刘菊华[1]2003年在《龙牙百合几丁质酶和β-1、3葡聚糖酶基因的遗传转化研究》文中认为针对尖孢镰刀菌的致病机理：菌丝阻塞维管束引起水分代谢失常和菌丝在植物体内产生毒素(镰刀菌酸)损害膜结构造成代谢失常，从而导致植物萎焉。本实验以龙牙百合为研究对象，应用细胞工程中的离体培养方法并结合转基因技术，以期找到抗尖孢镰刀菌的有效途径。 本研究包括两个主要内容：龙牙百合的组织培养和遗传转化。以龙牙百合为材料，组培研究表明，鳞片叶是组培的适宜外植体。MS+2、4-D2mg/L+6-BA 0.2mg/L是诱导愈伤的最佳培养基，MS+6-BA1mg/L+NAA0.05mg/L是不定芽诱导及伸长的适宜培养基。MS+NAA2mg/L为生根的最佳培养基。本试验已建立了适用于龙牙百合遗传转化的快速高频再生系统。 用携带有几丁质酶基因和β-1、3葡聚糖酶基因的工程菌，通过农杆菌介导法和基因枪转化法转化龙牙百合，经PCR和点杂交检测证明外源基因已经整合到植物染色体中。同时对农杆菌介导法和基因枪法进行比较，发现农杆菌介导法的转化率为16.7％，基因枪法的转化率为50％，因此可能基因枪转化法更适于龙牙百合的遗传转化。
刘菊华, 金志强, 徐碧玉, 郑思乡, 刘志敏[2]2003年在《龙牙百合的植株再生与遗传转化》文中指出以龙牙百合鳞片叶切块为外植体 ,通过多种培养基的比较试验 ,得出MS +2 ,4 -D 2mg/L +6 -BA0 2mg/L是诱导愈伤的最佳培养基 ,MS +6 -BA 1mg/L +NAA 0 0 5mg/L是不定芽诱导及伸长的适宜培养基。MS +NAA 2mg/L是生根的最佳培养基。本试验已建立了适用于龙牙百合遗传转化的快速高频再生系统。用携带有几丁质酶基因和 β - 1、 3葡聚糖酶基因的工程菌 ,通过农杆菌介导法和基因枪转化法转化龙牙百合 ,经PCR和点杂交检测证明外源基因已经整合到植物染色体中。同时对农杆菌介导法和基因枪法进行比较 ,发现农杆菌介导法的转化率为 16 7% ,基因枪法的转化率为 5 0 % ,因此可能基因枪转化法更适于龙牙百合的遗传转化。
参考文献：
[1]. 龙牙百合几丁质酶和β-1、3葡聚糖酶基因的遗传转化研究[D]. 刘菊华. 湖南农业大学. 2003
[2]. 龙牙百合的植株再生与遗传转化[J]. 刘菊华, 金志强, 徐碧玉, 郑思乡, 刘志敏. 分子植物育种. 2003
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