关键词:无偿献血者;乙肝病毒;核酸检测;价值
乙型肝炎病毒为导致人体引起乙型肝炎的病原体,为嗜 肝 DNA 病毒科,该科病毒具有禽嗜肝 DNA 病毒属以及正嗜 肝 DNA 病毒属两个属,而导致人体引起感染为正嗜肝 DNA 病毒属,常用检测方式为 HBV 抗原、抗体检测 。乙型肝炎 病毒感染是全球性的公共卫生问题,随着基因工程疫苗的生 产,乙肝疫苗的普及率逐年上升,感染率呈下降趋势。但是 随着多种因素影响,近年来乙型肝炎发病率逐渐增加,对临 床用血安全造成严重影响,为了提高临床用血安全,给临床 疾病治疗提供安全用血,对血站血液质量提出较高要求,而 血液中乙型肝炎病毒筛查有两种检测方式,酶免疫试剂主要 应用在乙型肝炎表面抗原检测中,能发现非典型血清转阳、 病毒变异情况,但是由于多种因素影响,易发生漏检情况 。 本次研究对无偿献血者乙肝病毒核酸检测价值进行分析,为 提升乙肝病毒筛查准确率提供参考。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取 2018年 1 月至 2018年 9 月的 8048 例无偿献 血者的血液标本进行研究分析。其中,进行 HBV DNA 核酸 检测的标本,使用带有分离胶的真空采血 管,真空管容量为 5mL /管; 进行 HBsAg 双试剂检测的标 本,使用 EDTA-K2 抗凝真空采血管,真空管容量为 6mL。 HBV DNA 检测标本应在采集后 4 小时内完成离心,HBsAg 检测标本应在采集当天及时完成离心,离心条件为 1600g 离 心 20min。离心处理好的标本分开存放在 2 ~ 8℃ 冰箱,并要 确保在 72h 之内完成 HBsAg 检测及 HBV DNA 核酸检测。
1.2 检测仪器与检测试剂
使用 HAMILTON STAR 全自动加样仪和 FAME2420 后处 理( 烟台奥斯邦) 、ELISA /HBsAg 检测试剂 (珠海丽珠) 、 ELISA /( HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb) 检 测 试 剂( 英科新创) 、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 质控品( 北京康彻斯坦) 、全自动核酸加样分离纯化系统 Mi- crolabSTAR /cobasAmpliprep( 瑞士罗氏) 、全自动核酸检测系 统 cobasTaqMan( 瑞士罗氏) 、乙型肝炎 /丙型肝炎 /人类免疫 缺陷病毒( 1 + 2 型) 核酸检测试剂盒 version2. 0( PCR -荧光 法) ( 瑞士罗氏) 、乙型肝炎 /丙型肝炎 /人类免疫缺陷病毒( 1 +2 型) 核酸质控试剂( PCR-荧光法) ( 瑞士罗氏) 。
1.3 检测方法
1.3.1 ELISA 检测
HBsAg 检测时,对每份献血者血液标本用珠海丽珠和英科新创试剂检测; HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 检 测时,对每份献血者血液标本用英科新创试剂检测。每一 次试验应有室内质控和阴阳性对照,室内质控在控,阴阳 对照结果符合要求。 判定标准: 当 S /CO≥1 检测为阳性; 当 S /C<0. 7 检测 为阴性; 若在 0. 7~ 1 之间则为检测灰区,不符合标准。
1.3.2 核酸检测
使用混样方法进行核酸检测,数量为 6 个标本 /份混样, 并进行室内质控与内照设定,对混合测定的阳性标本,进 行拆分检测; 对混合测定阴性标本作出阴性判定。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆拆分测 定阳性,判定 NAT 阳性,若为阴性则判定 NAT 阴性。
2结果
通过对血清学检测方法的使用,8048 例血液标本进行 2 种酶联免疫法吸附试剂检测,其中,8000 显示 HBsAg 均为 阴性,HBsAg 双试剂阳性标本 25 例,HBsAg 单试阳性的标 本 23 例。8000 例标本中,核酸检测显示阳性 14 例,检测 率为 0. 175%,其中 HBsAb 单独性 2 例、HBcAb 阳性 9 例、 乙肝二对半检测全阴性 3 例。HBsAg 双试剂阳性标本 25 例, 核酸检测结果阳性 22 例,阴性 3 例; HBsAg 单试阳性的标 本 23 例,核酸检测结果显示阴性 21 例,阳性 2 例。
3 讨论
我国为 HBV 感染高流行区,约有 10% 人群为乙型肝炎 病毒携带者,HBsAg 检测为乙型肝炎感染十分常见的指标, 一般临床上使用酶联免疫法进行 HBsAg 检测,能显著降低 输血后感染乙型肝炎病毒风险,但是由于乙型肝炎病毒窗口 期、隐匿性乙型肝炎病毒感染、免疫静默感染等因素存在,导致其存在假阴性漏检情况,若未降低漏检情况,易导致临床 用血安全受到十分严重的影响,造成不良事件发生。因此, 本次研究对探究无偿献血者乙肝病毒核酸检测价值进行分 析,探讨核酸检测的效果 。相比于血清免疫学监测,核酸检测的最显著优势就是 能够缩短病原体检测的窗口期,其检测的灵敏度很高,能 够直接对血液中的病原体进行筛查,可以准确检测出血清 免疫检测不到的隐匿病毒,从而有效提升输血安全。
与传统的 ELISA 检测方法相比,核酸检测具有特异性 与高度敏感性的特点,其主要是针对 HBV、HCV 以及 HIV 的输血传染因子进行筛查,尤其是对 HBV 的筛查检测,正 在逐渐的被广泛的推广使用。根据相关的临床调查研究显 示,对无偿献血者的血液标本进行核酸检测,能够提高患 者的输血安全,减少因输血而产生的病毒传染,同时,对 血液样本进行核酸检测,能 够 有 效 的 缩 短 HCV、HBV 和 HIV 的 ELISA 的窗口期,从而在很大程度上减少输血者血 液病毒传染的危险。
为了进一步明确临床核酸检测意义,提高血液检测结果 可信度,实施一项有效的检测方式十分重要,酶免试剂为常 见检测方式,但是在检测过程中,易导致乙型肝炎漏诊情况 发生,导致严重后果 。在血液 HBV 核酸检测结果阳性标本 中,少部分为灰区或者弱阳性,通过应用核酸检测,能预防窗 口期漏检情况发生,核酸检测为目前最准确和灵敏的检测方 式,其检测原理完全和酶免试剂检测不同,能避免酶免试剂 检测局限性,能减少漏检情况,核酸检测主要检测人体病毒 核酸,对环境和操作者要求较高,对标本的保存要求和处理 要求也较高,能显著提高血液安全性,因此开展核酸检测十 分重要,能保障临床用血安全性 。现如今,乙肝病毒核酸检 测已经成为无偿献血者首选检测方式,在检测中广泛应用。
4结语
综上所述,核算检测可以与血清免疫检测联合应用于 无偿献血者血液安全检查中,能有效提升输血安全,另外, 临床应加强对乙肝病毒感染的筛查和防控。
参考文献
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论文作者:张越
论文发表刊物:《医师在线》2020年4期
论文发表时间:2020/4/7
标签:核酸论文; 乙型肝炎论文; 标本论文; 阳性论文; 病毒论文; 血液论文; 试剂论文; 《医师在线》2020年4期论文;