段小红[1]2000年在《永生化兔髁突软骨细胞系的建立及其生物学特性的研究》文中研究说明髁突是颞颌关节的重要组成部分之一，其表层覆盖着由纤维层、增殖层和软骨层组成的纤维软骨，由于颞颌关节特殊的解剖结构和生理功能特点，使得髁突软骨细胞(mandibular condylar chondrocytes，MCCs)在具有一般软骨细胞共性的同时，又在形态、增殖分化、基质合成和分泌等方面表现出独有的特征。随着细胞培养技术的发展，近年国内外已成功地培养了小鼠、兔等多种动物和人的髁突软骨细胞，对其生物学特性有了一定的认识。由于髁突表层纤维软骨的组织特异性，体外培养的MCCs实际上是处于不同分化阶段软骨细胞的混合体，常常表现出不稳定的表型特征，这为研究MCCs生物学特征带来了一定困难。近年基因转染技术发展迅速，一些学者尝试把某些癌基因的全部或片段导入一些具有有限生命的细胞，获得具有稳定表型的永生化细胞系，以便对目的细胞进行长期的研究。 本研究采用逆转录病毒载体转染的方法，将SV40大T抗原基因片段导入原代培养的MCCs，对转基因细胞进行克隆筛选，首次建立了具有稳定软骨表型的、永生化兔髁突软骨细胞系。 研究结果简述如下： 根据SV40大T抗原基因结构特点，选择适当的限制性内切酶，经过PUC19亚克隆，将大T抗原的基因片段导入pLN系列的逆转录病毒载体pLN-M。重组逆转录病毒载体经过转化、鉴定、大量提取和纯化后，采用脂
段小红, 吴军正, 杨彤元, 王会信[2]2002年在《具有软骨细胞表型特征的永生化兔髁突软骨细胞系的建立》文中研究表明目的 :建立具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。方法 :采用逆转录病毒载体介导的方法将SV40大T抗原基因导入原代培养的兔髁突软骨细胞 ,利用G418筛选阳性克隆并对其进行扩大培养 ,通过RNA点杂交检测转基因细胞I、II型胶原基因的转录。结果 :有一株克隆在体外 1年半稳定传代10 0次以上 ,命名为永生化髁突软骨细胞系 (immortalizedmandibularcondylarchondrocyte ,IMCC) ,点杂交显示IMCC有I、II型前胶原基因的转录。结论 :获得具有稳定软骨细胞表型特征的永生化兔髁突细胞系。
参考文献：
[1]. 永生化兔髁突软骨细胞系的建立及其生物学特性的研究[D]. 段小红. 第四军医大学. 2000
[2]. 具有软骨细胞表型特征的永生化兔髁突软骨细胞系的建立[J]. 段小红, 吴军正, 杨彤元, 王会信. 实用口腔医学杂志. 2002
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