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前言
细叶韭（Allium tenuissimum L）为百合科葱属多年生草本植物，细叶韭鳞茎数个聚生，狭圆柱状；鳞茎外皮暗褐色至灰褐色，膜质，条状破裂；叶半圆柱状至近圆柱状，粗0.5~1.0mm，与花葶近等长，光滑或稀，沿纵棱具细糙齿[1]。叶数片丛生；线形细长，宽不足2毫米，有3棱。又叫野韭菜、细丝韭、山韭，陕北人称之为在摘蒙（音），也是陕北人民从历史上沿袭下来作为香料蔬菜食用的植物，其香味特别，可以作为蔬菜、烹调香料、腌制食品等供人们食用。细叶韭营养丰富，芳香诱人，适口性好，是优良牧草。细叶韭是解毒植物，当牲畜误食醉马豆等有毒草类后，牧民常喂以细叶韭等植物解毒；细叶韭耐旱、耐寒、耐瘠薄、生长能力强，无论是在荒芜寒冷的毛乌素沙区、贫瘠的黄河两岸，还是干旱的白于山区均可良好生长，是很好的防风固沙、水土保持植物；同时细叶韭花花色洁白或淡紫，花期长，是良好的观赏植物；细叶韭花花香特异，适于调味，效果优于葱、蒜，特别是经油炸之后，呈现特殊、浓郁香味，是陕北食用调味品[2]。细叶韭还可以作为蔬菜，春夏采嫩叶，可作馅、炒食、凉拌，味道鲜美，经常食用还有补肾壮阳等功效。
关于细叶韭的化学成分的研究，国内报道较少。本文采用中药学方法，对其进行了成分分析，还使用常见的化学方法定量分析了糖、生物碱、粗脂肪。另外紫外法定量分析了总三萜、黄酮类和酚类。
一 材料与方法
1.实验材料
1.1 仪器
电热恒温水浴锅 余姚市东方电工仪器厂
循环水式多用真空泵 郑州长城科工贸有限公司
旋转蒸发器 上海亚荣生化仪器公司
电子天平 上海精科天平
粉碎机（9101型） 北京检测仪器有限公司
超声波细胞粉碎机 巩义市予华仪器有限责任公司
紫外分光光度计（uv-2550） 日本岛津
电热恒温箱，研钵、备有变色硅胶的干燥器、滤纸筒、索氏抽提器一套；广口瓶、脱脂线、脱脂棉、脱脂细砂。试管；移液管5mL；烧杯100mL；250mL锥形瓶；调温电炉；滴定管25mL
1.2 试剂
10%α－萘酚乙醇试剂，0.2%茚三酮乙醇，醋酸，1%三氯化铁，0.2mol/L硫酸，碳酸氢钠，三氯化铝，乙醇，碘化钾，费林试剂，无水乙醚，熊果酸，没食子酸，芦丁。
1.3 材料
选取陕北常见细叶韭为原材料，经干燥后，用粉碎机粉碎成样品粉末备用。
2． 实验方法
2.1 细叶韭的化学成分定性实验[3]
2.1.1 水溶性成分的检识
取样品粉末5g放入锥形瓶中，加入10倍量蒸馏水于50－60℃水浴中温浸8小时，过滤，滤液供检查下列各类成分：
（1）糖类、多糖和甙类
α－萘酚试验：取水提取液试样（以下简称水提样）1ml，加入10%α－萘酚乙醇试剂1－2滴振摇后，倾斜试管，沿管壁徐徐加入0.5ml浓硫酸，静置。
（2）氨基酸、多肽和蛋白质
茚三酮试验：取水提样1ml，加0.2%茚三酮乙醇试剂2－3滴，摇匀，在沸水浴中加热数分钟，冷却后观察。
（3）酚类和鞣质
三氯化铁试验：取水提样1ml，加醋酸酸化后，加1%三氯化铁试剂数滳，观察溶液。
（4）有机酸
PH试纸试验：取水提样，以PH试纸检查，观察酸碱性。
（5）皂甙
泡沬试验：取水提样1－2ml置于试管内，激烈振摇2分钟，观察泡沬，再把溶液加热至沸或加入乙醇，再振摇，仍观察泡沬。
（6）维生素B1的定性[4]
重氮化反应：取水提样1 g置试管中，加0.2 mol/L硫酸溶液5 mL，用力振荡，提取硫胺素。放置10 min后，用滤纸过滤。取滤液1 mL，加入碳酸氢钠碱性溶液1.5 mL，摇匀后，观察溶液。
2.1.2 脂溶性成分的检识
取中5g样品粉末放入锥形瓶中，加10倍量乙醇，沸水浴上回流提取6小时，过滤。滤液回收乙醇浓缩至无醇味。
（1）黄酮类
三氯化铝试验：取试样乙醇提取液点于滤纸片上，喷雾三氯化铝试剂，干燥后，观察滤纸片。
（2）蒽醌类
碱液试验：取试样乙醇提取液1ml加10%苛性碱试剂，观察溶液。
（3）甾体和三萜类
三氯化锑试验：取试样乙醇提取液滴加于滤纸片，干燥后，喷洒三氯化锑试剂，100℃ 加热观察滤纸片。
（4）生物碱
碘化钾试验：取试样水溶液1ml加碘化钾试剂1－2滴，观察溶液。
（5）香豆素及内酯类
荧光试验：取供丙项试验的乙醇液，滴于滤纸片上，干燥后置于紫外灯下观察。
2.2 细叶韭的化学成分定量实验
2.2.1 糖定量[5]
本实验采用费林试剂热滴定法。费林试剂由甲、乙两种溶液组成。甲液含硫酸铜和亚甲基蓝（氧化还原指示剂）；乙液含氢氧化钠，酒石酸钾钠和亚铁氰化钾。将一定量的甲液和乙液等体积混合时，硫酸铜与氢氧化钠反应，生成氢氧化铜沉淀：2NaOH + CuSO4 = Cu（OH）2+ Na2SO4在碱性溶液中，所生成的氢氧化铜沉淀与酒石酸钠反应，生成可溶性的络合物酒石酸钾钠铜。
（1）样品中还原糖的提取
准确称取1g样品粉末，放在100mL烧杯中，先以少量蒸馏水调成糊状，然后加入约40mL蒸馏水，混匀，50℃恒温水浴中保温20min，不时搅拌，使还原糖浸出后过滤，将滤液全部收集在50mL的容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，过滤取滤液5ml定容至50mL容量瓶中，定容至刻度，混匀，即为稀释1000倍的还原糖水解液，用于还原糖测定。
（2）样品中总糖的水解及提取
准确称取1g样品粉末，放在大试管中，加入6mol/L HCl 10mL，蒸馏水15mL，在沸水浴中加热0.5h，取出1～2滴置于白瓷板上，加1滴I-KI溶液检查水解是否完全。如已水解完全，则不呈现蓝色。水解毕，冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂，以6mol/L NaOH溶液中和至溶液呈微红色，并定容到100mL，过滤取滤液10mL于100mL容量瓶中，定容至刻度，混匀，即为稀释1000倍的总糖水解液，用于总糖测定。
（3）空白滴定
准确吸取费林甲乙液各5mL和蒸馏水5mL放入250mL的锥形瓶中，再用滴定管加入定量的标准葡萄糖液，混匀后放在石棉网上加热，应使瓶内溶液在2min内达到沸腾，以每滴4～5s的速度由滴定管滴入葡萄糖液直至蓝色消失为止。沸腾前加入的标准葡萄糖溶液量与沸腾后滴定时所用的标准葡萄糖溶液量的总和，就是测定空白时耗用的标准葡萄糖液mL数V1。
（4）样品糖的定量测定
还原糖样品溶液预测定：吸取费林试剂甲液及乙液各5.00mL，置于250mL锥形瓶中，加蒸馏水10mL，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以先快后慢的速度从滴定管中滴加样品溶液，滴定时要保持溶液呈沸腾状态。待溶液由蓝色变浅时，以每2秒1滴的速度滴定，直至溶液的蓝色刚好褪去为终点，记录样品溶液消耗的体积。
总糖样品溶液测定：吸取费林试剂甲液及乙液各5.00mL，置于锥形瓶中，加蒸馏水10mL，从滴定管中加入比与测试样品溶液消耗的总体积少1mL的样品溶液，加热使其在2min内沸腾，准确沸腾30s，趁热以每2s 1滴的速度继续滴加样液，直至蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样品溶液的总体积。平行操作3次，取其平均值。
2.2.2 生物碱的定量[6]：生物总碱的提取
取粉碎好的样品10g，加95 %乙醇100ml回流6h，重复3次，将3次滤液合并，蒸馏去醇至无醇味，冷后用浓盐酸调至pH=2，滤液移至分液漏斗中，先加入1/2体积氯仿150ml后再加氨水5ml，调至pH=2，滤液移至分液漏斗做2次萃取，明显分层后放出氯仿于具塞锥形瓶中，剩余的碱水用少量氯仿再萃取2次，合并3次氯仿萃取液集中于另一分液漏斗中，分出氯仿层，加入20g无水Na2SO4，密塞容器振摇1min，静止10min 后，脱去氯仿中水分，用滤纸滤除结晶Na2SO4，水浴蒸馏回收氯仿至干，加入15ml丙酮使溶液至微浊状态，于冰箱中放置析晶，24h后称重，重复3次。
2.2.3 粗脂肪测定[7]
准备工作：将恒温水浴锅的水温事先加热（80℃）。务必保证提取管和烧瓶内干燥，洁净；若否，将其洗净并置于干燥箱内105℃烘干。
折滤纸斗：取一张 11cm的滤纸，折成筒状，再将其一端折起来封死，便做成了滤纸斗。
称样：先取2g样品装入滤纸斗中，把滤纸斗的开口处折起来封死；防止样品泄出滤纸斗。调整滤纸斗的高度，使其放在抽提管中时略低于虹吸管的上弯头处。
提取：将索氏提取仪，从下至上安装。首先安装好烧瓶，并调整其高度，使其刚好能浸入水浴锅中的水中。将装置从水浴锅的水中取出，继续安装提取管，把装有样品的滤纸斗放入提取管内，向提取管中缓缓倒入石油醚直至液面达到虹吸管上弯头部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入石油醚，使其液面达到第一次液面的一半。用乳胶管将冷凝管与自来水管相连，将冷凝管安装到提取管上，检查一下，确保所有接口均对接完好（不漏气，不打滑）。轻轻打开自来水（冷凝用），将索氏提取仪整个装置放入恒温水浴锅中加热提取（水温80℃左右），提取时间18h。
回收石油醚：提取后，当石油醚在提取管中的液面即将达到虹吸管的上弯头处时，从水浴锅中取出索氏提取仪装置，室温冷却5～10min；取下平底烧瓶，将提取管的下端口插入回收瓶中，倾斜装置，提取管中的石油醚会虹吸而流入回收瓶中，达到回收的目的。再装上平底烧瓶，继续放入恒温水浴锅中加热直至冷凝管下端无石油醚滴下，表明平底烧瓶中的石油醚已经蒸干。
称量粗脂质量：将平底烧瓶放入120℃的电热鼓风干燥箱中烘15min，取出冷却后称重。再将平底烧瓶用洗涤剂洗净，于120℃的电热鼓风干燥箱中烘干（约15min），取出冷却后称重，两者的质量之差就是粗脂的质量。
2.2.4 总三萜的测定[8，9，10]
（1）总三萜提取
准确称取粉碎好的样品5g，加入50ml乙醇，超声提取30min，过滤后滤渣再入50ml乙醇，超声提取30min，共提3次。合并滤液，65℃减压蒸干。然后用无水乙醇溶解并定溶至50ml，保存备用。平行三次。
准确称取粉碎好的样品3g，使用索氏抽提法提取，加入50ml乙醇，蒸干提完后用无水乙醇溶解并定容至50ml，保存备用。平行三次。
（2）标准曲线的绘制
精密吸取熊果酸标准品无水乙醇溶液（0.13mg/ml）0ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、1.0ml、1.2ml分别置于20ml具塞试管中，80℃水浴至溶剂挥干，然后分别加5%香草醛-冰乙酸溶液0.5ml、高氯酸0.8ml，60℃水浴12分钟，冷却至室温，最后分别加冰乙酸5ml、摇匀。在显色15-60 min内进行光谱扫描及吸收值测定。
（3）总三萜测定
选用熊果酸为对照品，采用5%香草醛-冰醋酸溶液及高氯酸显色后，进行总三萜的含量测定。总三萜测定的条件为：取定容好的样品0.2ml，85℃水浴挥干乙醇，5%香草醛-冰醋酸溶液0.3mL，高氯酸1.0mL，60℃水浴45 min后，在0℃下冷却，最后加冰醋酸定容至5.0mL，摇匀，在其最大吸收波长548nm处测定。
2.2.5 酚类的测定[11，12]
（1）酚提取
准确称取粉碎好的样品5g，加入50ml乙酸乙酯，超声提取30min，过滤后滤渣再入50ml乙酸乙酯，超声提取30min，共提3次.合并滤液，38℃减压蒸干。然后用甲醇溶解并定容至50ml，保存备用。平行三次。
（2）标准曲线的绘制
准确称取没食子酸1mg置容量瓶中，用甲醇溶解并稀释到10 mL作为对照品溶液。分别吸取没食子酸对照品溶液0mL，0.1mL，0.2mL，0.3mL，0.4mL，0.5mL用甲醇溶解并稀释到10mL，将没食子酸液于紫外可见分光光度计上，在190-400mn的范围内进行扫描，由图可见，最高吸收峰均出现在216.2nm，测定波长为216.2nm。以没食子酸的质量浓度为横坐标，测定的吸光度值为纵坐标，建立标准曲线。
（3）酚测定
以没食子酸作为标准品，在216.2nm测定吸光度值A，样品总酚含量以没食子酸表示，用没食子酸标准品做标准曲线来计算样品中总酚含量。取定容好的样品0.2ml，用甲醇溶解并定容至10ml，在216.2nm测定吸光度值A。每一个样品测定三次，取平均值。
2.2.6 总黄酮测定[13，14，15]
（1）总黄酮的提取
准确称取干燥的样品2.000±0.002g放入具塞三角瓶中，加入60%乙醇溶液30ml，放入超声波仪65℃强档超声波提取30min，过滤，二级提取，合并滤液减压浓缩，用65%的乙醇溶解并定容至25ml容量瓶中，待测。平行三次。
（2）标准曲线的绘制
取含量为0.200mg/ml芦丁标准液0、1.25、2.5、3.75、5、6.25ml分别加入到25ml容量瓶中，加蒸馏水6ml，加入5%亚硝酸钠溶液1ml，反应6min后，加入10%的硝酸铝溶液1ml，6min后加入4%的氢氧化钠溶液10ml，用蒸馏水定容，反应15min后在紫外分光光度计上497nm处测定吸光度，未加芦丁标准液的作空白样，得回归方程。
（3）总黄酮测定
以芦丁作为标准品，在500nm测定吸光度值A，样品总酚含量以芦丁表示。用没芦丁标准品做标准曲线来计算样品中总黄酮含量。取定容好的样品1ml，加入25ml容量瓶中，加蒸馏水6ml，加入5%亚硝酸钠溶液1ml，反应6min后加入10%的硝酸铝溶液1ml，6min后加入4%的氢氧化钠溶液10ml，用蒸馏水定容，反应15min后在紫外分光光度计上500nm处测定吸光度。每一个样品测定三次，取平均值。
二 结果与讨论
1.实验结果
1.1 细叶韭的化学成分定性实验结果
1.1.1 水溶性成分的检识
（1）糖类、多糖和甙类
经α－萘酚试验出现紫红色环，表明含有糖、多糖、或甙类。
（2）氨基酸、多肽和蛋白质
经茚三酮试验呈现紫红色斑点，表明含有氨基酸、多肽等。
（3）酚类和鞣质
经三氯化铁试验溶液呈现蓝绿色，表明含有酚性成分或鞣质。
（4）有机酸
经PH试纸试验呈酸性，表示含有酚性成分或有机酸。
（5）皂甙
经泡沬试验产生少量持续性泡沬，再把溶液加热至沸或加入乙醇，再振摇，能产生少量泡沬，表明不一定含有皂甙。
（6）维生素B1的定性
经重氮化反应在10 min内有深红色的出现。表明含有维生素B1。
1.1.2 脂溶性成分的检识
（1）黄酮类
经三氯化铝试验呈黄色斑点，并于紫外灯下观察有明显荧光，表明有黄酮类成分。
（2）蒽醌类
经碱液试验呈红色，再加酸使成酸性，则红色褪去，表明含有蒽醌类化合物。
（3）甾体和三萜类
经三氯化锑试验呈现各种颜色，表明含有甾体或三萜。
（4）生物碱
经碘化钾试验立即有橘红色沉淀，表明含有生物碱。
（5）香豆素及内酯类
经荧光试验呈现蓝－绿色荧光，再喷雾1%氢氧化钾试剂，荧光加强，表明含有香豆素类化合物。
1.2 细叶韭的化学成分定量实验结果
1.2.1 总糖定量结果
1.3 分析
由以上实验结果分析可得，细叶韭含有糖、氨基酸、蛋白质、酚类、有机酸、皂甙、黄酮类、蒽醌类、甾体、三萜类、生物碱、香豆素及内酯类物质，其中总糖的含量为31.7%左右、还原糖16.0%左右；生物碱的含量为1.39%左右，粗脂肪的含量为8.88%左右，总三萜的含量为4.48%左右，黄酮类的含量为1.37%左右，酚类的含量为1.27%左右，由此可以看出细叶韭中糖与粗脂肪的含量较高。
3.讨论
本试验初步探讨了细叶韭花的化学成分并进行了初步分析，细叶韭所含的水溶性成分主要有糖、氨基酸、蛋白质、酚类、有机酸、皂甙；脂溶性成分主要有黄酮、香豆素及萜类内酯、甾体、挥发油和油脂；此外，细叶韭还含有一定量的维生素，如维生素B1。本试验对这些成分进行了初步定性分析，这些成分含量和性质还需进一步分析。
本试验使用常见的化学方法定量分析了细叶韭花的化学成分中的糖、生物碱、粗脂肪。另外紫外法定量分析了总三萜、黄酮类和酚类。其中总糖的含量为31.7%左右、还原糖16.0%左右；生物碱的含量为1.39%左右，粗脂肪的含量为8.88%左右，总三萜的含量为4.48%左右，黄酮类的含量为1.37%左右，酚类的含量为1.27%左右，由此可以看出细叶韭中糖与粗脂肪的含量较高。表明细叶韭是良好的香料，油料作物。另外本试验在提取物质时有些使用多种方法提取，目的在于找到最有效的提取方法，在提取总三萜时，索氏抽提法比超声波提取法效果差，超声波提取法对物质提取效果好。但是由于实验条件有限，没能采用先进的仪器，只能使用常见的化学方法定量法，只能初步分析细叶韭花的化学成分的含量，要对这些成分分析含量和性质还需进一步分析。
综上所述：试验结果表明细叶韭含有糖、氨基酸、蛋白质、酚类、有机酸、皂甙、黄酮类、蒽醌类、甾体、三萜类、生物碱、香豆素及内酯类等物质，其中糖与粗脂肪的含量较高，这些物质使细叶韭营养丰富，芳香诱人，是良好的香料植物，使细叶韭有较好的营养价值。但是由于实验条件有限，本实验不能判断出细叶韭其香味是由何种物质而来，细叶韭营养价值的高低，要测定这些还有待于进一步研究。
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论文作者:马淑艳
论文发表刊物:《健康世界》2015年8期供稿
论文发表时间:2015/11/11
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