湖南省怀化市中医院 检验科 418000
【摘 要】目的 研究阴道细菌检验采用3种不同的检验方案进行阴道细菌检测，分析其检验的效果。方法 2013年1月份—2014年1月份我院妇科门诊收取的403例患者为研究对象，给予所有患者细菌培养法和PCR检验法以及革兰染色法3种不同的检验方案对患者的阴道细菌进行检测，分析对比3种检验的检测的效果。结果 根据对比3种检验方案检出率结果显示：革兰染色法检出率41（10.17%），高于PCR检验法检出率35（8.68%）和细菌培养法检出率13（3.22%），3种检验方案检出率具有统计学意义P＜0.05；通过表1显示共检出41例细菌携带者，对这41例患者通过3种检验方案检验，对比其阳性检出率结果显示：PCR检验法阳性检出率20（48.78%），明显高于革兰染色法阳性检出率17（41.46%）和细菌培养法阳性检出率12（29.26%），3种检验方案检出阳性率具有统计学意义P＜0.05。结论 PCR检验法具有操作简单、检出结果准确率高、检验用时短等众多优点，值得临床推广和应用。
【关键词】细菌培养法；PCR检验法；革兰染色法；阴道细菌；检验
妇科中大多数疾病，起初原因都是阴道瘙痒、异味还有一些症状（细菌感染初期）患者在生活中不易察觉，在正常的情况中，女性阴道有一定的自净能力，但是患者机体免疫力下降时，这种自净能力减低，固增加了患者发生如阴道炎、盆腔炎等发生率[1]。霉菌性阴道炎一直是困扰女性身体健康以及生活的质量水平，对其检测可以帮助医生充分了解细菌的种类，为临床治疗提供准确的依据。近些年来，检验技术水平的不断提高，检验的方法也越来越多，但检验的效果确层次不齐，严重影响临床治疗的效果，为了研究哪一种方法检验的效果准确率高、安全、可靠，我院特选择妇科门诊收取的403例患者为研究对象，给予3种不同的检验方案对患者的阴道细菌进行检测，分析对比3种检验的检测的效果，整理材料如下：
1资料与方法
1.1一般资料
选取2013年1月份—2014年1月份我院妇科门诊收取的403例患者，年龄21—50岁，平均年龄（29.1±4.5）岁；所有患者临床症状表现为阴道瘙痒、不适、异味以及分泌物过多等；所有患者排除影响检验结果的疾病、近期阴道用药、月经期、妊娠期等。
1.2检验方案
1.2.1收集分泌物
（1）所有患者取截石位；（2）利用无菌的阴道镜将患者的宫颈完全显露出；（3）使用无菌的棉签在患者阴道穹窿处，收集适量的分泌物；（4）将收集的分泌物放入无菌的生理盐水试管中；（5）采用细菌培养法和PCR检验法以及革兰染色法3种不同的检验方案，对其检验。
1.2.2细菌培养法[2]
（1）将生理盐水中的分泌物取出，放入细菌培养液中；（2）将培养液放入二氧化碳培养箱中进行培养，温度严格控制在35oC左右；（3）2d后，选择半透明和灰色并且光滑水滴状的菌类，送往检验科进行检验；（4）检验的过程严格按照《生化标准》中的执行。
1.2. 3 PCR检验法[3]
（1）将分泌物放如生理盐水中（500ml），进行离心处理，转速（12000/min），时间10min；（2）离心后清除分离液表面的清液，加入碱性裂解液；（3）对其加热，温度严格控制在98oC，加热时间10min；（4）二次离心，转速（12000/min），时间5min；（5）应用PCR试剂将清液在DNA模版进行设计或分析；（6）阴性检验分析：未应用PCR试剂前，阳性检验分析：应用PCR试剂后；（7）当PCR产物检查时和PCR扩增时，需要将25uL无菌离子从水中水取出后，再用30u无菌液状的石蜡，将表面盖住；（8）PCR循环，共32环。
1.2.4革兰染色法
（1）玻片放入乙醇（95%）中浸泡；（2）浸泡后取出，晾干；（3）将分泌物取出，均匀的涂抹玻片上；（4）采用显微镜进行检验观察。
1.3检验指标判断标准
对比3种检验方案的检出率以及阴道霉菌检验的情况。
1.4统计学方法
本文研究所得数据资料采用SPSS16.0统计学软件进行处理分析，组间对比采用%表示，实施t检验；计数资料使用χ2检验。以P＜0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1 对比3种检验方案检出率
根据对比3种检验方案检出率结果显示：革兰染色法检出率41（10.17%），高于PCR检验法检出率35（8.68%）和细菌培养法检出率13（3.22%），3种检验方案检出率具有统计学意义P＜0.05，见表1。
3讨论
随着社会发展的不断进步，各种污染（大气、水质、环境）也日益恶化，导致国人因各种污染环境细菌感染的人数逐年递增，引发发生女性阴道炎的因素很多，比如生活作息不规律、工作压力较大和内分泌失调以及不注意个人卫生等不良习惯[4]。在病理学中指出，女性阴道内皮细胞因为阴道的环境忽然变化导致其表面的糖原被细菌侵入或侵蚀，引发女性患者阴道各种有益菌和有害菌比例严重失调和酸碱度的变化，导致患者阴道内有益的细菌减少而有害的细菌大量滋生，最终导致患者发生阴道炎[5]。本次研究中3种检验方案，细菌培养虽然能检测出患者的细菌感染，但用时较长，不适宜在临床上应用；革兰染色法，在临床应用中众说纷纭，许多以学者研究表明，该法在检验的过程中会受到很多的因素影响，检验结果也随之变化，并且的误差较大；PCR检验法却没有以上两种检验方案的缺点，并且继承了以上两种方案的各种优点，如检出率较高、检出阳性率较高、检验用时短、操作快捷简单，目前已经成为临床上检测阴道细菌的首选方案之一。本次研究结果显示：据对比3种检验方案检出率结果显示：革兰染色法检出率41（10.17%），高于PCR检验法检出率35（8.68%）和细菌培养法检出率13（3.22%），3种检验方案检出率具有统计学意义P＜0.05；对比其阳性检出率结果显示：PCR检验法阳性检出率20（48.78%），明显高于革兰染色法阳性检出率17（41.46%）和细菌培养法阳性检出率12（29.26%），3种检验方案检出阳性率具有统计学意义P＜0.05。
综上所述，PCR检验法具有操作简单、检出结果准确率高、检验用时短等众多优点，值得临床推广和应用。
参考文献：
[1]景晓敏.PCR 检验法和细菌培养法在阴道细菌检验中的对比研究 [J].医药论坛杂志，2014，35（10）：84-85.
[2]史跃杰.99例阴道细菌的检验方法比较分析[J].现代预防医学实验技术及其应用，2011，38（14）：2815-2817.
[3]邱可清，沈学群，高丽华，等.分析阴道细菌检验应用PCR 检验法和细菌培养法的临床应用价值[J].中国现代药物应用，2015，9（12）：74-76.
[4]姚虹，吕治，苏建荣，等.实时荧光定量 PCR 检测阴道加德纳菌的方法及价值[J].现代中西医结合杂志，2013，22（7）：768-770．
[5]吴祥如.实验室对阴道细菌的两种检验方法对比[J].中国卫生产业，2013，11（b）：18-19.
论文作者:杨珂
论文发表刊物:《航空军医》2016年第20期
论文发表时间:2016/11/14
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