二甲氨基苯甲醛反应，生成红色化合物。正常人定性为阳性(＋～＋＋)。①粪胆原定性强阳性见于各种溶血性疾病，如自身免疫性溶血性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿症、地中海贫血、蚕豆病、遗传性球形红细胞增多症及疟疾等。②粪胆原定性阴性多见于胆道阻塞性疾病，如胆结石、胰头癌等。肝细胞性黄疸时，粪胆原可增加也可减少，视肝内梗阻情况而定。
参考文献
[1] 南宁市某高校学生和医院就诊者人芽囊原虫感染情况调查-应用预防医学-2012年 第6期 (3).
[2] 兔斯氏艾美耳球虫病的病理学诊断-安徽农业科学-2012年 第33期 (2).
论文作者:邵海华
论文发表刊物:《医药前沿》2013年11月第33期供稿
论文发表时间:2014-1-13
标签：血红蛋白论文; 阳性论文; 隐血论文; 消化道论文; 粪便论文; 免疫学论文; 阴性论文; 《医药前沿》2013年11月第33期供稿论文;