卢向东[1]2002年在《CHA结合bFGF修复兔骨缺损的实验研究》文中研究表明目的 探讨珊瑚羟基磷灰石(CHA)结合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)修复骨缺损的效果，为其临床、科研应用提供实验依据。方法 以CHA作为bFGF的可吸附性载体，制备成复合人工骨，将其植入兔尺骨中段10mm骨缺损处，以单纯CHA组，自体骨移植组和空白组作为对照，在术后2、4、8、12周，进行大体解剖、X线摄片、病理组织切片、生物力学测试等方法观察，研究各组骨愈合，血管化情况及力学强度。结果 在2、4、8周CHA／bFGF组血管化程度优于自体骨移植、单纯CHA及空白对照组。病理组织切片及X线摄片显示骨缺损修复程度CHA／bFGF组明显优于自体移植骨组优于单纯CHA组，而空白组骨缺损处被纤维组织及肌组织等填充。生物力学测试显示术后12周CHA／bFGF组抗扭转强度明显优山祖『压料大学祠厦士学位论文于自体骨移植组。结论CHA与bFGF结合有明显促进骨缺损修复的作用，强于自体骨移植及单纯CHA移植。成骨方式包括骨传导、骨诱导，二者协同，可用于骨缺损修复。
贾祎佳[2]2011年在《转bFGF基因的组织工程骨修复兔骨缺损的实验研究》文中研究表明目的观察生物活性玻璃结合转碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblast growth factor, bFGF)基因的骨髓基质干细胞构建的组织工程骨修复兔骨缺损的效果,为其临床、科研应用提供实验依据。方法以生物活性玻璃作为转bFGF基因骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell, BMSCs)的可吸附载体,体外构建组织工程骨,将其植入兔桡骨中段10mm骨缺损处,以自体骨移植组、生物活性玻璃/BMSCs组和空白组作为对照,在术后2、4、8、12周,用空气栓塞法处死动物,分别进行大体解剖观察、X线和病理组织学观察(X线观察采用Lane-Sandhu法X线摄片评分标准,病理组织学观察采用Lane-Sandhu法病理组织学评分标准),在手术后12周进行生物力学测试,观察各组骨缺损修复的效果,血管化情况及力学强度。X线观察、病理组织学观察评分结果采用SPSS软件进行析因方差分析,生物力学测试进行多样本均数的方差分析。P<0.05有统计学意义。结果(1)大体解剖观察显示转基因的组织工程骨的骨痂量明显优于对照组。(2)X线观察结果统计学分析示：处理组与时间组的主效应均具有统计学意义(P<0.05),处理组和时间组的交互效应没有统计学意义。(P>0.05)。这说明转基因的组织工程骨的骨痂形成量、宿主骨与移植骨的界面成骨量等均优于其它个组,自体骨移植组次之,空白对照组最差。(3)组织学观察结果统计学分析示：处理组与时间组的主效应均具有统计学意义(P<0.05),处理组和时间组的交互效应没有统计学意义。(P>0.05)。这说明转基因的组织工程骨的新生骨形成,新生血管的形成等均优于其它各组,自体骨移植组次之,空白对照组最差。(4)3组生物力学测试结果显示转基因的组织工程骨的最大扭矩差异具有统计学意义(P<0.05),进一步行两两比较的q检验,结果说明转基因的组织工程骨植入12周时,抗扭转强度明显优于自体移植骨,而与正常骨骼近似。结论转bFGF基因的组织工程骨具有(1)、具有生物相容性好,机械强度适宜、来源丰富的特点。(2)、具备骨形成、骨传导和骨诱导叁重作用(3)、治疗骨缺损尤其是血运不佳的骨缺损,具有一定的临床使用价值。
鲁红[3]2002年在《应用组织工程方法促进牙周组织再生的实验研究》文中进行了进一步梳理牙周组织缺损最理想的愈合方式是达到牙槽骨、牙骨质和牙周膜的完全功能性再生，而牙周组织再生的基础是牙周膜细胞(PDLCs)，PDLCs是牙周炎治疗后形成牙周新附着的主要细胞来源，但在牙周病损部位，PDLCs的来源非常有限，以致牙周组织很难达到有效地再生和重建，而组织工程技术有望解决这一难题。组织工程学是近年来发展起来的一门新学科，其基本方法是将体外培养的高浓度的功能相关的活细胞种植到具有一定空间结构的叁维支架上，再将此细胞支架复合物植入体内或在体外继续培养，通过细胞之间的相互粘附、生长繁殖分泌细胞外基质，从而形成具有一定结构和功能的组织或器官，以达到修复创伤和重建功能的目的。现代广义的组织工程学已包括种子细胞／支架材料、生长因子／支架材料和种子细胞／生长因子／支架材料叁种构建方式。为初步探讨组织工程技术在牙周领域的应用潜能，本实验在对重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)促牙周组织再生的细胞学机理进行研究的基础上，首次应用前两种构建方式的组织工程技术，对非细胞型和细胞型牙周组织工程进行了研究，以探索在体外及动物模型上应用组织工程学手段促进牙周组织再生的技术和方法，为牙周疾病的治疗提供新的思路和途径，为组织工程在牙周疾病治疗方面的应用奠定实验基础。本研究分为以下叁部分： 一、rhBMP-2和rh-bFGF的细胞学基础研究 1．应用MTT比色法和流式细胞仪(FCM)分析技术，检测了rhBMP-2和rh-bFGF单独或联合作用对人PDLCs增殖、DNA合成及细胞周期的影响，以进一步观察分析rhBMP-2和rh-bFGF促人PDLCs增殖的作用及其可能作用机理。结果表明：rhBMP-2和rh-bFGF单独应用均可促进人PDLCs增殖和DNA合成，两者联合应用具有协同作用。rhBMP-2和rh-bFGF的促增殖作用呈剂量依赖性，且rhBMP-2对人PDLCs促增殖作用不如rh-bFGF。而经rhBMP-2和 第四军医大学博士学位论文．4． fhbFGF作用后，人 PDLCS细胞周期的q％（DN合成前期细胞所占百分比） 降低，而S％＊＊A合成期细胞所占百分比）升高，反映细胞增殖活力的增殖指 数h值（包括DNA合成期侣），DNA合成后期闷力和有丝分裂期则）的细胞所 占百分比，即侣十GZM）％）也明显升高，提示 hBMP2和山七FGF促人 PDLCS 增殖的作用可能是通过促使静止态的Q期细胞活跃进入S期而实现的。 2．采用考马斯亮蓝法检测rhBMPZ和山七FGF作用后人PDLCs总蛋白含 量的变化，并通过透射电镜观察这两种因子作用下人PDLCS超微结构的改变， 以进一步探讨rhBMP－2和山七FGF对人PDLCs蛋白合成和分泌功能的影响。 结果表明：hBMP－2单独应用时可显着提高人PDLCs的总蛋白含量，在25～ 100pg／L浓度范围内呈浓度依赖性，而rhbFGF表现为降低人PDLCs的总蛋白 含量，但至第7天这种作用趋于缓和。两者联合应用时自第5天起仍表现为提 高人 PDLCs的总蛋白含量。透射电镜观察可见 rhBMP－2作用后人 PDLCs DNA 合成和蛋白合成、分泌功能加强，而rhbFGF作用后PDLCs DNA合成活跃， 而蛋白合成相关细胞器未见明显变化，提示rhBMPZ可促进PDLCs的DNA合 成、蛋白合成和分泌，而rhbFGF促进PDLCs的DNA合成，但可能抑制其外 输性蛋白质的合成和分泌。 3．应用Western斑点杂交方法检测rhBMP－2和山七FGF作用后人PDLCs 中 OCN、OPN和 BSP mRNA的表达情况，以进一步探讨rhBMP．2和山七FGF 对人PDLCs分化功能的影响。结果表明：rhBMP－2可促进人PDLCS中OCN、 OPN、BSP mRNA的表达，而 rh七FGF不影响人 PDLCs中 OCN、OPN、BSP ITu：＼xA的表达，两者联合应用时山－bFGF对rhBMPZ的促OCN、OPN、BSP Ilin－guA表达的作用也无影响。提示AnMPZ可能通过促进人PDLCS矿化相关 蛋白的表达而促进人PDLCS的分化。 二、rhBMP毛和山1FGF应用于牙周组织工程的实验研究 l．将rtl．－－MP上和rh七FGF与nHAC复合后植入动物体内修复牙周缺损， 通过组织学观察和测量分析和评价非细胞型组织工程技术对牙周组织再生的作 第四军医大学博士学位论文．5． 用。结 果 表 明：rtl．－－MPZ／nHAC／膜 组、rhbFGF／nHAC／膜组 和 nMP士／山七FGF／nHAC／膜组均较空白对照组和单纯GTR组有更多的新生牙槽 骨、新生牙周膜和新生牙骨质生成，且均未见上皮长入，提示应用生长因子／ 支架材料构建方式的组织工程方法可有效地促进牙周组织再生和重建。 2．应用免疫组化方法对上述各实验组再生的牙周组织中BSP、OPN及 ON的表达进行了比较，以观察分析不同实验组促牙周组织再生作用h不同。 结果表明：各实验组新生牙周组织中BSP、OPN、ON的表达量均较空白对照 组和单?
马雷[4]2010年在《bFGF基因修饰的MSCs细胞复合β-磷酸叁钙修复骨缺损实验研究》文中认为目的：骨缺损畸形是颌面外科、骨科、整形外科临床常见病。颌骨缺损的修复问题一直是口腔颌面外科较难解决的问题,现常规的修复方法很多,但各有其优缺点。组织工程化骨是利用生物组织工程技术将种子细胞与支架材料复合,形成具有与自体骨结构功能相似的骨组织,它弥补了多种单一植骨材料的缺陷,结合了它们各自的优点,具有组织相容性好、骨诱导能力强、取材方便、可快速修复缺损等特性。用组织工程方法构建种子细胞、支架材料和生长因子复合的生物活性人工骨被认为是未来进行骨缺损修复和骨再造最有效的方法之一。通过人碱性成纤维生长因子(basic fibroblant growth factor, bFGF)转染以增加组织细胞bFGF的分泌量,提高bFGF蛋白在生物体骨缺损局部组织中的浓度,达到促进骨愈合的目的。但是,如何提高质粒对于靶组织的转染效率、寻求一种高效、简便的转染手段,如何缩短鉴定转染是否成功的时间,以及在基因转染促进骨愈合的过程中,一直未得到很好的阐明。本研究目的包括以下几个方面：1)建立稳定的、基因序列正确的、检测方便的、和GFP-慢病毒载体,并检测转染293-FT细胞的效率及转染后的生物学活性；2)获得骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells, BMSCs),bFGF-慢病毒载体转染诱导第3代的犬BMSCs,了解该质粒转染犬骨髓间充质干细胞的效率及转染后的生物学活性；3)体内观察对比bFGF基因修饰rMSCs细胞活性的影响以及诱导异位成骨的情况,为构建更优化的骨组织工程种子细胞和组织工程化骨提供重要的实验基础。方法：1)bFGF基因真核表达载体的构建设计人bFGF基因引物,用Trizol法提取胎盘组织总RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法扩增bFGF基因,连接至ViraPowerTM慢病毒载体系统,经Xho-Ⅰ, BamH-Ⅰ双酶切和测序并与Genebank中序列进行比较分析。2)bFGF基因遗传修饰的犬骨髓间充质干细胞的建立：①结合Percoll分离液密度梯度离心和差速贴壁传代筛选法相,分离培养犬骨髓间充质干细胞。②在脂质体转染剂Lipofectamine2000的介导下,bFGF-pLenti6/V5-D-TOPO表达质粒同包装质粒pLP1、pLP2、包膜质粒pLP/VSVG共转染293FT细胞株,收集bFGF-慢病毒上清转染诱导后第3代的犬BMSCs, Blasticidin压力筛选稳定表达株。③设计GFP基因引物,以GFP-PMSLV-Plazmid为—1—模板,采用PCR的方法扩增GFP基因,连接至pLenti6/V5-D-TOPO(?)表达质粒,GFP-慢病毒载体的构建及转染BMSCs过程同bFGF-慢病毒。RT-PCR方法检测bFGF mRNA水平的表达。④RT-PCR检测转染组细胞中目的基因mRNA表达情况,Western blot,细胞免疫化学检测各转染组细胞胞浆中目的蛋白表达情况；ELISA检测各各转染组细胞培养上清中目的蛋白的分泌情况。3)bFGF基因转染的rMSCs成骨活性的体内实验研究实验共分为4组进行：A、对照组(空白组)；B、p-磷酸叁钙组；C、MSCs细胞复合β-磷酸叁钙组；D、bFGF基因修饰rMSCs+β-磷酸叁钙组；①在体外分别将rMSCs和bFGF基因修饰rMSCs接种于多孔支架材料磷酸叁钙上。②将不同组细胞／材料复合物植入犬牙槽骨内。③每组分别于植入3月后取材,石蜡包埋,组织病理学切片,HE染色分析新骨形成情况；④术后4、8和12周进行X光片、4、8周CT摄片观察骨缺损变化、骨皮质及β-磷酸叁钙降解情况。结果：1)RT-PCR自脑组织cDNA库中扩增出bFGF基因；成功将bFGF基因克隆入真核表达载体,构建了bFGF-pLenti6/V5-D-TOPO表达质粒,DNA测序证明,所克隆目的基因序列与Genebank收录一致。2)bFGF真核表达质粒转染了犬骨髓间充质干细胞后,经抗生素Blasticidin压力筛选获得了具有抗性的细胞克隆；GFP真核表达质粒转染了犬骨髓间充质干细胞48小时后,倒置荧光显微镜下显示转染后的犬骨髓间充质干细胞内可见绿色荧光蛋白分布于整个细胞,呈胞浆分布。培养第八代,转染的细胞依然存活,绿色荧光蛋白持续表达；RT-PCR结果显示抗性细胞克隆中均有大量目的基因bFGFmRNA转录,ELISA检测培养上清中目的蛋白表达阳性,Western blot结果显示胞浆中有目的蛋白的表达。3)犬牙槽骨缺损异位诱导成骨实验显示：基因修饰MSCs组与单纯MSCs对照组相比,材料降解和替代的速度明显提高,有较多的新骨形成；实验动物牙槽骨骨缺损愈合过程的X线4周、8周、12周观察显示及4、12周的CT扫描,bFGF基因修饰rMSCs+β-磷酸叁钙组骨缺损在骨皮质的连续性、p-磷酸叁钙的降解速度及骨缺损愈合的大小优于MSCs细胞复合p-磷酸叁钙组,p-磷酸叁钙组明显优于对照组,bFGF修饰的MSCs组在各阶段均有比其他组更明显的材料替换速度。结论：1)成功构建了携带人bFGF和GFP基因的真核表达载体。2)含有人bFGF基因序列可以通过脂质体介导有效地导入犬MSCs中并得到表达。3)人bFGF基因对犬骨髓间充质干细胞修饰转染并能在骨髓间充质干细胞中翻译、表达产生bFGF基因。4)bFGF能够启动或诱导MSCs成骨方向分化和能够促进新生血管形成,对rMSCs进行修饰后,能够在犬牙槽骨内有效地促进异位骨的形成。
孙明学[5]2001年在《强化赋形骨基质在修复骨缺损及骨组织工程中的实验研究》文中认为脱钙骨基质（Demineralized bone matrix，DBM）在临床应用中存在 生物活性低、成骨能力弱、机械强度低、使用操作不方便等缺陷。研究 为临床修复骨缺损及促进骨愈合提供生物活性高，具有一定形状及力学 强度，使用安全、方便，适应征广，运输及储存方便的系列天然植骨材 料，乃本文之最终目的。为此，本文分叁部分研究赋以不同剂型的脱钙 骨基质制剂（板块状、海绵状、牙膏状）在骨缺损修复中的作用。 实验一 骨蛋白强化脱钙骨基质板块修复节段性骨缺损的实验研究 目的 研究骨蛋白强化的DBM（bone protein，BP，BP／DBM）对骨 髓干细胞生物学的影响及BP／DBM板块在修复犬桡骨骨缺损中的作用， 探讨BP/DBM板块状制剂修复负重区骨缺损的可行性。方法 （1）将 BP／DBM，DBM，IDBM在DMEM中的浸出液用于第五代骨髓干细胞的培 养，观察细胞生物学的变化。（2）将BP／DBM植入兔皮下观察异位诱导 成骨。（3）在犬双侧桡骨中段各做一15cm的骨膜骨缺损，分别植入板 块状BP/DBM，DBM，自体髂骨块及留置空白，以钢板螺钉内固定，每组 各5个缺损，观察时间为4个月。结果 （1）BP／DBM浸出液培养组细 胞生长曲线一直高于其他叁组，MTT结果显示细胞相对增殖率在72h时 为109 2％，明显高于DBM组、IDBM组和DMEM组（P＜0 05)，BP/DBM 浸出液培养组细胞呈簇状生长，细胞梭形。（2）BP/DBM植入兔皮下6周 能诱导异位骨形成，成骨活性强。（3）术后4个月体内实验显示BP/DBM 植入组在骨愈合、骨形成、生物力学方面均明显高于对照组。①板块状 3 博士学位论文 军医进修学院 BPoBM植入组有3例完全骨愈合臼乃人 自体骨移植组只有3例达到 部分骨愈合，单纯DBM组及空白组未见骨愈合。②生物力学测试表明 术后4个月板块状BP／DBM植入组新生骨抗压缩力学强度值己达到正常 挠骨组织的48％，而自体骼骨移植组仅为正常挠骨组织的36％。③实验 组新生骨为成熟的板状骨，新生骨骨单位完整，可见与骨长轴一致的中 央管及连接中央管之间的穿通管，而其余叁组则末见发达的骨单位。结 论门）自体骨只具备传导成骨能力，无诱导成骨及刺激骨膜成骨作用； （2）单纯DBM诱导成骨能力低弱，对骨膜无明显刺激成骨作用；（） BP＊BM板块具有诱导成骨及传导成骨能力及一定的生物力学强度，同 时能刺激邻近骨膜反应成骨，促进骨缺损的修复，能够单独修复骨缺损， 其成骨能力及骨愈合率高于自体骨移植，可单独用于负重部位骨缺损的 修复，促进骨愈合。
宋会平[6]2003年在《组织工程学人工骨移植修复骨缺损的实验研究——RhIGF-I/CHA/ARBM重组合人工骨移植修复节段性骨缺损》文中研究说明目的：探讨以重组合人胰岛素样生长因子-1(rhIGF-Ⅰ)／珊瑚羟基磷灰石(CHA)／自体红骨髓(ARBM)叁者复合构建初步的组织工程学人工骨修复骨缺损的能力及其作为人工骨移植替代材料的可行性，并初步观察外源性IGF-Ⅰ对骨生长修复的干预效应。方法：45只家兔制双侧桡骨干10mm全层缺损的动物模型，分六组，A组(rhIGF-Ⅰ／CHA／ARBM)，B组(CHA／ARBM)，C组(rhIGF-Ⅰ／CHA)，D组(CHA)，E组(自体皮质骨)，F组(缺损旷置)，各15侧，分别于移植后2、4、8、12周时通过X线及X线片计算机图像分析、组织学观察及评分、抗弯生物力学测试(12周)、放射性同位素骨显像检测(12周)，以E、F组作为对照组比较分析各组移植修复骨缺损的能力。结果：1)rhIGF-Ⅰ／CHA／ARBM移植12周时可完全修复骨缺损，各时段放射学评估优于其他各组，差异有显着性意义(P＜0.05)，组织学、生物力学、核医学综合评价与自体骨移植差异无显着性意义(P＞0.05)；2)rhIGF-Ⅰ／CHA、CHA移植后各观察时段评价差异无显着性意义(P＞0.05)，12周时修复效果显着差于A、B和E组(P＜0.05)；F组12周缺损不能修复。结论：rhIGF-Ⅰ／CHA／ARBM具有较强的协同成骨能力，可替代自体骨移植，成为新型的组织工程学人工骨；在本实验条件下，单独外源性IGF-Ⅰ附壁难以显着促进CHA的成骨效果，其干预骨愈合效应尚待于进一步研究。
李毅[7]2006年在《不同基因修饰的骨髓间充质干细胞生物学特性及诱导新骨形成能力的研究》文中研究表明研究背景骨缺损是指由于外伤、感染、肿瘤切除等因素造成骨质丧失,从而在骨组织中形成间隙。较小范围的骨缺损可以由机体自身的再生得到修复,而较大间隙的骨缺损则由于成骨细胞难以越过而不能正常愈合,若不采用适当治疗则最终仅由纤维组织充填,形成骨不连。有研究表明,当长骨骨干缺损长度超过其直径的1.5～2.5倍时,机体便难以自行愈合,因而造成永久性骨不连。骨缺损的病人在骨科患者中占有很高的比例,大约有10～15%的病人需要进行骨移植治疗。在美国,每年涉及骨移植的病例已超过100万,而在我国这样一个人口众多的发展中国家,需要进行骨移植治疗的病例数目巨大更是不言而喻的,并且随着社会的发展,交通事故的增多,骨缺损病人数目更是在不断地逐年攀升,现今已经发展成为严重威胁人们生活质量的主要病症之一。目前,主要应用于临床骨缺损修复的方法有自体骨移植和异体骨移植等,但自体骨移植存在材料来源有限、供骨部位的损伤以及塑形困难等问题;异体骨移植也有潜在的疾病传播隐患以及移植排斥反应等严重后果,因此无论自体骨移植还是异体骨移植均无法完全满足需求,临床急需寻找一种安全有效的骨移植替代材料。近年来随着组织工程化人工骨的诞生,骨移植治疗中材料短缺的问题将有望得到成功的解决。组织工程骨是由可吸收的支架材料、种子细胞和/或成骨促进因子构成的。近年来,将细胞与特定支架材料联合培养,形成具有生命的活性组织工程化复合材料用于修复骨缺损已经取得了初步成效,但毫无疑问,如何构建更理想的组织工程化人工骨仍旧是一个值得被重视的热点。
徐松柏[8]2005年在《应用转基因技术构建人工颅骨的实验研究》文中研究表明本实验针对目前临床常见的颅骨缺损修补材料的诸多弊端,将组织工程技术与局部基因治疗有机结合,构建了一种新型的、生存能力更强的转基因组织工程化骨。本实验采用经体外VEGF 基因转染的兔骨髓间充质干细胞(MSCs)与成骨诱导后的MSCs的混合细胞为种子细胞,将其与细胞外基质网架CPC复合,于体外构建组织工程化人工颅骨,并进一步应用此组织工程化颅骨进行体内异位成骨实验及颅骨缺损模型原位移植修复实验,同时与单纯应用成骨诱导的MSCs 为种子细胞的组织工程骨进行对照研究。通过多项指标的观察检测,探讨了VEGF 转染对MSCs 在体外与CPC 的粘附、生长规律的作用;摸索基因转染的MSCs 在体外的选择与扩增条件以及这些细胞与生物支架所形成的组织工程化骨在体内的异位成骨能力;对转基因技术在颅骨组织工程血管化方面的应用进行了初步探讨。实验结果显示,转基因组织工程化骨显示出优越的原位及异位成骨能力。也说明了VEGF 转基因MSCs 与CPC 具有很好的细胞相容性。因此,VEGF 转基因MSCs 可以作为骨组织工程中的种子细胞,其与磷酸钙水泥CPC 的组织工程化人工骨,是一类极具应用前景的骨缺损修复材料。
王玲玲[9]2011年在《应用骨髓基质细胞片层构建组织工程骨的实验研究》文中研究指明目的探讨犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)细胞片层在构建组织工程骨中的作用。方法制备犬同种异体脱钙骨基质(dermineralized bone matrix, DBM)。将人重组骨形态发生蛋白-2(recombination human bone morphogenetic protein-2, rhBMP-2)复合到DBM上。抽取犬髂骨骨髓,采用密度梯度离心法分离犬骨髓基质细胞(BMSCs),将其向成骨细胞诱导分化。将经成骨诱导的第3代细胞接种于温度反应性培养皿中培养,至细胞增殖并互相融合时,将培养箱温度降至20℃,制备完整的BMSCs细胞片层,将其包裹DBM/rhBMP-2/BMSCs复合体植入犬左侧背阔肌下包裹胸背动静脉束为实验侧,以无BMSCs细胞片层包裹的DBM/rhBMP-2/BMSCs复合体植入犬右侧背阔肌下包裹胸背动静脉束为对照侧。术后8、12、16周取材行大体观察、影像学观察及组织学观察,评价成骨情况。采用SPSS18.0统计软件对数据进行两样本均数差别的t检验。结果1.制备的BMSCs细胞片层完整致密,在支架复合体表面生长良好。2.成骨面积实验侧>对照侧,两者之间差异有显着性(P<0.05)。术后16周,实验侧有大量板层骨形成,有哈弗氏系统形成,骨髓腔内有红骨髓；对照侧有板层骨形成,无哈弗氏系统形成,骨髓腔内无红骨髓。结论BMSCs细胞片层可促进具有致密板层骨和哈弗氏系统的组织工程骨的形成。
陈歌[10]2003年在《钙磷骨水泥与异体复合脱蛋白骨关节移植的实验研究》文中认为目的：通过对钙磷骨水泥与异体复合脱蛋白骨关节移植的成骨和成软骨能力、免疫反应以及血供重建的研究，探讨其在治疗骨与关节缺损中的可行性，为研制出一种能与受体愈合，并存活的生物假体提供实验及理论依据。方法：取新鲜新西兰大白兔股骨下段（15mm）制作成脱蛋白骨关节,并将人重组骨形态发生蛋白（rhBMP）、人重组肿瘤坏死因子α（rhTNFα）分别与脱蛋白骨关节和钙磷骨水泥进行复合。手术造成兔股骨下段15mm骨与关节缺损实验模型，将动物随机分成叁组： A组 将复合有rhBMP 和rhTNFα的钙磷骨水泥在异体复合脱蛋白骨关节表面涂层和髓腔内填塞后，置换一侧股骨下端；B组 无钙磷骨水泥的异体复合脱蛋白骨关节股骨下端移植；C组 单纯异体脱蛋白骨关节股骨下端移植（对照组）。植入后4、8、12、16周分别行组织学电镜检查以及X线摄片，并于第16周行股动脉血管造影，了解局部血供重建情况。结果：A、B组在移植后第4周即可观察到大量新生血管出现，网织状骨形成，第8周时网织状骨及软骨细胞团明显增多，并有板层骨形成。至第12~16周时，复合脱蛋白骨关节完全存活，断端愈合，大量板层状骨组织交织成网状，同时在远端关节面附近还可见较多增生成熟的软骨细胞团。光镜下各时期的成骨面积A、B组均大于C组。此外，自第12周开始，A、B组脱蛋白骨开始出现“爬行替代”现象，而对照组无或极少有脱蛋白骨替代发生。在A组，我们还观察到脱蛋<WP=6>白骨周围纤维包裹厚度要明显低于B和C组（P<0.01），术后感染发生率也低于后两组。第16周股动脉血管造影结果表明，在A、B组植入区有大量增生的血管影像，并可见有部分血管长入脱蛋白骨材料内，而C组血管数量明显较少。结论：DPB/rhBMP/rhTNFα复合脱蛋白骨关节具有良好的成骨和成软骨能力，在体内能促进脱蛋白骨关节的血供重建、骨愈合和替代。若加用复合钙磷骨水泥进行表面涂层和髓腔内填塞后，在早期有可能进一步降低局部免疫炎症反应。
参考文献：
[1]. CHA结合bFGF修复兔骨缺损的实验研究[D]. 卢向东. 山西医科大学. 2002
[2]. 转bFGF基因的组织工程骨修复兔骨缺损的实验研究[D]. 贾祎佳. 山西医科大学. 2011
[3]. 应用组织工程方法促进牙周组织再生的实验研究[D]. 鲁红. 第四军医大学. 2002
[4]. bFGF基因修饰的MSCs细胞复合β-磷酸叁钙修复骨缺损实验研究[D]. 马雷. 新疆医科大学. 2010
[5]. 强化赋形骨基质在修复骨缺损及骨组织工程中的实验研究[D]. 孙明学. 军医进修学院. 2001
[6]. 组织工程学人工骨移植修复骨缺损的实验研究——RhIGF-I/CHA/ARBM重组合人工骨移植修复节段性骨缺损[D]. 宋会平. 山西医科大学. 2003
[7]. 不同基因修饰的骨髓间充质干细胞生物学特性及诱导新骨形成能力的研究[D]. 李毅. 四川大学. 2006
[8]. 应用转基因技术构建人工颅骨的实验研究[D]. 徐松柏. 吉林大学. 2005
[9]. 应用骨髓基质细胞片层构建组织工程骨的实验研究[D]. 王玲玲. 青岛大学. 2011
[10]. 钙磷骨水泥与异体复合脱蛋白骨关节移植的实验研究[D]. 陈歌. 重庆医科大学. 2003