【摘要】目的：探讨半枝莲多糖季胺碱对食管癌EC9706细胞的抑制作用及可能机制。方法：通过MTT法检测SBPS(3个浓度100、200、300txg,／m1)对食管癌细胞的增殖的作用。结论：SBPS对食管癌细胞的增殖有抑制作用。
【关键词】半枝莲多糖季胺碱；EC9706；协同抗肿瘤作用
【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2016）11-0063-02【Key words】Achyranthes bidentata polysaccharides quaternary amine alkali; EC9706;Anti—tumor cooperation action
河南是食道癌高发区，食管癌死亡率仅次于胃癌，居恶性肿瘤死亡率的第二位，尽管早期食管癌可以通过手术缓解，但大多数患者发现时已是晚期，化疗药物的使用对正常细胞有毒是亟待解决的问题，中药有很大的探讨价值。
1.目的
研究半枝莲多糖SBPS的体外抗肿瘤作用。半枝莲是唇形科植物半枝莲(Scuteuaria barbata D．Don)的干燥全草，又名狭叶韩信草、并头草。半枝莲多糖SPBS平均分子量为10 000kD，糖基的组成为鼠半枝莲在临床治疗癌症中的应用十分广泛，多与白花蛇舌草、半边莲等组成复方配伍用于多种肿瘤的治疗。
2.材料与方法
2.1 主要试剂和仪器
食管癌细胞株EC9706由新乡医学院病理教研室提供；
SBPS粉末由新乡医学院机能实验室提供[1-3]；
醚化剂3-氯-2羟丙基三甲胺氯化物，购自武汉试剂公司。
2.2 半枝莲多糖季胺碱制备：称取SBPS粉末100g，醚化剂4.7g，水133.4g 氢氧化钠2.0g。然后将它们混合放到一个 500ml的圆底烧瓶，置于50℃的水浴中，开动搅拌器进行搅拌， 反应混合物在该温度下保持反应若干个小时。反应结束时把圆底烧瓶的溶液倒入一个500ml烧杯加入20ml去离子水以减少粘度 这时用pHS-3C精密pH计测量反应结束时的pH值用1mol/L HCl 中和至pH 6.5左右，过滤干燥，即可得样品。分析测量含氮量，取代度及反应效率。
2.3 细胞培养
EC9706细胞用含10％胎牛血清、100mg／ml链霉素、100mg／ml青霉素的RPMI 1640培养液培养，放在37℃，5％CO培养箱中培养至对数生长期。
2.4 细胞生长抑制试验MTT
MTT比色法测定细胞增殖抑制率。收集对数生长期细胞接种于96孔板中，调整细胞密度为1×105个?ml-1，每孔100μl。每个剂量设12个平行孔，分别培养12，24和48h，加入5 g?L-1四甲基唑氮蓝20μl，继续培养，4h后，弃培养液，加入DMS0 150μl，完全显色后，采用酶标仪测定各孔490nm(OD)值。按下列公式计算细胞生长抑制率(1nhibition mte，lR)。IR=(对照组OD一实验组OD)／(对照组OD一空白组OD)×100％。
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2.5 统计学处理
应用SPSS 19.0统计软件进行统计学处理。采用单因素方差分析比较各单独处理因素效应。
3.结果
3.1 不同浓度SBPS对EC9706细胞增殖的影响见表l，MTT比色法显示，对照组细胞呈现正常的生长周期，不同浓度的ABPS随着浓度增加与对照组相比较有明显差异。
表l 不同浓度对EC9706细胞增殖的影响（x-±s，n=6）
组别 抑制率
对照组 7.00±3.14
低剂量组（100μg/ml） 20.00±0.23
中剂量组（200μg/ml） 26.79±0.64
高剂量组（300μg/ml） 35.14±0.75
F 31.5
P <0.01
3.结论
半枝莲多糖季胺碱对食管癌细胞的增殖有显著抑制作用。
4.讨论
半枝莲抗肿瘤作用已基本得到肯定，对消化、呼吸、生殖等系统的恶性肿瘤具有较好的抑制作用[4-8]，甚至对某些白血病也有一定的治疗效果。目前我国学者正在对半枝莲多糖抗肿瘤的机制进行深入研究，致力于将它向临床推广。
癌细胞带负电荷，半枝莲多糖季胺碱带正电，半枝莲多糖季胺碱化提高它与癌细胞结合力。半枝莲多糖季胺碱衍生物的实验，为探讨增加它对癌细胞的杀伤力提供了一条可行的路径[9-10]。
【参考文献】
[1]王志远，戴玲，朱业云，等.半枝莲酸性多糖SBPs的纯化、性质及抗氧化活性研究[J].中草药，2009，40 (5):728-731.
[2]袁延强，韩利文，王希敏，等.半枝莲化学成分及抑制血管生成活性的研究[J].中国药学杂志，2012，47(13):1032-1035.
[3]马维坤，仰榴青，吴向阳，等.半枝莲多糖提取工艺及其免疫活性初步研究[J].江苏大学学报(医学版)，2007，17(4):315-3181.
[4]王莹.中药半枝莲的研究探讨[J].临床合理用药，2013，6(10):58.
[5]马欢杰，多糖类抗肿瘤作用研究进展，海峡药学(J).2010，22（2）：102-103.
[6]张兴桃，高贵珍.多糖研究进展[J].宿州学院学报，2005，20(5):85-88.
[7]陈学军，陈鸿清，姚梅坤.药用植物多糖研究进展[J].海峡药学，1999，11(2):3-5.
[8]王统一，赵兵，王玉春.多糖免疫调节和抗肿瘤研究进展[J].过程工程学报，2006，6(4):674-682.
[9]刘霞，谢建新.多糖的药理作用研究[J].农垦医学，2004，26(1)：397-398.
[10]陈艳，中药多糖抗肿瘤机制研究进展[J].药学与临床研究，
论文作者:郭宏昌
论文发表刊物:《心理医生》2016年11期
论文发表时间:2016/9/12
标签：多糖论文; 癌细胞论文; 抑制论文; 细胞论文; 作用论文; 研究进展论文; 食管癌论文; 《心理医生》2016年11期论文;