金礼 黄玮 魏莉本 赵彩云
（徐州市食品药品监督检验中心 江苏 徐州 221000）
【摘要】 目的：测定白残花中紫云英苷的含量。方法：HPLC法，C18色谱柱(Agilent,XDB,4.6mm×250mm，5μm），乙腈-0.5%磷酸溶液（18：82），流速1.0mL?min-1，柱温32℃，检测波长350nm。结果：紫云英苷在0.0259～0.1554 mg?ml-1范围内进样量与峰面积呈良好线性关系（r=0.9999）；平均回收率为100.19%，RSD=0.79%（n=9）。结论：方法操作简便快捷，准确可靠，重复性好。
【关键词】 紫云英苷;白残花；反相高效液相色谱法
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）09-0367-02
Determination of astragalin in Baicanhua by RP-HPLC
Jiangsu Province Xuzhou Insititute for Drug Control ,Jiangsu, Xuzhou 221000,China
【Abstract】Objective To establish a determining method for astragalin in Baicanhua by HPLC. Method C18 (Agilent,XDB,4.6mm×250mm，5μm）was used as stationary phase, acetonitril-0.5 % phosphate solution (18:82)was as mobile phase,the wavelength of detection was at 350nm.Result The calibration curve was showed good linearity(r=0.9999) within the range of0.0259～0.1554 mg?ml-1 ,the average recovery was 100.19% with RSD=0.79%.Conclusion This method is simple,accurate,repeatable.
【Key words】Astragalin; Baicanhua;RP-HPLC
白残花是江苏省食药监局要求提高质量标准的中药饮片之一，具有清暑化浊，行脾和胃的功效。用于治疗暑热胸闷，饮食不思，口糜，郁节吐血等症。多花蔷薇花含黄芪苷（Astragalin）及挥发油0.02％～0.03％；小果蔷薇花含有挥发油及黄酮苷类成分[1]。抑菌试验对伤寒杆菌、舒氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌、八联球菌等均有抑制作用[2]。
江苏省中药材标准（1989年版）中该品种的质量标准过于简单，缺乏全面性。为了更加全面的考察白残花的质量，建立了高效液相色谱法考察白残花中紫云英苷的含量。
1.仪器与试药
1.1 仪器
美国Waters2695高效液相色谱仪，Waters2996PDA检测器，Empower系统工作站，AE-240S电子天平。
1.2 试药
紫云英苷对照品（上海融禾医药科技发展有限公司，批号：MUST-14062011）；白残花（徐州各地区自采）；乙腈为色谱纯；水为重蒸馏水；其它试剂均为分析纯。
2.方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：C18色谱柱(Agilent,XDB,4.6mm×250mm，5μm），流动相：乙腈 -0.5%磷酸（18：82）[4]，流速：1.0mL?min-1,柱温：32℃，检测波长：350nm，进样量10μL。理论板数按紫云英苷峰计应不低于5000。
2.2 溶液的制备，
2.2.1对照品溶液 精密称取经紫云英苷对照品25.90 mg，置100ml量瓶中，加80%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品母液（0.2590mg?ml-1）。精密量取对照品母液3ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（0.0777mg?ml-1）。
2.2.2供试品溶液 精密称取本品0.1g置25ml量瓶中，加80%甲醇20ml，超声处理30分钟，放冷，加80%甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.3阴性样品溶液 用溶解对照品的溶剂作为阴性对照溶液。
2.3 线性关系考察
精密吸取对照品母液1、2、3、4、5、6ml置10ml容量瓶中并加80%甲醇达刻度。分别精密吸取10μl，注入高效液相色谱仪测定，记录峰面积。对峰面积(Y)与浓度(X)进行线性回归，得回归方程Y=6.27×103+1.98×107X，相关系数r＝0.9999。表明紫云英苷在0.0.0259～0.1554mg?ml-1范围之内线性关系良好。
2.4 精密度考察
按以上色谱条件，取同一浓度对照品液（0.0777mg?ml-1）连续的进样6次，每次10μL测定紫云英苷峰面积，RSD为0.59%（n=6），说明仪器的精密度较好。
2.5 重现性试验
取同一批次（110225）样品6份，按照供试液制备的方法制备供试品溶液，采集10μL测定, 紫云英苷的含量为15.34mg?g-1,其RSD为0.59%（n=6），表明方法的重现性良好。
2.6 稳定性实验
取同一批次供试溶液，在0，2，5，8，12，24h分别进样10μL，测定紫云英苷峰面积，计算RSD为1.46%（n=6），说明供试液在24h内稳定。
2.7 干扰试验
取对照溶液、供试溶液、阴性溶液各10μL分别测定，记录色谱图，结果显示，阴性样品对测定结果没有干扰。见图1
3.讨论
3.1 流动相的选取
比较水与甲醇，水与乙腈的多种比例，最终以乙腈-0.5%磷酸溶液（18：82）作为流动相，主峰保留时间适中，峰形较好且主峰与其他峰实现了基线分离的要求，且方法学考察各项实验指标达到分析的要求。
3.2 检测波长的选择
称取紫云英苷对照品使用色谱纯甲醇溶解稀释成浓度为0.1mg?ml-1的溶液，使用紫外分光光度计进行全波长的扫描，通过观察样品在波长190nm～400nm内的紫外图谱，溶液在351nm处有最大吸收值，故选择350nm作为高效液相的检测波长。
3.3 供试品溶液制备方法的选择
供试品溶液的制备上，对不同溶剂、不同提取方法和提取时间进行比较试验，最终确定为80%甲醇超声处理30min提取完全，且其他成分对测定紫云英苷无干扰。
【参考文献】
[1]江苏新医药学院编.中药大辞典（下册）.上海人民出版社，1977:2538.
[2]浙江省药用植物志编写组编.浙江药用植物志（上册）.浙江科学技术出版社，1980:517.
论文作者:金礼,黄玮,魏莉本,赵彩云
论文发表刊物:《医药前沿》2016年3月第9期
论文发表时间:2016/5/17
标签：紫云英论文; 溶液论文; 甲醇论文; 色谱论文; 波长论文; 精密论文; 高效论文; 《医药前沿》2016年3月第9期论文;