攸县人民医院 湖南攸县 412300
【摘 要】目的：探究临床上分别利用ELISA与PAGE检测小儿腹泻粪便标本中轮状病毒的结果，为临床选择检测轮状病毒方法提供参考依据。方法：对我院2016年1月-2016年8月所收集的218例小儿腹泻患者的粪便标本分别采用ELISA法与PAGE法进行A组轮状病毒的检测，对检测结果进行分析比较。结果：ELISA和PAGE检测共在218例小儿腹泻粪便标本中检出轮状病毒134例，总检出率为61.47%（134/218），其中ELISA法检测出102例，检出率为46.79%（102/218）；PAGE法检测出126例，检出率为57.80%（126/218）；两种不同检测方法的检出率利用x2检验，结果显示PAGE法明显优于ELISA法，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：ELISA与PAGE作为检测小儿腹泻粪便标本中轮状病毒的常用方法各有优缺点，但在必要时进行联合检测，可以有效提高轮状病毒的检出率，为临床医师的诊断提供及时有效的诊断依据，值得临床应用推广。
【关键词】小儿腹泻；轮状病毒；ELISA；PAGE
[Abstract] objective：to explore clinical respectively using ELISA and PAGE detection of rotavirus in infantile diarrhea stool specimens，as a result，choose for clinical detection of rotavirus methods provide a reference basis. Methods：from January 2016 to August 2016 collected stool specimens of 218 patients with infantile diarrhea by ELISA method and PAGE method respectively for the detection of group A rotavirus，the test results are compared. Results：ELISA and PAGE detection were detected in 218 cases of infantile diarrhea stool specimens 134 cases of rotavirus，the overall detection rate was 61.47%（134/218），，102 patients with ELISA method to detect the detection rate was 46.79%（102/218）；PAGE method to detect 126 cases，the detection rate was 57.80%（126/218）；Two different detection methods of detection using x2 test，according to the results PAGE is obviously better than the method of ELISA method，the difference is statistically significant（P < 0.05）. Conclusion：ELISA and PAGE as the detection of rotavirus in infantile diarrhea stool specimens，commonly used methods have advantages and disadvantages of each，but when necessary for joint detection，can effectively improve the detection rate of rotavirus，for clinicians diagnosis provide timely and effective diagnosis，worth clinical promotion.
[Key words] infantile diarrhea；Rotavirus. ELISA；PAGE
小儿腹泻是儿科临床中的常见多发病，而致病因素中最为多见的便是轮状病毒（RV）感染，由于小儿各个系统尚处于发育阶段，腹泻会引发小儿体内水电解质以及酸碱平衡紊乱，严重影响小儿的身心健康，甚至危及生命，世界卫生组织也因此将RV感染写到全球腹泻控制与免疫计划中[1-2]。为了及时有效的了解轮状病毒的感染情况，为临床诊断提供相应的论证资料，笔者特就ELISA法与PAGE法对218例小儿腹泻患者进行检测分析，现将结果具体报告如下。
1 材料与方法
1.1标本选择
选择我院2016年1月-2016年8月收集的218例小儿腹泻患儿的粪便标本。其中男童117例，女童101例；最小年龄3个月，最大年龄5岁，平均（2.3±0.3）岁；城镇居民167例，农村51例；平均腹泻持续时间（2.9±0.5）d。上述患儿均因大便性状异常（稀便、蛋花样便、黏液样便以及水样便）和大便次数增加（1d内超过3次以上）前来就诊。
1.2 试剂与设备
ELISA轮状病毒检测试剂盒由英国 OXOID公司生产的ProSpecT Rotavirus Microplate Assay96孔板；核酸提取采用德国QIAGEN公司生产的QIAamp Viral RNA Mini Kit（50）；PAGE检测设备采用美国BIO-RAD公司生产的垂直电泳系统。
1.3 检测方法[3]
将患儿采集新鲜粪便样本取适量并同PBS缓冲液共同置入EP管中，通过8000r/min离心6min后采集上清液体适量，-70℃保存待测。由专业技术人员严格按照QIAamp Viral RNA Mini Kit（50）试剂盒的使用说明完成核酸提取以供PAGE检测使用。其中ELISA检测按照说明书进行，而PAGE检测按照《感染性腹泻诊断标准》的使用方法完成。
1.4 统计学方法
数据均采用SPSS19.0统计软件进行分析，计数资料进行x2检验，以P<0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 标本中轮状病毒的检测结果比较
ELISA和PAGE检测共在218例小儿腹泻粪便标本中检出轮状病毒134例，总检出率为61.47%（134/218）。其中ELISA法共检测出102例，检出率为46.79%（102/218）；PAGE法共检测出126例，检出率为57.80%（126/218）。由此可见检出率的选择上ELISA+PAGE>PAGE>ELISA。
2.2 ELISA与PAGE检测率的统计学比较
将两种不同检测方法的检出率利用x2检验，结果显示PAGE法明显优于ELISA法，差异具有统计学意义（P<0.05）。数据见表1。
3 讨论
RV最早是由澳大利亚学者Bishop于1973年利用电子显微镜发现，可分为A-G共7组类别，而导致人类腹泻的主要是A、B和C三组，其中A组RV是目前临床上公认的导致婴幼儿腹泻的最主要病原体[4]。这在本研究中也得到证实，218例小儿腹泻粪便标本中共检出轮状病毒134例，总检出率为61.47%（134/218）。患儿粪便性状多呈水样便或蛋花样便，这是由于RV经粪-口传播并入侵患儿体内后，便在小肠上皮细胞中进行复制，使上皮细胞发生变性坏死并导致脱落，从而降低了小肠粘膜对水电解质的吸收能力，导致肠液增加继而出现水样便表现，因此患儿可能还会表现出消化不良[5]。
ELSIA法检测的设备以及方法简易，结果也清晰易辨认，适合大批量操作；但该方法极易受样本或试剂的质量、实验条件以及抗原之间相互交叉反应等因素干扰，假阳性率较高[6]。随着医疗设备水平的不断发展，PAGE成为目前临床广泛使用的检测方法[7]，这是因为PAGE法主要通过对病毒RNA电泳速度的不同进行判断，不仅结果灵敏，而且对所有7组RV均可进行检测和鉴别。此外PAGE不会受核酸变异、扩增产物污染以及抗原交叉反应等因素干扰，因此该法的特异性高。但是PAGE的不足主要是所有检测操作必须手工操作并且无扩增过程，这就使得PAGE检测法的效率不高，同时由于PAGE缺少扩增步骤，因此其敏感度方面也略显短板。但相对而言，PAGE检测法优于ELISA，这在本研究的结果中也获得证实：ELISA法共检测出102例，检出率为46.79%（102/218）；PAGE法共检测出126例，检出率为57.80%（126/218），两者之间的差异显著，具有统计学意义（P<0.05）。
综上所述，ELISA与PAGE法作为检测小儿腹泻粪便标本中轮状病毒的常用方法各有优缺点，但在必要时进行联合检测，可以有效提高轮状病毒的检出率，为临床医师的诊断提供及时有效的依据，值得于临床应用推广。
参考文献：
[1] 袁野. 婴幼儿腹泻轮状病毒检测及结果分析[J]. 中外医疗，2015，20（10）：12-13.
[2] 黄卫彤，王宗杰，黄高飞，等. 6812例腹泻病婴幼儿感染轮状病毒和腺病毒检测结果分析[J]. 国际检验医学杂志，2014，35（12）：1629-1630.
[3] 杨志娟，李芬，徐红梅. 探讨福田区婴幼儿粪便中轮状病毒检测对临床诊断的价值[J]. 中国实用医药，2016，11（20）：118-119.
[4] 张志雄. 广州地区1281例婴幼儿腹泻A组轮状病毒的检测与流行病学特征[J]. 中国实验诊断学，2014，18（06）：936-938.
[5] 黄海樱，陈波，周强. 轮状病毒在婴幼儿腹泻中检测的临床意义[J]. 中国妇幼保健，2014，29（35）：5830-5833.
[6] 陈丽，林淼鑫. 957例婴幼儿腹泻轮状病毒检测及结果分析[J]. 检验医学与临床，2016，13（11）：1566-1567.
[7] 骆婷婷，丁爱娟，郭红梅. 2009年-2013年婴幼儿腹泻轮状病毒抗原检测分析[J]. 中国卫生检验杂志，2015，25（11）：1834-1836.
论文作者:符志刚
论文发表刊物:《中国蒙医药》2017年1月第1期
论文发表时间:2017/2/24
标签：检出论文; 病毒论文; 小儿论文; 粪便论文; 标本论文; 率为论文; 婴幼儿论文; 《中国蒙医药》2017年1月第1期论文;