广东省清远市佛冈县人民医院 广东佛冈 511600
【摘 要】目的：探究早发型重度子痫前期孕妇胎盘组织中差异表达基因。方法：选取2014年1月-2014年12月期间我院接受治疗的7例胎膜早破的早产孕妇作为对照组，选取同期7例早发型重度子痫前期孕妇作为观察组。采用生物学通路分析法和基因本体（GO）功能注释分析法对差异表达基因进行分析和功能注释，并对与氧化应激相关的基因表达进行检测。结果：观察组中有大量参与氧化应激反应的基因，包括FLT1、LEP、CYP11A1、SH3PXD2A、SEPP1和TFRC，与对照组比较有显著的差异表达。其中LEP基因的表达上调与对照组比较差异表达倍数为61.5倍。结论：早发型重度子痫前期孕妇与健康孕妇相比较胎盘组织中存在差异表达基因，这些差异表达基因与早发型重度子痫前期的发生有密切的关系。
【关键词】早发型重度子痫前期；胎盘组织；差异表达基因
胎盘组织是对子痫前期发病机制进行研究的重要靶器官，对子痫前期病理过程有重要作用。临床上常用基因芯片检测技术对生物学通路和疾病相关基因进行检测，因而许多研究者对子痫前期孕妇的胎盘外周血基因表达谱和胎盘基因表达谱进行基因表达谱芯片检测，但是由于妊娠周数、种族差异、操作步骤不同和基因芯片检测平台差异等造成诸位研究者的结论有一定差异[1]。因此本文对早发型重度子痫前期孕妇胎盘组织中差异表达基因进行了研究。现报告如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
选取2014年1月-2014年12月期间我院接受治疗的7例胎膜早破的早产孕妇作为对照组，选取同期7例早发型重度子痫前期孕妇作为观察组。观察组：男3例，女4例；年龄20~43岁，平均年龄29.4±3.5岁。对照组：男5例，女2例；年龄21~44岁，平均年龄30.2±3.7岁。比较两组性别、年龄，差异无显著性（P＞0.05），可比性高。
1.2方法
（1）采集标本：胎盘娩出后，立即将接近脐带附着处的胎盘中央小叶母体面的胎盘组织剪出约0.2-0.5cm3，并使用生理盐水将残余的血液充分洗涤，将组织保存在RNA稳定溶液中放置-20℃的冰箱中冷藏。（2）提取、质检、扩增和标记胎盘组织总RNA：采取美国Life Technologies公司生产的TRIzol试剂将胎盘组织中的总RNA提取出来，然后使用ND-2000分光光度仪对RNA进行定量检测，然后采用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳对RNA的质量进行检测，并采用扩增试剂盒将cRNA合成为模板，并以Klenow片段酶标记DNA。（3）基因芯片的杂交、清洗和扫描：采用Agilent平台的基因微阵列技术对基因表达谱进行杂交、清洗和扫描，进而得到基因芯片杂交图。（4）数据分析：采用生物学通路富集分析法和基因本体（gene ontology，GO）功能注释分析法对差异表达基因进行功能注释和分析。
2 结果
2.1 参与氧化应激的差异表达基因的GO功能注释分析结果
研究结果显示，观察组中有大量参与氧化应激反应的基因，包括FLT1、LEP、CYP11A1、SH3PXD2A、SEPP1和TFRC，与对照组比较有显著的差异表达。其中LEP基因的表达上调与对照组比较差异表达倍数为61.5倍。见表1。
3 讨论
子痫前期是常见的妊娠期并发症，根据子痫的发病时间将患者分为早发型子痫和晚发型子痫，孕妇孕周不超过34周为早发型子痫，孕周超过34周围晚发型子痫[2]。根据子痫前期孕妇的临床表现可以将患者分为重度子痫和轻度子痫[3]。在四种类型的子痫孕妇中早发型重度子痫前期孕妇的病情最为严重，孕妇和婴儿的预后情况较差，且容易发生胎盘异常。本文研究结果显示，观察组中有大量参与氧化应激反应的基因，包括FLT1、LEP、CYP11A1、SH3PXD2A、SEPP1和TFRC，与对照组比较有显著的差异表达。其中LEP基因的表达上调与对照组比较差异表达倍数为61.5倍。LEP主要存在于胎盘组织和脂肪中，能够对瘦索信号通路和滋养细胞进行活化，进而促进胎盘细胞的抗凋亡和生长作用[4]。但是关于LEP基因作用的研究并没有明确的结果，需要进一步进行研究。但是由于本文仅选取了孕周为30周左右的孕妇作为研究对象，因而得到的基因表达谱并不能反映子痫前期发病过程中全部基因的表达状态，不能够以基因水平的方式将子痫前期如何发生和起始的过程表现出来。
综上所述，早发型重度子痫前期孕妇与健康孕妇相比较胎盘组织中存在差异表达基因，这些差异表达基因与氧化应激反应、免疫反应和炎症反应等病理机制有关，并与早发型重度子痫前期的发生有密切的关系。
参考文献：
[1]颜建英，徐霞.孕妇血清游离脂肪酸水平及胎盘线粒体氧化应激损伤程度变化与子痫前期发病的关系[J].中华妇产科杂志，2012，47（6）：412-417.
[2]王雪梅，瓮占平，王金会，等.早发型重度子痫前期病人胎盘组织中TRPV6表达[J].青岛大学医学院学报，2012，48（5）：435-436.
[3]沈晶，杨淑莉，靖丽娟，等.胎盘基底板中玻连蛋白的表达及其与重度子痫前期发病的关系[J].中华妇产科杂志，2013，48（3）：171-176.
[4]姚锋祥，汤彪，黄引平，等.胎盘11β-HSD2表达与皮质醇代谢水平的关系及其对子痫前期的相关性研究[J].中国妇幼保健，2013，28（8）：1336-1339.
作者简介：
桂净芳（1984.8——），女，壮族，就职于广东省清远市佛冈县人民医院，本科，住院医师，研究方向：早发型重度子痫前期
论文作者:桂净芳
论文发表刊物:《航空军医》2015年17期
论文发表时间:2016/4/22
标签：胎盘论文; 基因论文; 孕妇论文; 差异论文; 早发论文; 组织论文; 对照组论文; 《航空军医》2015年17期论文;