（黑龙江省中医药科学院 黑龙江哈尔滨 150036）
【摘要】目的：探讨化学发光法与ELISA法测定血清癌胚抗原（CEA）的方法结果。方法：选取2017年6月—2018年6月期间收治的消化系统肿瘤患者100例为研究对象,抽取患者血清样本进行血清癌胚抗原测定,对两种方法的阳性率进行比较。结果：分别用化学发光法和ELISA法的血清癌胚抗原测定阳性率分别为53.0%和55.0％，两组阳性率无显著差异无统计学意义(P>0.05)。结论：化学发光和ELISA法对血清癌胚抗原（CEA）含量较为准确，有较高的一致性，对消化系统肿瘤患者的诊断具有良好诊断价值。
【关键词】化学发光法；ELISA法；测定；血清癌胚抗原
【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）36-0062-02
癌胚抗原（CEA）是一种糖蛋白，它存在于2～6个月胎儿消化系统（胃肠道、胰腺、肝脏）内，能被肝脏摄入并迅速地崩解。大多数结肠癌组织能合成CEA，而未分化腺癌或癌细胞分化极低者无合成CEA的能力。此外，CEA也可由正常或炎症性肠黏膜产生。目前，癌胚抗原（CEA）主要作为结肠癌术后复发的信号和疑有结肠癌患者的辅助诊断。临床实验室应用较普遍的方法有ELISA法、放射免疫法（RIA）、化学发光法等[1]，本研究对化学发光法和ECLIA法检测CEA的结果可比性进行评估，为高通量ELISA法检测癌胚抗原（CEA），现将检测结果分析如下。
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取2017年6月—2018年6月期间收治的消化系统肿瘤患者100例为研究对象，其中男56例，女44例，年龄35～74岁，平均年龄53.5±3.5岁。
1.2 方法
静脉血5ml或胸腹水5～10ml，用血清避免使用肝素抗凝。或用红帽真空管或黄帽真空管静脉采血，分离血清后如不能立即测定应冷冻。
1.2.1 ELISA法 按照试剂盒说明书操作。操作步骤如下：取出试剂盒平衡至室温（18～25℃），取出微孔反应板条，按要求配好试剂。在已包被抗CEA抗体的孔中加入待测血清（或其他检样）100μl，37℃1小时。用洗涤液洗孔5次。将CEA标准品（0、3、5、10、20ng/ml）和阴性对照、阳性对照与检样按同法同时进行操作，同时设空白对照孔。每孔加酶（HRP）标记抗CEA单克隆抗体100μl（空白孔不加），37℃1小时后洗孔 5次。叩干孔内液体，每孔加酶底物/色原溶液100μl，37℃避光反应15分钟呈色。每孔加2mol/L H2S0450μl终止反应。用酶联仪在相应波长测吸光度。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆计算以标准品的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，在半对数坐标纸上绘出校正曲线，根据样品的吸光度值由校正曲线杏出相应的浓度；或用标准品的浓度与吸光度值计算出校正曲线的直线回归方程式，将样品的吸光度值代人方程式，计算出样品浓度[2]。
1.2.2化学发光法 采用Access全自动微粒子酶免疫化学发光仪，按照仪器操作说明书进行，分离血清上机包括加样、分离、搅拌、温育、打印结果等各项操作自动完成。
1.3 统计学处理分析
采用SPSS20.0统计学软件对所有数据进行统计学分析，计量资料采用平均值±标准差（x-±s），t检验；计数资料采用百分比率（%）表示，χ2检验。以P＜0.05为组间差异显著，有统计学意义。
2.结果
化学发光法和ELISA法检测血清CEA结果，按CEA浓度分为3组，化学发光法，＜5ng/ml组（2.92±0.08）ng/ml，5～20ng/ml组（8.70±0.45）ng/ml，＞20ng/ml组（46.10±3.31） ng/ml；ELISA法，＜5ng/ml组（2.99±0.08）ng/ml，5～20ng/ml组（8.96±0.55）ng/ml，＞20ng/ml组（43.75±3.38）ng/ml；两组检测结果比较差异不明显，无统计学意义（P＞0.05）。
化学发光法和ELISA法重复性比较，选择４份血清标本血清CEA浓度分别为5ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、90ng/mL的，分别采用化学发光法和ELISA法进行重复测定，化学发光法的变异系数（CV）分别为4.2%、3.4%、5.3%、4.4%，ELSIA法的CV分别为13.3%、14.2%、12.8%、14.6%，CV均小于15%的重复性合格。
化学发光法和ELISA法检测血清CEA，化学发光法检测血清CEA阳性53例，阴性47例，阳性率53.0%；ELISA法检测血清CEA阳性55例，阴性45例，阳性率55.0%；化学发光法与ELISA法均为阳性53例，均为阴性45例；两组阳性率比较无明显差异，无统计学意义。
3.讨论
癌胚抗原（CEA）最初发现于成人结肠癌和胎儿组织中，因此提取物的抗原出现在胚胎细胞上，故称为癌胚抗原。CEA是一种结构复杂的可溶性糖蛋白，分子量约为180000，半寿期为14天，胚胎两个月后主要由胎儿的胃肠管、胰腺和肝脏分泌CEA，出生后消失。在成人CEA主要是由结肠黏膜细胞分泌到粪便中，一天约70mg，少量重吸收至血液。胃肠道恶性肿瘤时可见血清CEA升高，在乳腺癌、肺癌及其他恶性肿瘤患者的血清中也有升高。因此认为，CEA是一种广谱肿瘤标志物，虽然不能作为诊断某种恶性肿瘤的特异性指标，但在恶性肿瘤的鉴别诊断、病情监测、疗效评价等方面，仍有重要临床价值[3]。
血清CEA升高主要见于结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、胰腺癌等，其他恶性肿瘤也有不同程度的阳性率。当CEA比正常持续升高5～10倍，强烈提示恶性肿瘤，特别是肠癌的存在。高水平的CEA可作为肿瘤已有转移的标志，因为CEA是一种细胞黏附分子，极易浸润和转移。
ELISA法采用ELISA双抗体夹心法。用抗CEA单克隆抗体包被微孔板，将待测样本、标准品以及阳性和阴性对照等分别加入各孔中，反应后再加入酶结合物（HRP-抗CEA单克隆抗体），使特异性地形成-固相抗体CEA-酶标抗体复合物，充分洗涤后加酶底物/色原呈色。呈色强度与在测定工作范围内的样本中的CEA浓度成正比。
CLIA法Access CEA分析是一个双位点夹心法的酶免疫分析，采用了两个针对CEA不同抗原位点的大鼠抗-CEA单抗。将化学发光底物加入反应管，与反应体系中存在的碱性磷酸酶进行反应，发出的光量子被光电比色计所检测。产生的光量子与样本的CEA浓度成正比。最后，对照仪器中储存的多点定标曲线中所描述的光量子与标准品CEA的对应关系而计算出样品中的CEA浓度。
本研究表示，化学发光和ELISA法对血清癌胚抗原（CEA）含量较为准确，对消化系统肿瘤患者的诊断具有良好诊断价值。
【参考文献】
[1]郝梦，叶强，马瑛龙.两种方法检测癌胚抗原的结果对比[J]. 医疗装备,2016,29(18):89-89
[2]牟晓峰，周爱凤，赵自云，陈娟，于华.高通量ELISA法与电化学发光法测定血清癌胚抗原的比较[J].国际检验医学杂志,2014(22):3088-3089
[3]谢跃文,王强,夏洁.电化学发光和酶联免疫吸附法检测癌胚抗原和甲胎蛋白结果分析[J].国际检验医学杂志，2011,32(2):255-256.
论文作者:仇婷婷
论文发表刊物:《心理医生》2018年36期
论文发表时间:2019/1/9
标签：血清论文; 抗原论文; 化学论文; 浓度论文; 统计学论文; 恶性肿瘤论文; 光度论文; 《心理医生》2018年36期 论文;