【摘要】 在乙型肝炎中，即使在干扰素和核苷(酸)类似物等抗病毒药物的治疗下，也只能控制疾病的进展，而不能完全治愈。这与肝细胞核中乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA（hepatitis B virus covalently closed circular DNA,HBV cccDNA）密切相关，cccDNA能够在肝细胞中长期存在，同细胞分裂一同扩增，非常难以消除。因此，将HBV cccDNA作为治疗肝炎等疾病的靶点来研发治疗相关药物是十分具有可行性和研究价值的。
【关键词】 乙型肝炎；抗病毒药物；HBV cccDNA；靶点
【中图分类号】R512.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）34-0013-01
Research progress of targeted drugs for HBV cccDNA Liu Jinghui.
Xiaogan Traditional Chinese, Hubei,Xiaogan 432100,China
【Abstract】In hepatitis b, even in the interferon and nucleoside analogues (acid) under the treatment of antiviral drugs such as, also can control the progress of the disease, but not completely cured. It and liver hepatitis B virus covalently closed circular DNA in the nucleus (hepatitis B virus get covalently closed circular DNA, HBV cccDNA) are closely related, cccDNA can exist in liver cells for a long time, amplification, together with the cell division is very difficult to eliminate. As a result, the HBV cccDNA diseases such as targets to develop as a treatment for hepatitis treatment drugs is very feasible and research value.
【Key words】Hepatitis b;Antiviral drugs;HBV cccDNA;Target
HBV感染过程中，即便用有效抗病毒药物治疗，患者血清中HBV受到抑制，病毒抗原逐渐减少，但药物停止使用之后HBV再次引起疾病复发[1]。而HBV感染干细胞之后，病毒颗粒的DNA在干细胞内的酶作用下转变成为了共价闭合环状的DNA，即HBVcccDNA，它非常稳定，而这有可能是引起肝炎复发的重要原因。因此，抗病毒治疗时将HB V cccDNA作为靶点来治疗乙型肝炎是非常具有可行性的 。
1.HBV cccDNA的特征
HBV是属嗜肝DNA病毒的小DNA病毒，具有3.2kb部分双链的DNA，基因组由2条不完整的DNA链组成，负链较长，为完整闭合的链，正链不完整。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆P蛋白绑定在负链DNA上，被二十而体结构的衣壳所包裹，含有表而蛋白的脂质双分子层将二十而体结构的核衣壳包裹其中，组成了完整的HBV颗粒。病毒感染肝细胞后，HBV rcDNA（HBV双链松弛环状DNA）进入细胞核后有部分就会被转变成HBV cccDNA。随后cccDNA作为模板，转录pgRNA和病毒亚基因组RNA。在胞浆内，pgRNA作为逆转录模板，最终又会形成cccDNA，亚基因RNA被翻译所需的蛋白质这样就可以重新组装新的HBV病毒颗粒继续感染肝细胞。
2.靶向cccDNA治疗方法
2.1 干预rcDNA向cccDNA的转变
Cai等[2]在85000多种化合物中筛选出2种结构相关的双取代磺胺类药物(disubstituted sulfonamides, DSS)，目前称为C C C-0975和CCC-0346.在细胞培养中以很低的浓度即开始起效，证实他们具有作为cccDNA抑制剂的作用.
2.2 抑制HBV cccDNA的表达
2.2.1喹啉类衍生物
Wang等[3]设计合成了39种告达亭普元衍生物并在体外实验中评估其抗HBV活性，结果发现其中23种衍生物显示出较强抗HBV活性，11种衍生物在抑制浓度<10umol/L时即可明显抑制HBV DNA复制。
2.2.2 siRNA
siRNA除了在转录后水平调节基因的表达以外，也可以引起转录基因的沉默，这主要是通过RNA干扰介导的异染色质形成和RNA指导的DNA甲基化(RNA-directed DNAmethylation, RdDM)而实现的。
2.3 分解和破坏cccDNA
2.3.1锌指核酸酶(zinc-finger nucleases, ZFNs)
ZFN是ZFPs（锌指结构蛋白家族）家族成员Cys2-His2和限制性核酸内切酶II的人工嵌合物，在限制性核醉内切酶II的作用下能够结合并剪断cccDNA双链[4]。
2.3.2 CRISPR/Cas9
CRISPR/Cas9系统包含2个短RNAs和1个DNA核酸内切酶Cas9，短RNAs复合体指引Cas9DNA核酸内切酶切割目标DNA序列。它只需合成一个靶向基因上携带NGG的20nt的相应片段的gRNA，与携带了cas9的载体重组就可以。
3.结语
目前HBV彻底根除的研究重点集中在干扰cccDNA的合成、抑制cccDNA的转录、直接降解和破坏cccDNA这三方面。近年来，尽管靶向cccDNA的治疗策略显现很好的效果，但是均处于早期研究阶段，能否在临床上真正的用于彻底根除HBV仍然需要进一步的研究和验证。
【参考文献】
[1]钱峰,李明,朱传武.抗病毒药物对乙型肝炎病毒cccDNA水平的影响[J].世界华人消化杂志,2015,23(22):3495-3504.
[2] Cai D, Mills C, Yu W,et al.Identification of disubstituted sulfonamide compounds as specific inhibitors of hepatitis B virus covalently closed circular DNA formation[J].Antimicrobial Agents &Chemotherapy, 2012, 56(8): 4277-4288.
[3] Wang LJ,Chen H,Ma YB,et al.Design,synthesis and biological evaluation of caudatin analogs as potent hepatitis B virus inhibitors[J].Med Chem,2015,11(2):165-179.
[4] Young JJ,Harland RM.Targeted gene disruption with enginerred zinc-finger nucleases(ZFNs)[J].Methods Mol Biol,2012,917:129-141.
论文作者:刘敬辉
论文发表刊物:《医药前沿》2016年12月第34期
论文发表时间:2016/12/6
标签：乙型肝炎论文; 抗病毒论文; 病毒论文; 转录论文; 核酸论文; 衍生物论文; 靶向论文; 《医药前沿》2016年12月第34期论文;