康洁[1]2001年在《牛心肌肌钙蛋白T的分离纯化和单克隆抗体的制备》文中研究指明本项实验为从牛心肌组织中通过氯化锂抽提，硫酸铵分级沉淀，离子交换层析提取并鉴定心肌肌钙蛋白T(cTnT)，在SDS-PAGE电泳上为一条区带，亚基分子量为37KD，经高效液相色谱分析为单一峰，氨基酸组成以疏水性氨基酸为主。 用上述纯化的cTnT免疫BALB/C小鼠，取脾与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合，筛选和亚克隆后，获得了4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株：G1，G2，G3，G4。抗体类型均为IgG2b。经小鼠腹腔接种产生腹水，用ELISA法测定单克隆抗体腹水效价为1/10~5，培养上清液为1/10~2。经ELISA和免疫印迹分析证实这几株单抗仅与心肌肌钙蛋白T(cTnT)发生特异反应，可与来源于人心肌的cTnT发生交叉反应，但不与骨骼肌肌钙蛋白T(sTnT)发生反应。 CTnT分离纯化及单抗的制备，为今后心肌损伤的早期诊断及与骨骼肌损伤的鉴别诊断提供了重要手段。
崔衢[2]2006年在《牛心肌肌钙蛋白T的提取、纯化、鉴定及其单克隆抗体的制备》文中指出心肌肌钙蛋白是心肌运动的调节蛋白,心肌梗死等损伤性疾病发生时,其亚单位肌钙蛋白T和肌钙蛋白I释放入血,是诊断心肌损伤的特异性标志物。本研究通过组织匀浆、蛋白层析技术实现对牛心肌肌钙蛋白T的提取和纯化,通过SDS-PAGE和ELISA方法鉴定获得蛋白的性质。获取的蛋白免疫动物后,采用经典的细胞融合技术,制备杂交瘤细胞,通过ELISA方法鉴定培养细胞上清,经杂交瘤细胞克隆,分选,扩增并稳定冻存,获得5株阳性细胞株,为心肌肌钙蛋白检测试剂的国产化奠定实验基础。
参考文献：
[1]. 牛心肌肌钙蛋白T的分离纯化和单克隆抗体的制备[D]. 康洁. 北京市结核病胸部肿瘤研究所. 2001
[2]. 牛心肌肌钙蛋白T的提取、纯化、鉴定及其单克隆抗体的制备[D]. 崔衢. 吉林大学. 2006
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