郑强 辽宁省沈阳市骨科医院 辽宁沈阳 110044
【摘 要】目的 本实验分别通过检测不同操作时差下，阴性标本的假阳性率、所有标本抗-HBc S/CO值的变化，探明操作时差对抗-HBc结果的影响。方法 采用上海科华乙肝核心抗体ELISA竞争抑制法试剂盒检测抗-HBc。结果 操作时差对抗-HBc阳性标本结果总的影响规律是：随着操作时差的延长，标本S/CO实测值逐渐降低。结论 在不同的操作时差影响下，实测为阳性的标本其实际很可能是阴性，在实际工作中可根据样本在板孔中的位置及自己的加样速度，判断是否存在操作时差及操作时差的长短，必要时进行复查以保证检测结果的准确性。
【关键词】酶联免疫吸附试验；乙型肝炎病毒核心抗体；检测灰区；操作时差
1对象和方法
1.1 对象
1.1.1标本 抗-HBc阳性标本40份，阴性标本90份。3500r/min，离心5min，分离血清，置-70℃冰箱冻存备用。
1.1.2试剂 乙肝核心抗体ELISA竞争抑制法试剂盒，购自上海科华公司。
1.2 方法
1.2.1标本真值确立及分组
每份标本均以操作时差为0min的S/CO值，作为其真值。
1.2.2 结果判定
S/CO≥1.0为阴性，S/CO＜1.0为阳性。
1.2.3 数据处理
使用SPSS 13.0软件对实验数据进行统计分析。
2 结果
2.1 操作时差对抗-HBc阴性标本结果的影响
2.1.1操作时差影响下抗-HBc阴性标本出现假阳性情况
随着操作时差的延长，不同S/CO值组标本其S/CO实测值均出现不同程度的下降，但只有S/CO值在1.0～2.0区段的5组标本，在研究的操作时差内出现了假阳性。
2.1.2操作时差对抗-HBc阴性标本S/CO值影响
对不同操作时差下出现假阳性标本的S/CO实测值进行统计，与其真值进行比较，均具有统计学意义。结果详见表1。
表1 不同操作时差假阳性标本抗-HBcS/CO值与真值比较（）
2.2操作时差对抗-HBc阳性标本结果的影响
操作时差对抗-HBc阳性标本结果总的影响规律是：随着操作时差的延长，标本S/CO实测值逐渐降低。对处于不同S/CO值组的抗-HBc阳性标本进行单因素方差分析时，除了S/CO﹤0.1组外，其他组各操作时差S/CO值与0min比较，均有统计学差异。
3 讨论
所谓操作时差是指由于操作的原因造成加入标本、试剂及混合均匀的前后时间差异[1]，是竞争法ELISA检测抗-HBc显著的影响因素之一[2]。本实验分别通过检测不同操作时差下，阴性标本的假阳性率，所有标本抗-HBc S/CO值的变化，探明操作时差对抗-HBc结果的影响，从而指导检验工作者对可疑结果进行及时复检，避免医疗纠纷的发生。
本研究结果显示，随着操作时差的延长，所有标本S/CO实测值与真值相比均出现不同程度的下降[3]。对真值为阳性的标本，操作时差不影响其阴阳性判断。对于S/CO值在1.0～2.0区段抗-HBc阴性的5组标本，在研究的操作时差内均出现假阳性。对各操作时差下的假阳性标本S/CO值进行统计，操作时差为10min时，17例假阳性标本其S/CO实测值为0.778±0.259；20min时33例假阳性标本其S/CO实测值为0.538±0.220；30min时48例假阳性标本其S/CO实测值为0.552±0.272；40min时59例假阳性标本其S/CO实测值为0.601±0.361；50min时60例假阳性标本其S/CO实测值为0.531±0.369；60min时69例假阳性标本其S/CO实测值为0.489±0.334。由此，可以看出在不同的操作时差影响下，实测为阳性的标本其实际很可能是阴性[4]。因此，在实际工作中，如遇到单纯的抗-HBc阳性或难以解释的乙肝组合，可根据样本在板孔中的位置及自己的加样速度，判断是否存在操作时差及操作时差的长短，必要时进行复查以保证检测结果的准确性。
抗-HBc是HBV感染后最早产生的抗体，假阳性结果会给患者造成不应有的精神和经济负担，甚至出现医疗纠纷[5]。目前最好的解决方法是使用化学发光免疫分析仪检测肝炎病毒，但检验费用就将大幅提升。对于短期内难以实现自动化的实验室，笔者建议可疑标本在避免操作时差的情况下进行复检，以保证结果的准确性。
参考文献：
[1]金胜鑫，温怀凯.操作时差对酶免疫竞争一步法检测乙型肝炎病毒核心抗体的影响[J].现代中西医结合杂志，2006，15（24）：3404.
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[3]赵海建，张传宝，周伟燕，等.应用六西格玛管理方法评价脂类检验项目质量水平[J].中华检验医学杂志，2014，37（04）：311-314.
[4]Carraro P，Plebani M.Errors in a Stat Laboratory：Types and frequencies 10 years later[J].Clinical Chemistry and Laboratory Medicine.2007，53（03）：1257-1260.
[5]翟培军，胡冬梅，贺学英，等.从ISO 15189∶2012与ISO 15189∶2007的比较看国际对医学实验室要求的新变化[J].中华检验医学杂志，2013，36（10）：865-868.
论文作者:郑强
论文发表刊物:《中国医学人文》(学术版)2016年1月第1期
论文发表时间:2016/4/20
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